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【求助】HPLC基线下降原因?

液相色谱(LC)

  • 大家好>
    本人是新手,在做HPLC时遇到两个问题,如下
    1、柱子平衡不好,基线下降,晚上我一般用纯甲醇保存柱子,第二天早上用50%甲醇冲柱,可是冲了2个小时也没有平衡好,什么原因,流速为1.0mL/min
    2、柱子在保存的时候可以用50%甲醇吗,一般都要求用纯甲醇???(或乙腈)
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  • 深海的海豚

    第1楼2007/06/28

    柱子保存不一定非要用纯甲醇或者乙腈;
    柱子平衡不好不会是保存的问题,之前使用过什么流动相?
    现在流动相纯度如何?是否有杂质?脱气效果如何?
    如果换上其它色谱柱结果如何?
    我们常用的色谱柱也都是在85%水相里面保存过夜,没有问题。
    进行几种尝试,逐步排除,最终总会找到问题所在的。

    syxin 发表:大家好>
    本人是新手,在做HPLC时遇到两个问题,如下
    1、柱子平衡不好,基线下降,晚上我一般用纯甲醇保存柱子,第二天早上用50%甲醇冲柱,可是冲了2个小时也没有平衡好,什么原因,流速为1.0mL/min
    2、柱子在保存的时候可以用50%甲醇吗,一般都要求用纯甲醇???(或乙腈)

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  • syxin

    第2楼2007/06/28

    我以前用的是甲醇乙酸水
    结果换上纯甲醇进行保存
    第天早上换上甲醇水冲的时候老是出现这种情况

    我的样品及其它流动相都过滤了(0.45)
    而且也脱气了

    不过在色谱过程中,我感觉当流速调高一点时,泵的声音较大,是不是这个原因??

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  • windhuang

    第3楼2007/07/04

    流速调高泵的声音较大,这个很正常.你用的什么液相?安捷伦和岛津的很明显.
    waters的较不明显.
    基线下降多少?有没计算噪音和漂移?多长时间可以稳定?

    syxin 发表:我以前用的是甲醇乙酸水
    结果换上纯甲醇进行保存
    第天早上换上甲醇水冲的时候老是出现这种情况

    我的样品及其它流动相都过滤了(0.45)
    而且也脱气了

    不过在色谱过程中,我感觉当流速调高一点时,泵的声音较大,是不是这个原因??

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  • 无名胜有名

    第4楼2007/07/04

    应该不是不是泵的原因,是前一天用的流动想没冲干净吧

    syxin 发表:我以前用的是甲醇乙酸水
    结果换上纯甲醇进行保存
    第天早上换上甲醇水冲的时候老是出现这种情况

    我的样品及其它流动相都过滤了(0.45)
    而且也脱气了

    不过在色谱过程中,我感觉当流速调高一点时,泵的声音较大,是不是这个原因??

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  • foxling2

    第5楼2007/07/06

    楼主要讲明具体的色谱条件:比如检测波长,色谱柱类型等。

    如果在末端,比如检测波长210nm以下,要考虑溶剂是不是已经脏了。

    syxin 发表:大家好>
    本人是新手,在做HPLC时遇到两个问题,如下
    1、柱子平衡不好,基线下降,晚上我一般用纯甲醇保存柱子,第二天早上用50%甲醇冲柱,可是冲了2个小时也没有平衡好,什么原因,流速为1.0mL/min
    2、柱子在保存的时候可以用50%甲醇吗,一般都要求用纯甲醇???(或乙腈)

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  • sky2006

    第6楼2007/07/08

    我也遇到这种情况,,不过没有你的那么严重,延长冲柱子的时间就解决了

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  • xuruiming

    第7楼2007/07/13

    我觉得楼主可从以下几个方面考虑:管道漏液,柱温不稳定或正在升温,流动相平衡

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  • noexcuseluffy

    第8楼2007/07/15

    基线走梯度会下降的

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  • zhuning

    第9楼2007/07/24

    你考虑室温了吗,外界环境温度也能造成基线的漂移,

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  • linliu5795

    第10楼2010/09/16

    可能跟流动相有关

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