牛奶中黄曲霉毒素 M1 检测的免 疫亲和柱法(Copure® 黄曲霉毒素 M1 免疫亲和柱)

2021/12/13   下载量: 0

方案摘要

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应用领域 食品/农产品
检测样本 液体乳
检测项目 真菌毒素>黄曲霉毒素M1
参考标准 牛奶中黄曲霉毒素 M1 的检测

免疫亲和柱净化(Copure® 黄曲霉毒素 M1 免疫亲 和柱,1 mL) 上样:将 20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端,取待净化液以 1-2 滴 / 秒的速度通过免疫亲和柱,弃掉流出的液体。 淋洗和洗脱:加 10 mL水淋洗柱子,弃掉流出的液体;抽干小柱; 加入 4 mL 乙腈分两次缓慢洗脱,流速约为 2-3 秒 / 滴。 重新溶解:在 40℃下氮吹至近干,加初始流动相定容至 1 mL,过 0.22 µm 滤膜,待上机测试。

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配置单
方案详情

一、样品提取 

称取 4.0 g 牛奶样品,加 10 mL 甲醇涡旋 10 分钟,4℃下 6000 转冷冻离心 10 分钟,取 2 mL 提取液加 40 mL PBS 溶液 稀释待净化。 

二、免疫亲和柱净化(Copure® 黄曲霉毒素 M1 免疫亲 和柱,1 mL) 

上样:将 20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端,取待净化液以 1-2 滴 / 秒的速度通过免疫亲和柱,弃掉流出的液体。 淋洗和洗脱:加 10 mL水淋洗柱子,弃掉流出的液体;抽干小柱; 加入 4 mL 乙腈分两次缓慢洗脱,流速约为 2-3 秒 / 滴。 

重新溶解:在 40℃下氮吹至近干,加初始流动相定容至 1  mL,过 0.22 µm 滤膜,待上机测试。 

三、仪器条件 

设备:岛津 HPLC-30 A 色谱柱:Inertsil ODS-3 (2.1 mm×75 mm, 3 µm) 检测器:RF-20A 荧光检测器 检测波长:激发波长:435 nm 发射波长:365 nm 流动相:A:乙腈 B:水 洗脱方式:等度洗脱,A:B=25:75 流速:0.3 mL/min 进样体积:1 µL

 四、实验结果 

表 1 1.0 μg/kg 牛奶中黄曲霉毒素 M1 的添加回结果

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