四环素类抗生素为广谱抗生素,对革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌、立克次氏体等均有抑制作用。四环素类药物进入水产品领域已有多年,该类药物的滥用会给食品安全带来隐患。
根据GB 31656.11-2021,测定水产品中土霉素、四环素、金霉素和多西环素残留量的第一法为高效液相色谱法。其试验涉及标准溶液配制,内容如下:
1. 标准储备液(100μg/mL):分别准确称取适量标准品,用甲醇解释定容配制成土霉素、四环素、金霉素和多西环素浓度均为100μg/mL的标准储备液。-18℃以下避光储存,有效期1个月。
2. 混合标准中间液:用Miragen电动移液器分别准确移取土霉素、四环素、金霉素和多西环素标准储备液1.0、1.0、2.0、2.0mL于100mL容量瓶,用甲醇释并定容,配制成土霉素、四环素、金霉素和多西环素浓度分别为1.0、1.0、2.0、2.0μg/mL的混合标准中间液。-18℃以下避光储存有效期为7d。
3. 标准曲线的备制:准备4个10mL的容量瓶,采用opus电子瓶口分配器(10mL款)的stepper模式,设置分液体积0.5、1、2、5mL,然后排气泡进行分液。4个体积的混合标准中间溶液分别加入4个容量瓶中。
用甲醇-咪唑缓冲溶液定容至刻度,加上已有的混合标准中间液,可得土霉素和四环素浓度分别为50,100,200,500,1000ng/mL,金霉素和多西环素浓度分别为100,200,400,1000,2000ng/mL的混合标准系列工作溶液供高效液相色谱测定。以待测物峰面积为纵坐标、相应的标准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线。计算回归方程和相关系数。
实验室移取几微升到几毫升的液体,一般采用移液器。Miragen电动移液器,数值靠设定或选定,电机控制活塞运动。吸液和排液可分次数且各段体积可调,分液程序可储存,可实现单吸多排、多吸单排等效果,有步骤少、更稳定、调数快、模式多等诸多优势,可用于移液、灌装、逐滴补液,代替手动移液器、部分移液管和滴管。
德国赫施曼的opus分液系列产品,可自动连续分液,且分液次数、间隔时间和流速均可调,既可进行基础的等体积分液,也可进行不等体积分液(每个体积均独立可调,如分5次,体积分别为1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL),单次分液量最小10uL,最大500mL,可用于大批量移液、稀释剂补液(代替烧杯和玻璃棒),还可代替量筒、移液器和部分移液管。
赫施曼opus分液系列产品可与Miragen电动移液器配合进行快速的梯度稀释,也可以配合容量瓶满足更高精度要求的精密稀释,与常规的稀释操作相比,让稀释配液更加简单、便捷、可靠!
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