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【求助】柱压为什么升高?氧化甾醇用什么做溶剂更好?

液相色谱(LC)

  • 新手,第一次做.看见2487关机前还要清洗,这个清洗会经过柱子吗?我用的是C18的柱子,据说不能过100%纯水?那我怎么清洗2487?

    另外,现在在走流动相,甲醇:已腈=3:7,要看基线是不是平稳,是不是也要通过监视器看,监视器上能看见红线在浮动,但是我的2487上的吸广度是ERROR,是怎么回事呢?

    新问题: 出现上面问题后,我重起系统,就没有ERROR了.柱压大概是900左右,用的是millunnium32的软件。开了监视器,走了一会流动相后。就在“单一”那个窗口,按“进样”的那个纽后出现等待,监视器就自己关掉了。然后进样,把进样的阀打到LOAD,进样后,阀打到inject,能听到“滴”的一声。但是m32的那个窗口所有选项一直是灰的,只有进样那个纽可以用,而且一直是waiting状态。监视器也是灰的。然后点“查看”都没有线出来。请问是怎么回事?

    晚上甲醇洗一遍后(30分钟多)就关机了

    第二天过来,直接走的甲醇:已腈=3:7,结果就发现柱压很不稳定,非常不稳定。而且最高可以升到2000多。又是怎么回事啊??

    急!!


    上面的问题都解决了.还有一个就是氧化甾醇用什么做溶剂更好?我用甲醇,而且用0.2um的有机滤膜滤过,结果就把柱子堵了。
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  • Easy-Boy

    第1楼2007/06/13

    用乙腈清洗,呵呵。不要把气泡进入检测器。

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  • bigduck2

    第2楼2007/06/13

    我自己解决了~

    前一天是进样口没有打开,呵呵,所以根本没有进样

    今天是样品问题,把柱子堵了.用甲醇:水=1:1和100%甲醇轮流,反着冲了半天的柱子,现在恢复了~

    真是不容易啊

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  • tanggangfeng

    第3楼2007/06/13

    氧化甾醇可以用已腈和水做,至于柱子堵,样品用0.2um的有机滤膜滤过应该不会堵,除非你的膜滤不好。过滤后你可以用肉眼看看是不是澄清。
    柱子堵得话,你可以反接 低流速0.2ML/MIN 100% 已腈,柱子不要接监测器。冲半个小时应该可以解决。
    甾族化合物滋味一般在210-220吸收强点。如果用紫外可以在这波段设置。有MS最好了呵呵


    bigduck2 发表:新手,第一次做.看见2487关机前还要清洗,这个清洗会经过柱子吗?我用的是C18的柱子,据说不能过100%纯水?那我怎么清洗2487?

    另外,现在在走流动相,甲醇:已腈=3:7,要看基线是不是平稳,是不是也要通过监视器看,监视器上能看见红线在浮动,但是我的2487上的吸广度是ERROR,是怎么回事呢?

    新问题: 出现上面问题后,我重起系统,就没有ERROR了.柱压大概是900左右,用的是millunnium32的软件。开了监视器,走了一会流动相后。就在“单一”那个窗口,按“进样”的那个纽后出现等待,监视器就自己关掉了。然后进样,把进样的阀打到LOAD,进样后,阀打到inject,能听到“滴”的一声。但是m32的那个窗口所有选项一直是灰的,只有进样那个纽可以用,而且一直是waiting状态。监视器也是灰的。然后点“查看”都没有线出来。请问是怎么回事?

    晚上甲醇洗一遍后(30分钟多)就关机了

    第二天过来,直接走的甲醇:已腈=3:7,结果就发现柱压很不稳定,非常不稳定。而且最高可以升到2000多。又是怎么回事啊??

    急!!


    上面的问题都解决了.还有一个就是氧化甾醇用什么做溶剂更好?我用甲醇,而且用0.2um的有机滤膜滤过,结果就把柱子堵了。

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  • bigduck2

    第4楼2007/06/14

    我现在用50%的甲醇和100%的甲醇,把柱子反相反复冲了快一天,还是没完全冲出来。堵的是25羟胆固醇,用甲醇溶的。用已睛就可以冲出来吗?

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