仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

高效液相色谱方法验证篇|关于精密度考量的小知识

液相色谱(LC)

  • 今天继续讲一下液相分析方法验证相关的一些小知识,并结合最新的ICH Q2的要求,方便大家在新的指导政策下把方法验证做的更加完善。之前已讲了方法验证中精密度的概念(详见 液相色谱技能篇|关于方法验证中常见几个概念的小知识(2)https://bbs.instrument.com.cn/topic/8410580),这里就不做过多的描述。

    01.精密度的验证方法

    ICH Q2原文:



    1)重复性(Repeatability):指在相同操作条件下,短时间内由同一操作者使用同一设备对同一样品进行多次测定所得结果的一致性。通常通过计算标准偏差或相对标准偏差来评估。
    2)中间精密度(Intermediate Precision):也称为实验室内精密度,指在同一实验室内,由不同操作者、在不同时间、使用不同设备对同一样品进行测定所得结果的一致性。目的是评估实验室内的变异性。
    3)重现性(Reproducibility):指在不同实验室、由不同操作者、使用不同设备对同一样品进行测定所得结果的一致性。通常用于跨实验室验证,以评估方法在不同实验室间的变异性。
    02.精密度的数据要求在精密度验证中,通常需要提供重复性、中间精密度和再现性的相关数据。这些数据应包括测定结果的平均值、标准偏差(SD)和相对标准偏差(RSD)或置信区间等统计参数。
    03.精密度的实验设计
    1)重复性的实验设计a. 实验设计通常要求对同一样品至少进行9次测定(例如,3个不同浓度水平,每个浓度水平重复测定3次)或100%的试验浓度只说测定6次。b.重复性实验通常在一批内完成,以评估随机误差的影响。
    2)中间精密度的实验设计
    a. 实验设计通常要求不同日期、不同分析人员、不同仪器等因素的考量。
    b.测定次数与重复性一致,这些测定可以在不同的天、由不同的分析人员使用不同的设备完成。
    c.中间精密度的评估有助于了解实验室内部日常操作变化对分析结果的影响。
    3)重现性的实验设计
    a. 实验设计通常要求不同地点、不同分析人员、不同仪器等因素的考量。
    b. 测定次数与重复性一致,这些测定可以在不同的天、由不同的分析人员使用不同的设备完成。
    c. 重现性主要评估实验室间变异性,通常用于分析方法学的标准化。



    ICH Q2指导原则中,如何确定分析方法的可接受精密度范围?

    答:1)根据分析方法的目的和应用场景,确定精密度的要求。例如,含量测定、溶出度测试或杂质检查的精密度要求可能不同。

    2)进行重复性、中间精密度)和重现性实验,评估分析方法在不同条件下的一致性。

    3)计算标准偏差(SD)和相对标准偏差(RSD或%CV),这些指标用于衡量结果的离散程度。

    4)根据分析方法的预期用途和产品的质量要求,设定精密度的可接受标准。这些标准可能包括特定的RSD值或置信区间。(可参考Horwitz方程重复性和回收率变异度接收标准

    如果精密度不满足要求,可能表明分析方法存在问题或实验条件需要优化:

    ①.分析评估:

    首先,应分析精密度不满足要求的原因,可能包括仪器误差、操作不当、样品不稳定等。

    ②.优化实验条件?:

    a. 调整实验参数:重新评估和优化实验条件,如流动相组成、pH值、柱温和流速等,以提高方法的精密度。b. 改进样品制备:检查和改进样品制备过程,确保样品的均匀性和稳定性,减少样品制备过程中的偏差。

    ③.增加重复测定次数

    增加样品的重复测定次数,以获得更可靠的精密度数据。

    ④.仪器误差


    使用的仪器本身不够精密,如未经校正的容量瓶、移液管等,可能导致测定结果与实际结果偏差?。

    综上所述,要提高精密度,也需要从实验方法、仪器精度、人员操作以及样品稳定性等多个方面进行综合考虑和优化?。
    +关注 私聊
  • zhangyongmei

    第1楼2024/10/22

    重复性和中间精密度我们是会考察的,但很少回去考察重现性,失误了??

0
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...