人牙周膜成纤维细胞

人牙周膜成纤维细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的人牙周膜成纤维细胞采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人牙周膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

人牙周膜成纤维细胞分离自牙周膜组织；牙周膜（牙周韧带、牙周间隙）是由致密结缔组织所构成。多数纤维排列成束，纤维的一端埋于牙骨质内，另一端则埋于牙槽窝骨壁里，使牙齿固位于牙槽窝内；牙周膜内有神经、血管、淋巴和上皮细胞等。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的牙周膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。牙周膜成纤维细胞（PLFs）作为牙周膜的主体细胞，是牙周膜主要的间质细胞，它不仅具有合成胶原、基质、弹力纤维和糖蛋白的功能，还有吸收胶原吞噬异物的能力，还参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在，利用牙周膜细胞建立体外模型，已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段。

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
公司正在出售的产品：

Fmoc-Tyr(Boc-Nmec)-OH  1033814-21-9  C34H39N3O8

Fmoc-Tyr(Et)-OH  119894-20-1  C26H25NO5

Fmoc-Tyr(malonyl-di-OtBu)-OH  168135-77-1  C35H39NO9

Fmoc-Tyr(PO₃(MDPSE)₂)-OH  158817-11-9  C54H54NO8PSi2

Fmoc-Tyr(PO₃Me₂)-OH  127633-36-7  C26H26NO8P

Fmoc-Trp(For)-OH  152338-45-9  C27H22N2O5

Fmoc-Trp(Me)-OH  1334509-86-2  C27H24N2O4

Fmoc-Trp-Pro-OH  251316-94-6  C31H29N3O5

Fmoc-Tyr(2,6-dichloro-Bzl)-OH  112402-12-7  C31H25Cl2NO5

Fmoc-Tyr(2-bromo-Z)-OH  147688-40-2  C32H26BrNO7

Fmoc-Thr(tBu)-Ser(Psi(Me,Me)pro)-OH  1425938-63-1  C29H36N2O7

Fmoc-Thr(tBu)-Thr(Psi(Me,Me)pro)-OH  1676104-73-6  C30H38N2O7

Fmoc-trans-4-fluoro-Pro-OH  203866-20-0  C20H18FNO4

Fmoc-Trp(Boc)-Ser(Psi(Me,Me)pro)-OH  908601-15-0  C37H39N3O8

Fmoc-Trp(Boc)-Thr(↶恰û

小鼠抑制素结合蛋白(INHBP)ELISA试剂盒 ，英文名： INHBP ELISA Kit

兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA检测试剂盒RabbitProgesterone,PROGELISAKit 96T/48T

犬环0酸腺苷(cAMP)免疫试剂盒 Canine cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit

英文名称HumanPro-ANP(1-98)ELISAKit人心肽Pro-ANP(1-98)规格：96T/48T

化线粒体氧化应激活性氧(ROS)光泽精化学发光法定量检测试剂盒50次

RatIerleukin10,IL-10ELISA试剂盒大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格：96T/48T

人牙周膜成纤维细胞小鼠白介素28A(IL28A)ELISA试剂盒 ，英文名： IL28A ELISA Kit

人游离β绒毛膜促性腺激素(f-βhCG)ELISA检测试剂盒humanfreechorionicgonadoopin,f-βhCGELISAKIT 96T/48T

大鼠抗弓形虫IgM抗体免疫试剂盒 Rat ai-toxoplasmosis IgM Aibody ELISA kit

英文名称RatC3aELISAKit大鼠补体片断C3a(C3a)规格：96T/48T

酒类琥珀酸比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitHPV-IgG人状瘤病毒抗体IgG规格：48T/96T

猪胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human cyclic adenosine monophosphate (cAMP) ELISA Kit 人环0酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒

RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 兔内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAP12ELISAKit大鼠apelin12规格：48T/96T

血清样品液相法去内毒素试剂盒20次

PorcineIerleukin13,IL-13ELISAKit猪白介素13(IL-13)ELISA试剂盒规格：96T/48T

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。