大鼠卵巢颗粒细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

大鼠卵巢颗粒细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的大鼠卵巢颗粒细胞采用先机械分离，而后胶原酶消化，最后差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠卵巢颗粒细胞经FSHR免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

大鼠卵巢颗粒细胞分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。卵巢颗粒细胞是卵巢的主要功能细胞，其增殖与分化直接影响着卵泡的生长启动、发育、排卵、黄体形成以及甾体激素分泌等卵巢功能活动。卵巢颗粒细胞是卵泡内的最大细胞群，也是主要的功能细胞，卵泡发育的显著标志之一就是颗粒细胞迅速生长及增殖，而成年动物的卵泡闭锁主要是由颗粒细胞凋亡引起，尤其在卵泡发育后期，此外，颗粒细胞还与卵泡膜细胞共同完成卵巢激素的合成，维持着有利于卵母细胞生长和成熟的微环境。细胞形状呈圆形或椭圆形。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

Ac-His-OH  39145-52-3  C8H11N3O3

Boc-ß-HoArg(Tos)-OH  136271-81-3  C19H30N4O6S

Fmoc-Alaninol  161529-13-1  C18H19NO3

H-Tyr-OH  60-18-4  C9H11NO3

H-His(Nτ-Me)-OMe.2HCl  57519-09-2  C8H13N3O2.2HCl

L-Cys(4-MeBzl)-ol  438237-83-3  C11H17NOS

Boc-Chg-OH  109183-71-3  C13H23NO4

Fmoc-Val-OSu  130878-68-1  C24H24N2O6

Fmoc-D-Gln(Trt)-OH  200623-62-7  C39H34N2O5

H-Thr(tBu)-OMe.HCl  71989-43-0  C9H19NO3.HCl

H-1-Nal-OH  55516-54-6  C13H13NO2

H-N-Me-D-Ala-OH  29475-64-7  C4H9NO2

Fmoc-Phe(4-I)-OH  82565-68-2  C24H20INO4

H-Phe(2-F)-OH  19883-78-4  C9H10FNO2

Fmoc-D-Glu(OtBu)-OH  104091-08-9  C24H27NO6

小鼠转铁蛋白受体2(TFR2)ELISA试剂盒 ，英文名： TFR2 ELISA Kit

犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA检测试剂盒CanineheparincofactorⅡ,HCⅡELISAKit 96T/48T

犬血管紧张素转化酶(ACE)免疫试剂盒 Dog angiotensin I conveing enzyme(peptidyl-dipeptidase A)1(ACE)ELISA kit

英文名称HA透明质酸规格：96T/48T

超白金TAGDNA聚合酶200U

Ratglucocoicoidreceptor,GRELISA试剂盒大鼠糖皮质类固醇受体(GR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

大鼠卵巢颗粒细胞小鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒 ，英文名： IFN-β/IFNB ELISA Kit

大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA检测试剂盒Ratmaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAkit 96T/48T

人P0蛋白抗体(IgM)免疫试剂盒 Human myelin protein zero aibody IgM ELISA Kit

英文名称MouseSolubleCD40ligandELISAKit小鼠可溶性CD40配体(sCD40L)规格：96T/48T

胞浆谷胱甘肽S转移酶(GSHST)活性酶动力比色法定量检测试剂盒20次

rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISA试剂盒兔子促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

猪Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human ai spindle aibody (MSA) ELISA Kit 人抗纺锤体抗体(MSA)ELISA试剂盒

Porcinetissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 猪基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAGEsELISAKit大鼠晚期糖基化终末产物规格：48T/96T

血液肾素(renin)荧光定量检测试剂盒20次

MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒规格：96T/48T