Copure® | 猪肉中阿莫西林残留的测定(液相色谱-串联质谱法)

2023/06/25   下载量: 0

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应用领域 食品/农产品
检测样本 畜禽肉及副产品
检测项目 兽药残留>阿莫西林
参考标准 /

阿莫西林(Amoxicillin),属于青霉素类β-内酰胺抗生素,为半合成的耐酸广谱青霉素类抗菌素。阿莫西林的不当或过量使用都会造成其在动物性食品中的残留,食用后会导致人体内白血球降低,影响内脏功能,发生脏器损害等。 本方案采用0.2 %甲酸乙腈:水=80:20(V:V)溶液提取,Copure® HLB Lim净化,液相色谱-串联质谱分析,建立了对动物猪肉中阿莫西林药物残留量的测定方法,通过加标实验验证,回收率和精密度均能满足标准要求。

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猪肉阿莫西林残留的测定

液相色谱-串联质谱法

阿莫西林(Amoxicillin),属于青霉素类β-内酰胺抗生素,为半合成的耐酸广谱青霉素类抗菌素。阿莫西林的不当或过量使用都会造成其在动物性食品中的残留,食用后会导致人体内白血球降低,影响内脏功能,发生脏器损害等。

本方案采用0.2 %甲酸乙腈:水=80:20(V:V)溶液提取,Copure® HLB Lim净化,液相色谱-串联质谱分析,建立了对动物猪肉中阿莫西林药物残留量的测定方法,通过加标实验验证,回收率和精密度均能满足标准要求。

1、 提取

准确称取粉碎均匀的猪肉样品1.00 g于干净离心管中,加入5 mL 0.2 %甲酸乙腈:水=80:20(V:V)溶液,涡旋混匀后超声提取20 min,8000 r/min离心5 min,待净化。

二、净化

取2.5 mL上述上清液至Copure® HLB Lim柱,收集全部流出液,流出液氮吹近干后,用定溶液(475 mL水+25 mL乙腈+1.5 mL冰乙酸)定容至1 mL,过滤膜上机测试。

三、基质曲线的制备

称取7 个阴性1.00 g(精确至0.01 g)试样至50 mL离心管中,加入相应体积的阿莫西林使用液,样本中的阿莫西林浓度分别为1.0、2.0、4.0、10、20、30、40 μg/kg。按上述前处理方法进行提取净化,最后定容过滤膜上机测试。

四、仪器条件

4.1 色谱条件

仪器:UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura)

色谱柱:CommaSil® C18 (2.1 mm×100 mm, 1.7 μm)

流动相:A:0.1%甲酸水  B:乙腈

洗脱方式:梯度洗脱,见表1

1 梯度洗脱程序

时间/min

A0.1%甲酸水)/%

B乙腈/%

0.00

95.0

5.0

1.00

95.0

5.0

2.00

65.0

35.0

3.50

5.0

95.0

4.00

5.0

95.0

4.10

95.0

5.0

6.00

95.0

5.0

流速:0.400 mL/ min

柱温:35 ℃

进样量:5 μL

4.2 质谱条件

离子源:HESI         电喷雾电压:3500 V

鞘气压力:28 arb       辅气压力:5 arb

离子传输管:380 ℃     辅气温度:420

2 组分名称、保留时间及特征离子一览表(*为定量离子)

种类

保留时间/min

母离子

子离子

阿莫西林

2.69

366.05

114.0*、208.0

五、实验结果

5.1 线性范围

表3  阿莫西林线性关系、相关系数


化合物

线性回归方程

R2

阿莫西林

y=711.46x-146.75

0.9981

5.2 加标回收

表4  阿莫西林加标回收率

化合物


10 μg/kg

回收率(%)

平均回收率(%)

RSD(%)

阿莫西林

108

107

108

108

0.54


1 添加水平为10 μg/kg时猪肉阿莫西林提取离子

6、 订购信息

货号

描述

包装

COHLB360-Lim

Copure® HLB-lim净化柱,60 mg/3 mL

50支/盒

SDC-3000-D

biocomma® 多管涡旋混匀仪

1台/箱

BN24

智能水浴氮吹仪

1台/箱

SF250-22-NL

尼龙针式过滤器,直径25 m,孔径0.22 μm,有机系

100个/盒

SC2-1

2 mL蓝色聚丙烯盖,白色PTFE/红色硅胶垫,9-425

100个/盒

V2-AL

2 mL螺纹棕色样品瓶,带书写处11.6*32 mm,9-425

100个/盒



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