生命科学仪器综合讨论
家有宝贝儿
第1楼2007/09/21
理论上是可以的,但由于受到染色条件,电泳分辨率等影响,只能得到大概的比例关系。另外,还与样品中各小肽等的具体分子大小有关系,需要选择合适的胶和浓度。
闲鹤野云
第2楼2007/09/25
那样品如何处理,多指点.谢谢!
第3楼2008/03/14
能推荐一款价格适中性能不错的电泳仪么?蛋白质版主在哪里?
第4楼2008/03/15
这个要根据实验需要来选择,没有通用的,只有最合适的。比如,哪种电泳模式,电压需要多大,分离的目的是什么,等等。。。满足需要的就是最合适的。目前做电泳的厂家比较多,国外的BIO-RAD可以算是行业的老大,产品比较人性化,另外PARMACIA的也不错,其自动化水平较高。国内的六一仪器厂做的也比较早,如果考虑价格因素可以考虑。具体选型就要根据实验需要了。
第5楼2008/03/15
多谢蛋白质版主,具体操作要求的分离1000D以下的小肽。如何制备样品我真的不懂,我会让学生多给你学习联络。不知6.1 仪器厂的价格为多少?
第6楼2008/03/21
1000D以下的小肽通常认为不适合用常规的电泳系统分离,传统的Tris-甘氨酸-SDS-PAGE电泳分析分辨大分子物质的相对分子质量范围在10000~200000,因此有人在凝胶中加入尿素来提高分离效果,也有推荐采用Tris-Tricine-SDS-PAGE胶电泳检测纯化后的小分子多肽,据说效果不错。
第7楼2008/08/25
好象溶解度不好,在什么缓冲体系下好溶解??
第8楼2008/08/27
前处理的确是一个问题,尤其是成分比较复杂的情况。由于电泳中的溶液一般都是无机的,所以如果含有一定量的酯类,糖类,核酸类等物质,将会给前处理带来很多困难,还有就是蛋白都有一个等电点,缓冲体系的PH越接近等电点,就越难溶解,所以通常的做法是尽量避开。另外对样品完成处理后,一定要离心取上清上样。
第9楼2008/08/28
如果蛋白不能溶于缓冲液,一些蛋白就不能被展开吧,浓度有无要求,很久不做了,都不明白这些基本问题的答案了,多谢蛋白质版主耐心解释。
第10楼2008/08/28
如果不能溶解是一定无法展开的,浓度不太低就可以,也不能太高,否则染色后是一大团,也无法鉴定了,一般10-20ug比较合适。
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