【飞诺美色谱】不同基质中 16 种邻苯二甲酸酯类检测系统解决方案

一、样品前处理方法

1.水性样品 (水、饮料、果汁等)
固相萃取柱：Cleanert ® DEHP 玻璃柱，500mg / 6mL，(P/N：DEHP5006)

1.1样品处理
此类样品包括瓶装纯净水、矿泉水，茶、果汁和功能饮料等；液体样品可直接上样；某些可水溶解的固体样品可以先制成水溶液，然后全部作为待处理液，如无脂糖果。

1.2固相萃取法净化

活化：5 mL 乙酸乙酯、5 mL 甲醇、5 mL 水

上样：10 mL 水性样品

淋洗：5 mL 5% 甲醇水，真空抽干 20 min。

洗脱：加入 2 mL 甲醇浸泡柱床约 1 min，再用 10 mL乙酸乙酯进行洗脱。

检测：将洗脱液用氮气吹干后，以 1 mL 甲醇定容，然后用液相色谱法检测。

备注：此法多适用于配套液相色谱检测，当样品中邻苯二甲酸酯类的含量较低时，需要采用固相萃取富集才能检测的情况。

一般来说，对于此类样品，可以采用正己烷液液萃取的办法，用 GC/MS (灵敏度较高)直接检测。

注：所使用乙酸乙酯必须是农残级。

2.白酒
固相萃取材料：Cleanert® DEHP 玻璃柱，500mg / 6mL (P/N：DEHP5006)

2.1样品制备
将白酒用去离子水稀释，使其中的乙醇的含量为 5%， 作为上样液；取 1 mL 甲醇加入 19 mL 去离子水，混匀，得到 5% 甲醇-水溶液，作为淋洗液。

2.2净化

用玻璃移液管分别取 5 mL 乙酸乙酯、5 mL 甲醇，5 mL 水，在重力状态下依次过柱；用玻璃移液管取100 mL 上样液加到小柱上；用玻璃移液管取 5 mL 5% 甲醇-水溶液淋洗固相萃取柱；淋洗结束之后，开启真空泵抽 20 min，抽干之后，加入 2 mL 甲醇浸泡柱床约 1 min；用 10 mL 乙酸乙酯洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。将洗脱液于 35℃ 氮吹至干，用 1 mL 甲醇定容，将溶液转移至样品瓶中，进行GC/MS 或 HPLC 检测。

注：所使用乙酸乙酯必须是农残级。

3.乳品及乳制品饮料等含蛋白基质样品

固相萃取材料：Cleanert ® MAS-PAE，40 mL玻璃散装填料 (P/N：MS-PAE40)

纯牛奶样品：

样品净化：向玻璃离心管中加入 2 mL 样品，然后加入 4 mL 乙腈：甲基叔丁基谜 (9:1，V/V)，将离心管涡旋2 min，最后加入 Cleanert® MAS-PAE 填料，再将离心管涡旋振荡 2 min 后，以 7000 rpm/min 的转速离心 5 min，取上清液，以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后，待检。

酸奶样品：

样品净化：向玻璃离心管中加入 1 mL 酸奶和 1 mL 去离子水，混匀，然后加入 4 mL 乙腈：甲基叔丁基谜 (9:1， V/V)，将离心管涡旋 2 min，最后加入 Cleanert® MAS-PAE 填料，再将离心管涡旋振荡 2 min 后，以 7000 rpm/min 的转速离心 5 min，取上清液，以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后，待检。

4.低脂固态样品
如奶粉、饼干、果冻、糖果等， 使用固相萃取材料：Cleanert® MAS-PAE，40 mL玻璃散装填料 (P/N：MS- PAE40)
取1 g已制成粉末状的样品，2 mL水，加入到Cleanert® MAS-PAE离心管中，然后加入4 mL乙腈：甲基叔丁基谜(9:1，V/V)，将离心管涡旋2min，最后加入Cleanert® MAS- PAE填料，再将离心管涡旋振荡2min后，以7000 r/m的转速离心5min，移取全部上清液至带刻度离心管中，用乙腈： 甲基叔丁基谜(9:1，V/V)将溶液定容为5 mL，以PAEs专用过滤头过滤后，待检测。

5.酱油
固相萃取材料：Cleanert® MAS-PAE-C，40 mL玻璃散装填料 (P/N：MS-PAE40-C)
样品净化：
向玻璃离心管中加入 2 mL 样品，然后加入 4 mL 乙腈：甲基叔丁基谜 (9:1，V/V)，将离心管涡旋 2 min，最后加入 Cleanert® MAS-PAE-C 填料，再将离心管涡旋振荡2 min 后，以 4000 rpm 的转速离心 5 min，取上清液，以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后，待检。

6.油性样品
方法一：内部方法
固相萃取柱：Cleanert® PAE-G 玻璃柱，3g/6mL (P/N：PAE30006-G)

（1）样品制备
用万分之一天平称取 0.1 g 油，置于玻璃离心管中，然后加入 3 mL 乙腈，涡旋 2 min，超声 2 min，以 4000 rpm离心 2 min，将上清液转移至另一玻璃管中，在 40℃ 下以氮气吹干，加入 2 mL 正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。

（2）固相萃取方法

活化： 5 mL 正己烷

上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中淋洗：用 10 mL 1% 乙酸乙酯的正己烷

洗脱：用 5 mL 50% 乙酸乙酯的正己烷

收集洗脱液，在 40℃下以氮气吹干，加入 1 mL 乙腈，涡旋 1 min，超声 1 min，以 4000 rpm 离心 2 min，取上清液进 GC/MS 检测。

注：所使用乙酸乙酯必须是农残级。

方法二、SN/T 3147-2012

固相萃取柱：Cleanert® PSA 玻璃柱，1g / 6mL (P/N：PA00006-G)

（1）样品制备
称取 1.0 g 样品于玻璃离心管中，加入 2 mL 正己烷和10 mL 乙腈，涡旋 2 min，以 4000 r/m 离心 2 min，转移下层清液转移至另一样品瓶中，以 10 mL 乙腈重复提取样品一次，合并提取液，40℃ 氮气吹至近干，加入 2 mL 正己烷复溶作为待净化液。

（2）净化

活化：将 Cleanert® PSA 玻璃固相萃取柱用 5 mL 丙酮、5 mL 正己烷活化

上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中；

洗脱：用 5 mL 正己烷，然后用 5 mL 4% 丙酮—正己烷溶剂洗脱，合并洗脱液

收集洗脱液，在 40℃下以氮气吹干，加入 1 mL 乙腈溶解，进 HPLC 检测。

7.复杂基质样品 (如方便面填料包)
固相萃取柱：Cleanert® PAE-C 玻璃柱，1g / 6mL (P/N：PAE30006-C)

7.1样品制备
用万分之一天平取 0.5 g 调料，置于玻璃样品瓶中，加入 3 mL 乙腈/甲基叔丁基醚 (9:1，v/v)，涡旋 2 min，超声2 min，以 4000 r/m 离心 2 min，将上清液转移至另一干净样品瓶中，往装调料的样品瓶中再加入 3 mL 乙腈/甲基叔丁基醚 (9:1，v/v)，涡旋 2 min，超声 2 min，以 4000 r/m 离心2 min，将上清液合并，于 40℃ 氮气吹干，加入 1 mL 正己烷，摇匀，作为待净化液。

7.2样品净化
活化：5 mL 正己烷上样：全部待净化液
淋洗： 10 mL 1%乙酸乙酯/正己烷 (v/v)
洗脱：5 mL 乙酸乙酯：正己烷 (50:50，v/v)
将洗脱液于40℃下氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋混合 1 min，超声 1 min，4000 r/m 离心 3 min，转移上清液至进样样品瓶中，待检测。
注：所使用乙酸乙酯必须是农残级。

8.保健品（粉末状样品）
固相萃取材料：Cleanert® MAS-PAE，40 mL玻璃散装填料 (P/N：MS-PAE40)
用万分之一天平取样品0.5g，置于12mL玻璃样品瓶中，加入4mL乙腈/甲基叔丁基醚（9:1，v/v），涡旋2min，加入Cleanert MAS-PAE填料，涡旋2min，超声2min，以7000r/m 离心5min，用PAEs专用滤头过滤上清液，待检测。

9.保健品（胶囊等样品）

固相萃取材料：Cleanert® MAS-PAE-C，40 mL玻璃散装填料 (P/N：MS-PAE40-C)

以内装液体的胶囊为例，用干净针将胶囊挑破，将胶囊中 的液体挤出，用万分之一天平称取样品0.1g，置于12mL玻璃样品瓶中，加入4mL乙腈/甲基叔丁基醚（9:1，v/v），涡旋2min，加入Cleanert MAS-PAE-C填料，涡旋2min，超声2min，以7000r/m离心5min，用PAEs专用滤头过滤上清液， 待检测。

二、检测方法

1.高效液相色谱法
色谱条件
色谱柱：Venusil® XBP C18-L ，4.6×250 mm，5 µm， 150Å (P/N：VX952505-L)；
流动相：A 相-水，B相-甲醇:乙腈 = 50:50 (v/v)
流速：1.0 mL/min； 波长：242 nm
进样量：5 µL (样品浓度 100 ppm)， 50 µL (样品浓度 10 ppm)；
溶 剂：正己烷/流动相 A + 流动相 B (40+60)； 柱 温：30℃
梯度洗脱：见表1
表 1. 液相色谱梯度洗脱条件

图 1. 16 种邻苯二甲酸酯类标准品HPLC 色谱图( 样品浓度为 25 ppm)

( 邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二(2- 甲氧基) 乙酯DMEP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二苯酯，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二(4- 甲基-2- 戊基) 酯BMPP，邻苯二甲酸二己酯DHXP，邻苯二甲酸二(2- 乙基己基) 酯DEHP，邻苯二甲酸二辛酯DNOP，邻苯二甲酸二壬酯DNP)

2.气相色谱质谱法

2.1气相色谱条件
色谱柱：DA-5MS，30 m×0.25 mm×0.25 µm； 进样口：250℃，不分流进样；
进样量：1 µL；
程序升温：50℃ (1 min) 20℃/min 220℃ (1 min) 5℃/ min 280℃ (4 min)；流速：1 mL/min

2.2质谱条件

接口温度： 280 ℃； 电离方式： EI； 电离能量： 70 eV；溶剂延迟：7 min；监测方式：SIM 模式，监测离子见表2。

表 2. 16 种邻苯二甲酸酯类化合物定量离子及定性离子

三、订货信息