摘要： 本实验采用固相萃取结合高效液相色谱串联荧光检测器（SPE-HPLC) 的方法，建立了香油中苯并芘残留量的检测方法。香油经正己烷溶解，Cleanert Silica 和 Cleanert BAP-3 固相萃取柱净化，Venusil ASB C18 色谱柱（4.6 × 250 mm，5 μm，150 Å）分离，水和乙腈为流动相进行等度洗脱，外标法进行定量。结果表明，苯并芘添加量为 0.1 mg/kg 时，回收率在 80% ~ 100%之间，能够满足检测要求。
关键词:苯并芘；Cleanert Silica 固相萃取柱；Cleanert BAP-3 固相萃取柱；Venusil ASB C18 色谱柱
前言
苯并芘又称苯并（α）芘，英文缩写 BaP，是一种常见的高活性间接致癌物和突变原。
BaP存在于煤焦油、各类炭黑和煤、及焦化、炼油，沥青、塑料等工业污水中。肉和鱼中的 BaP 含量取决于烹调方法，水果、蔬菜和粮食中的 BaP 含量取决其来源。主要来自洗刷大气的雨水水中的 BaP 以吸附于某些 颗粒 上、溶解于水中和呈胶体状态等三种形式存在，其中大部分吸附在 颗粒物质 上。BaP 被认为是高活性致癌剂，但并非直接致癌物 ，必须经细胞微粒体中的混合功能氧化酶激活才具有致癌性。BaP 不仅广泛存在于环境中，而且与其它多环芳烃的含量不一定的相关性，长期生活在含 BaP 的空气环境中会造成慢性中毒。许多国家的动物实验证明，BaP 具有致癌、致畸、致突变性。 危险特性，遇明火、高热可燃。受高热分解放出有毒的 气体因此通过有效的实验技术手段，对香油中的有关苯并芘残留进行监控，以确保消费者对食品消费的安全具有重要意义。
本实验通过优化前处理方法建立了苯并芘在香油中的高效液相色谱方法。
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪（配荧光检测器）
试剂材料
正己烷、二氯甲烷、乙腈均为色谱纯；实验用水为超纯水；
苯并芘标准品（纯度 99%）；
一次性无菌注射器；针式过滤器 PTFE(0.22 µm，直径 13 mm)；
Cleanert Silica 固相萃取柱柱：500 mg/6 mL（货号：SI5006）
Cleanert BAP-3 固相萃取柱柱：500 mg/6 mL （货号：Bap5006）
样品制备
样品处理
称取香油 0.5 g，置于 12 mL 样品瓶中，加入 3 mL 正己烷，涡旋震荡溶解，作为待净化液。
样品净化
取 Cleanert BAP-3 萃取柱 (500 mg/6 mL)，需在柱上串联一只 Cleanert Silica 固相萃取柱，依次用 5 mL 二氯甲烷，5 mL 正己烷活化小柱；将上述待净化液上样到小柱上，然后用 2 mL 正己烷润洗样品瓶，将润洗液也上样到柱上，先用 5 mL 正己烷淋洗串联柱，待溶液完全滴至 Cleanert BAP-3 上，将 Silica 硅胶柱弃去，再用 5 mL 正己烷淋洗Cleanert BAP-3 柱，弃去淋洗液；最后用 5 mL 二氯甲烷洗脱，收集；40℃氮气吹干洗脱液，用 1 mL 乙腈溶解定容，超声 10 s，过 0.22 µm PTFE 滤膜后进 HPLC 检测。
实验条件
液相条件
色谱柱：Venusil ASB C18，5 µm，150 Å，4.6 × 250 mm
流动相：水︰乙腈 = 12︰88
柱 温：30℃
进样量：20 µL
流 速：1.0 mL/min
发射波长：406 nm；激发波长：384 nm
结果与讨论
由表 1 可知，采用固相萃取结合高效液相色谱法检测苯并芘的加标回收率在 80% ~100%之间，CV 值小于 10%，能够满足检测要求。由图可看出经 Cleanert Silica 串联Cleanert BAP-3 专用柱净化，采用 Venusil ASB C18 色谱柱检测得到的苯并芘峰形良好，且保留时间稳定。
实验结果
结论
本实验建立了香油中苯并芘残留量的前处理方法，并结合高效液相色谱对香油中苯并芘的残留量进行了测定。对于加标量为 0.1 mg/kg 的样品进行了检测，回收率在 80%~ 100%之间，符合要求。
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