仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
评论
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
光谱
>
紫外可见分光光度计(UV)
>
帖子详情
紫外分光光度法测定蛋白质的操作基本步骤和原理
Ins_df638212
2024/09/23
私聊
紫外可见分光光度计(UV)
1 原理:
pro及其降解产物的芳香环基 ,在紫外区内对某一波长具有一定的光选择吸收,在280nm下,光吸收与pro浓度(3~8mg/ml)成直线关系,因此,通过测定pro溶液的吸光度,并参照事先用K氏定氮法分析的标准样品,从标准曲线查出蛋白质的含量。
2 试剂:
(1) 0.1mol/l柠檬酸水溶液。
(2)8mol/l脲[(NH2)2CO]的2NNaOH溶液。 脲的2N氢氧化钠液
(3) 95%乙醇
(4) 无水乙醚
3 仪器
(1) 751型的紫外分光光度计
(2) 离心机
4 操作方法
(1)标准曲线的绘制:准确称取样品.2.00g,置于50ml烧瓶中,加入0.1mol/l柠檬酸水溶液30ml,搅拌30分钟使其充分溶解,用四层纱布过滤于玻璃离心管中,以每秒钟3000~5000转的速度离心10分钟,分别吸出上清夜0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml于6个10ml容量瓶钟,每个容量瓶,8mol/l脲的氢氧化钠溶液充分摇2分钟(如果离心再次离心),取透明液于比色皿中,在280nm下测定其吸光度。(做参比值)
以事先用K氏定氮法测定的样品中蛋白质的含量微横坐标上面的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
(2)样品测定
准确称取试样1.00g→于50ml烧杯中→加0.1mol/l柠檬酸溶液30ml→搅拌10分钟→四层纱布过滤到离心管中→用8mol/L脲的NaOH溶液定容,摇匀后于280nm下测吸光度,从标准曲线上查出pro的含量。
计算: 蛋白质= C/W× 100
C----从标准曲线上查得的pro含量(mg)
W----测定样品溶
液相
当于样品量(mg)
说明:
a.此法运用于糕点,牛乳和可溶性pro样品,测定糕点时,应把表皮颜色去掉。
b.温度对pro水解有影响,操作温度应控制在20~30℃。
近期热榜
【官方邀请】高效液相色谱使用情况有奖调研
9月24日新污染物、新材料专场
一个“不符合”难住新领导
丹纳赫四十周年寄语征集领大礼包
热门活动
【售后专场--招聘会】
第三届微课大赛投票进行中ing
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
【讨论】分光光度法采用不同参比测量时的区别
2011/05/11
【求助】问一个化学问题
2006/12/26
【资料】参考价值很高的论文
2010/11/08
cary5000的期间核查规程和自校的方法
求助
2011/08/24
如何从理论上解释“溶剂极性降低,吸收曲线变平滑”
求助
2011/11/22
紫外的保存数据范围不全
求助
2019/05/14
四联池附件的用途是什么?
求助
2012/07/16
【求助】便携式分光光度计
2008/01/17
紫外分光光度法测定蛋白质的操作基本步骤和原理
分享
2024/09/23
全自动尿液分析仪:选择指南与使用心得分享
分享
2024/09/23
紫外可见光测量吸光度中干扰消除
分享
2024/09/23
求助,想找人开发2个分光光度计的显色剂,有能做的朋友联系我,谢谢!
求助
2024/09/23
紫外全波长扫描的样品浓度应该在什么范围?
已应助
2024/09/21
第一次配硫化氢标准曲线
第十七届原创
2024/09/18
SH-270阴离子表面活性剂分析仪使用心得
第十七届原创
2024/09/18
求助:紫外分光光度计吸光度降低75% 换台仪器就正常
原创
2024/09/15
能力验证结果的整改
第十七届原创
2024/09/18
人比人真的该死!”-同是去参观实验室的两个人给带来的收获却是不同的!!
第十七届原创
2024/09/18
有经验的新进人员为什么就不能“拿来即用”哪?
第十七届原创
2024/09/18
内审员在实验室中的作用
第十七届原创
2024/09/18
【金秋计划】我们做农残的第一台质谱产品安捷伦7890B-5977A气质
第十七届原创
2024/09/18
检测报告出问题真正的法律责任应该由谁来负?
第十七届原创
2024/09/18
台风来临前,实验室如何做好安全防护工作?
第十七届原创
2024/09/18
刚买的设备采用了几天怎么就坏了?
第十七届原创
2024/09/18
安捷伦故障 2.8 高真空规的压力读数太高是什么原因?
求助
2024/09/23
安捷伦GC-MS/MS错误代码2.82.8 高真空规的压力读数太高
求助
2024/09/23
德国GRIEB FS 13 Metall金属杵
分享
2024/09/23
德国GRIEB FS 113异形绳环
分享
2024/09/23
德国GRIEB FM 113载体微动开关
分享
2024/09/23
德国GRIEB FH 13 Metall金属固定环
分享
2024/09/23
德国GRIEB FA 13塑料外壳盖
分享
2024/09/23
全自动尿液分析仪:选择指南与使用心得分享
分享
2024/09/23
品牌合作伙伴
报名即领材料、环境12大解决方案
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...