【原创】标准样放置的位置不同,对检测结果有影响么?

在研究中发现,使用酶标仪进行测定时,由于加样时间不同,标准的吸光度有所不同.如何能保证较相似的标准曲线?减少测试样品量么?

造成的差异原因是否与反应时间不同,温度在不同时间的变化有关?

减少样品转移时差造成的结果误差,可以使用空白板井(新的或用后用稀盐酸清洗干净的老板井(非同类检测用的)),先把样品转移到相应板井内(250-300微升),然后用八道枪在吸取相应的体积到新检测板井中.这样一来,转移时间差异会大大减少.

造成差异的原因很多，我觉得最主要的原因还是最终显色剂加入时间有差异，最明显的情况就是用单道枪从头加到尾，常常出现加到最后，前面的孔已经显色了的现象。

至于加样的先后影响应该不大，只要反应时间足够（一般有效的抗原抗体反应为30-120分钟即可完成），反应达到平衡后不至于影响最终显色。

而温度的影响据大牛们的研究表明也是有影响的，如边缘的孔和中间孔之间的边缘效应等，都是酶免反应中常出现的现象，这个比较难克服。