青林
第6楼2007/11/16
我在使用凝胶柱的时候,因为怕反冲色谱柱对柱子有影响,一直不敢冲洗。我想请问一下各位大侠,我的柱子一般进样80针左右就不行了,我也不知道怎么回事,我使用的是TSK3000SW凝胶柱。我们对色谱柱的维护和保养的方法如下:
新柱子的使用和处理:先使用超纯水以0.2ml/min流速冲洗过夜,后以0.5mol/l磷酸二氢钠以0.1-0.4ml/min流速洗至基线平稳,然后再以1%异丙醇以0.2ml/min流速过夜。
流动相:磷酸二氢钠5.0321g,磷酸氢二钠24.2736g,加水500ml使之溶解,加异丙醇5ml,混匀,PH值为7.0。过0.45膜,超声30分钟备用。
色谱柱工作一天后用1%异丙醇以0.2ml/min流速冲洗过夜。
长时间不用柱子(如周末、放长假)用0.05%叠氮钠溶液以0.2ml/min流洗过夜(15h以上)。之后取下色谱柱,于30度以下常温保存。
我想请教一下,我们严格按照以上的处理方式,柱子也只能使用80针左右,真是百思不得其解!
希望各位大侠帮忙解决!!!
谢谢了!!!!!