大鼠结肠成纤维细胞

报价:¥3320
供货周期: 现货
品牌: 派瑞曼
规格: 25mL
货号: P-X1566
有效期: 12月
标准值: T
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原代培养原理和应用:

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一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞,置于合适的培养基中培养,在无菌、适当温度和一定条件下,使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数,是指细胞培养的次数,从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段,都属原代培养,一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。QQ截图20241029145739.jpg

二、原代培养细胞直接来源于活体组织,体外培养也尽量模拟体内环境,使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态,可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段,亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素:取材、培养条件的优化、无菌操作,特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言,想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍,但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心,已构建细胞培养和实验平台,可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞,并在此基础上提供相关细胞实验服务,包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

大鼠结肠成纤维细胞
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产品名称

大鼠结肠成纤维细胞

组织来源

结肠

产品规格

5×105cells/T25细胞培养瓶

生长特性

贴壁

传代特性

可传3代左右

细胞形态

成纤维细胞样

 

培养信息:

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包被条件:

培养基:含FBSbFGFInsulinPenicillinStreptomycin

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁

细胞形态:成纤维细胞样

传代特性:可传3代左右

消化液:0.25%胰蛋白酶

培养条件:气相:空气,95%CO25%

大鼠结肠成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介:

实验室分离的大鼠结肠成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10cells/瓶。

质量检测:

实验室分离的大鼠结肠成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介:

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大鼠结肠成纤维细胞分离自结肠组织;结肠在右髂窝内续于盲肠,在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分,大部分固定于腹后壁,结肠的排列酷似英文字母“M”,将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为:黏膜(上皮层、固有层、黏膜肌层),黏膜下层(疏松结缔组织),肌层(内环形、外纵行两层平滑肌),外膜(纤维膜或浆膜)。结肠成纤维细胞主要分布于外膜(纤维膜或浆膜)结缔组织内。成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的结肠成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

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贴壁细胞传代操作步骤:

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用移液管或者巴氏吸管吸取培养液;

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液(PBS)冲洗细胞1-2次;

弃PBS,加入胰蛋白酶-EDTA消化液(消化液浓度根据各细胞不同有调整),轻轻摇晃培养瓶,使胰酶与细胞表面充分接触,37 ℃孵育2-3 min,加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中,800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清,加入预热的完全培养基重悬细胞,轻轻吸打混匀,吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数,根据细胞量选择合适的传代比例,最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤:

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悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮,无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞损伤较小。悬浮细胞传代,通常有两种方法,直接传代法和离心传代法。

(1)直接传代法

① 悬浮细胞长满至80%-90%左右(细胞悬液变黄,最大细胞密度随细胞系不同而有所差异),即可传代;

② 用吸管吸弃细胞悬液1/2~2/3;

③ 加入适量的新鲜培养基,继续培养。

(2)离心传代法

① 将细胞悬液转移到离心管内;

② 800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清;

③ 使用新鲜的培养基重悬细胞;

④ 吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。

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Boc-Lys-OH  13734-28-6  C11H22N2O4

Boc-D-Asn-OH  75647-01-7  C9H16N2O5

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