样品不出峰

老师您好，我试过不同只大鼠不同时间的血浆，从几分钟一直到第九个小时，肉眼都看不见，报告显示的峰高都太低了，只有零点几，就还没有做标曲，按照对照品500ug／ml进样，峰高103.7，信噪比＞3，自己推算差不多是15ug/ml的浓度是检测限，不知道这样估算是否合理。
我不知道是不是血浆处理的问题，因为文献里大部分都是氮吹复溶这种，但是因为条件有限没有氮吹和空气吹的仪器，也不能用乙腈，所以我就是单纯参考了少数文献用的直接蛋白沉淀，血浆直接加流动相甲醇，涡旋离心后过滤直接进样了，即使用内插管，血浆和甲醇比例1:1，进样到40ul，色谱图像上的峰高也没有什么太大变化
我本来怀疑是血浆放的时间太长物质分解了，但是几周前最新的一批血浆也是同样的情况，就排除了这种可能。
有一篇文献是鸡的血浆，我看文章里在血浆处理时加了高氯酸，还有的是流动相磷酸用三乙胺调整ph值，不知道这会不会能增加样品溶解