摘要 :本实验采用 Agela LC-10F 高压半制备仪器,选择 Venusil ASB C18(10 µm,150 Å,10×250mm)填料对酒醅中多肽进行了纯化。结果表明:样品在 214 nm 下,流动相为 0.1%TFA 水溶液和乙腈,进行洗脱,能够有效分离,峰形良好。
关键词:Agela LC-10F 高压半制备系统;酒醅样品;Venusil ASB C18
前言
众所周知白酒在酿造过程中存在大量的细菌、放线菌、酵母菌及霉菌,这些微生物不仅产生大量的淀粉、蛋白质。纤维素水解酶,同时产生多种具有生理活性的次生代谢产物。这些特殊的次生代谢产物对新药物发现具有重要意义。由于此类样品中成分极为复杂,分离较为困难,主要表现在峰型差、分离度不高、分子量分布广,本实验建立的制备纯化方法尝试使用特殊填料并使用简单的流动相来实现分离。
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
Agela LC-10F 高压半制备仪器,
试剂材料
水为去离子水;
乙腈是制备级;
高效液相色谱柱:Venusil ASB C18,10 µm,150 Å,10×250 mm;
酒醅样品:客户提供。
样品前处理
样品是棕色液体,用 0.22 µm 滤膜过滤后直接上样。
制备 条件
色谱柱:Venusil ASB C18,10 µm,150 Å,10×250 mm;
流动相:A:0.1%TFA 水溶液;B:乙腈;
检测器:214 nm;
流 速:4 mL/min;
进样量:0.05 mL;
梯 度:
结果与讨论
本实验采用 Venusil ASB C18(10 µm,150 Å,10×250 mm)对酒醅样品进行了制备,由表 1 及图 1 可知,流动相为 0.1%TFA 水溶液和乙腈,进行梯度洗脱时,样品通过制备,峰形良好,分离度满足客户需求。
结论
本实验采用 Venusil ASB C18(10 µm,150 Å,10×250 mm)色谱柱对酒醅样品进行了制备。结果表明 Venusil ASB C18(10 µm,150 Å,10×250 mm)填料对该样品分离效果良好,能够分离样品。
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