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酶重量法测定食品膳食纤维的操作要点
小电子PCB
2024/10/09
小电子
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原创大赛公告
首先,我们要明确实验的目的和原理。酶重量法主要是通过酶解去除样品中的蛋白质和淀粉等非纤维成分,然后通过称重来计算膳食纤维的含量。简单来说,就是通过酶的作用,把膳食纤维从食品中分离出来,再称重量。
接下来,是样品的制备。取约1克的样品,加入75%的乙醇中,振荡30分钟,然后离心15分钟,弃去上清液。这个步骤需要重复一次,确保样品中的可溶性糖分和其他非纤维物质被充分去除。晾干沉淀后,我们就可以进行下一步了。
然后,是酶解处理。这一步很关键,我们要加入纤维素酶和皮二糖酶,让它们在适宜的温度和pH值下发挥作用,分解样品中的非纤维成分。具体来说,先将样品沉淀加入含有纤维素酶和醋酸钠的烧杯中,搅拌均匀,在室温下放置20分钟。之后,再加入皮二糖酶,继续搅拌均匀,室温下放置至少2小时。
酶解完成后,我们就要进行沉淀分离了。将酶解后的样品倒入锥形瓶中,上层液为可溶性纤维,下层沉淀为不可溶性纤维。这里要注意,一定要确保分离彻底,避免可溶性纤维和不可溶性纤维的交叉污染。
最后,是干燥称重。将分离得到的不可溶性纤维沉淀放入钛纸中,进行干燥,直至恒重。然后,称重得到不可溶性纤维含量。总膳食纤维含量则是不可溶性纤维与可溶性纤维含量之和。
在整个实验过程中,有几个注意事项需要特别关注。首先是样品的重复性,确保每次操作的平行性,以提高结果的准确性。其次是可溶性纤维的完全沉淀,避免其在干燥过程中损失。此外,酶解过程中的温度和时间的控制也非常关键,它们会直接影响实验结果。
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