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新手小白第一次准备用GPC 收集了很多问题望大佬解答

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2024/10/08

凝胶色谱（GPC）

测定多糖的分子量与分子量分布，稀释剂是水
供试品的分子量范围在1000~50000
目前是外送测了一次，外送用的色谱柱排阻限是1000000Da(普鲁兰)和20000000Da(普鲁兰)串联

现在想我们自己进行检测，用赛默飞的液相和示差检测器，色谱柱目前有1000000Da(普鲁兰)，和TSKgel G2500PWXL（查资料是排阻限3000Da(聚乙二醇)）
1、色谱柱的选择
外送检测用的色谱柱排阻限是不是太大了，色谱柱该怎么选择，排阻限到底是什么意思，色谱柱该怎么串联，先排阻限小再排阻限大再流线向检测器吗?
2、分子量标准品的选择
目前准备用右旋糖苷做标准品，中检院的这个标准品，，标准品该怎么配制后进样呢，如果都配制成1mg/ml，称10mg-10ml，不就稀释了吗，还有我看有的文献会配制宽分布和窄分布标准品，这个又是什么意思，不是进六个标准点做标准曲线就可以了吗，还有供试品的浓度该怎么选择，需要重均分子量或数据分子量在线性点的中间吗？

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