人食管成纤维细胞

细胞简介：

人食管成纤维细胞分离自食管组织；食管是咽和胃之间的消化管，食管在系统发生上起初很短，随着颈部的伸长和心肺的下降，而逐渐增长。食管可分为颈段、胸段和腹段。脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。在发育过程中，食管的上皮细胞增殖，由单层变为复层，食管使管腔变狭窄，甚至一度闭锁，以后管腔又重新出现。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，黏膜层，包括上皮、固有层和黏膜肌层。食管的外膜，由疏松结缔组织构成，富有血管、淋巴管及神经。主要包含食管成纤维细胞，成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

细胞培养操作：

收货处理 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态：

传代密度 细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养

传代代数 可传1-2代左右，建议收到细胞后尽快进行相关实验

传代比例 首次传代建议1：2传代，细胞系密度达80%-90%，即可进行传代培养操作，货期4周左右

传代方法：

1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2.添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；

3.用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4.待细胞完全贴壁后，培养观察；之后每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。

备注：由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，以上方法仅供各实验室参考

客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话：400-080-3389 按 2，我们随时给予解答。

方法简介：

实验室分离的人食管成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的人食管成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：基础培养基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

人食管成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

公司正在出售的产品：

Fmoc-4-piperidylacetic acid  180181-05-9  C22H23NO4

Fmoc-4-sulfomethyl-Phe(Tce)-OH  1146758-11-3  C27H24Cl3NO7S

Fmoc-7-aminoheptanoic acid  127582-76-7  C22H25NO4

Fmoc-8-aminooctanoic acid  126631-93-4  C23H27NO4

Fmoc-Aad(OtBu)-OH  159751-47-0  C25H29NO6

Fmoc-4-fluoro-α-Me-D-Phe-OH .DCHA  1217777-84-8  C25H22FNO4 · C12H23N

Fmoc-4-fluoro-α-Me-Phe-OH . DCHA  1175838-03-5  C25H22FNO4 · C12H23N

Fmoc-4-phenyl-D-Phe-OH  205526-38-1  C30H25NO4

Fmoc-4-phenyl-Phe-OH  199110-64-0  C30H25NO4

Fmoc-4-phosphono-Phe(Bzl↶恰û

Fmoc-4-(neopentyloxysulfonyl)-Abu-OH  220951-81-5  C24H29NO7S

Fmoc-4,5-dehydro-Leu-OH  87720-55-6  C21H21NO4

Fmoc-4-Abz-OH  185116-43-2  C22H17NO4

Fmoc-4-bromo-D-Phe-OH  198545-76-5  C24H20BrNO4

Fmoc-4-cyano-Phe-OH  173963-93-4  C25H20N2O4

小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒 ，英文名： PROG ELISA Kit

小鼠多巴胺(DA)ELISA检测试剂盒Mousedopamine,DAELISAKit 96T/48T

人解整合素样金属蛋白酶33(ADAM33)免疫试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 33,ADAM33 ELISA Kit

Ratai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组蛋白H2A-T1290酸化检测试剂盒10/20次等

MouseAmylinELISA试剂盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

人食管成纤维细胞小鼠白介素20(IL20)ELISA试剂盒 ，英文名： IL20 ELISA Kit

人叠氮胸苷(AZT)ELISA检测试剂盒humanAzidothymidine,AZTELISAKit 96T/48T

大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)免疫试剂盒 Rat Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA Kit

英文名称RatPyriLinksELISAKit大鼠吩(PyriLinks)规格：96T/48T

酒类柠檬酸比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitLZM人溶菌酶规格：48T/96T

猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human maix Gla protein (MGP) ELISA Kit 人基质γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA试剂盒

RabbitsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISAKit 兔可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforai-HDV(Humanai-hepatitisDvirusaibody)ELISAKit人抗丁型肝炎病毒抗体规格：48T/96T

血液D-葡萄糖氧化法定量检测试剂盒20次

PorcineHyaluronicacid,HAELISAKit猪透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

注意事项：

重要提醒

1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2.在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

3.传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

到货须知

1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照（当天以及第 2,3 天请拍照），记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

3.由于运输的原因，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。