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新柱柱效测试，为何塔板数明显偏低?

zhangyongmei

2024/10/23

液相色谱（LC）

1、确保系统状态正常，如有必要再冲洗一次。
2、柱效受系统死体积扩散影响。沃特世(Waters®)色谱柱出厂测试是在体积最小化的系统上进行，塔板数较高。通常自测如能达到70%以上，就可以接受。
3、色谱柱体积越小,系统死体积(管路、检测器流通池)对柱效的影响就越大。对于小内径色谱柱(2.1和3 mmid)、和/或短的色谱柱(≤10cm),尽可能减少系统死体积(管路长度/内径、流通池),并仔细检查管路与色谱柱的连接。检测器采样频率应设置为20 Hz。
4、用什么条件和什么样品测试的?峰保留时间越短，越容易受系统死体积影响。建议调整流动相条件，使峰保留时间在10分钟(常规HPLC系统)或5分钟(UHPLC系统)。
5、样品进样体积越大，样品溶剂会导致峰扩散。HPLC柱可进样1μL,UPLC柱可进样0.1μL。

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