胶体金免疫层析法原理

胶体金免疫层析法（Colloidal Gold Immunochromatography Assay, CGIA）是一种简便、快速的免疫检测技术，常用于现场快速检测（POCT, Point of Care Testing）。该方法结合了免疫学反应和胶体金标记技术，可以用于检测血液、尿液、唾液等生物样本中的抗原或抗体。下面是胶体金免疫层析法的基本原理及其步骤：

原理
胶体金标记：
胶体金是由金纳米颗粒组成的悬浮液，这些金颗粒具有很强的吸收和散射光的能力，因此肉眼可见。
在胶体金免疫层析法中，抗原或抗体被标记在胶体金颗粒上，形成胶体金标记的抗体或抗原。
免疫层析：
层析纸（如硝酸纤维素膜）上预先包被有特定的捕获抗体（对于检测抗原而言）或检测抗原（对于检测抗体而言）。
当样本（如血液、尿液）滴加到试纸上时，样本中的目标分子（抗原或抗体）与标记的胶体金颗粒结合，形成复合物。
检测线和控制线：
在试纸的不同位置上预先包被有两条线：一条是检测线（Test Line, T线），另一条是控制线（Control Line, C线）。
检测线处包被的是捕获抗体或检测抗原，用于捕获样本中的目标分子与胶体金标记物形成的复合物。
控制线处包被的是另一种抗体或抗原，用于验证试验的有效性，确保胶体金标记物能够正常迁移并通过这条线。
结果解读：
如果样本中含有目标分子（抗原或抗体），则会在检测线上形成一条可见的红色或粉红色线条。
控制线上也会形成一条可见的线条，表示试验有效。
如果没有目标分子，则仅在控制线上出现一条线条。
步骤
样本准备：
将待测样本（如血清、尿液）准备好，按照说明书要求进行预处理。
试纸加载：
将样本滴加到试纸的样本垫上，让样本沿着试纸上的毛细作用移动。
反应过程：
样本中的目标分子与胶体金标记的抗体或抗原结合，形成复合物。
复合物继续移动，到达检测线时被捕获抗体或检测抗原捕获。
结果观察：
观察试纸上的检测线和控制线是否出现颜色变化。
如果两条线均出现颜色变化，则表明试验阳性；如果仅控制线出现颜色变化，则表明试验阴性；如果控制线未出现颜色变化，则表明试验无效，需要重新进行。
应用
传染病检测：如疟疾、HIV、乙肝、流感病毒等。
药物滥用检测：如吗啡、甲基苯丙胺、大麻等毒品。
食品安全：如检测食品中的抗生素残留、农药残留等。
环境监测：如检测水中的重金属离子等。
优点
快速简便：整个检测过程通常只需要几分钟，非常适合现场快速检测。
无需特殊设备：操作简单，不需要复杂的仪器设备。
高灵敏度：胶体金标记技术使得检测具有较高的灵敏度。
便携性强：试纸小巧轻便，便于携带和储存。
缺点
定量精度较低：虽然可以定性或半定量检测，但对于精确的定量分析不够准确。
可能存在假阳性和假阴性：受样本处理、操作规范等因素影响，可能会出现假阳性和假阴性结果。
胶体金免疫层析法因其简便快速的特点，在临床诊断、公共卫生、食品安全等领域得到了广泛的应用。