泛素化反应

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  • Nature | 北化工冯越组揭示新型泛素化反应的分子机制
    p style=" text-indent: 2em " 北京时间5月24日凌晨，北京软物质科学与工程高精尖创新中心、北京化工大学生命学院冯越教授研究组在 strong i Nature /i /strong 在线发表了题为 span style=" color: rgb(79, 129, 189) " i Structural basis of ubiquitin modification by theLegionella effector SdeA /i /span 的研究长文(Article)，报道了 span style=" color: rgb(255, 0, 0) " 嗜肺军团菌内一种新型的泛素修饰与连接酶——SdeA及其与泛素复合物的晶体结构，揭示了其修饰泛素及催化新型泛素化过程的工作机理 /span 。这是北京化工大学历史上首篇发表在 strong i Nature、Science、Cell /i /strong 三大国际顶级学术期刊主刊的研究论文。 /p p style=" text-align: center " img title=" 1.jpg" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201805/insimg/dbfb3a2a-d837-40e3-9ed6-2700d7be0684.jpg" / /p p 　　泛素化是泛素在特定酶的作用下，对底物蛋白进行特异性修饰的过程，几乎参与一切生命活动的调控，与肿瘤、心血管等疾病的发病也密切相关【1】。常规的泛素化过程是由E1、E2、E3三个酶的级联反应催化的，最终将泛素蛋白转移到底物的赖氨酸残基上【2】。然而，美国普渡大学罗招庆研究组在2016年的 i strong Nature /strong /i 文章中报道，嗜肺军团菌(嗜肺军团菌是一种条件性致病菌，引起人的以非典型性肺炎为主要症状的军团菌病，该菌通过其Dot/Icm IV型分泌系统输送超过300个效应蛋白到宿主细胞内，改变宿主的多种信号通路以构建其在宿主内的最适生长环境)中以SdeA为代表的SidE家族可以通过一种全新的、完全不同于经典泛素化的方式修饰泛素，并催化其对几种内质网相关蛋白的泛素化过程，实现all-in-one的泛素化模式【3】。紧接着，在2016年底，Ivan Dikic研究组报道了对该反应过程的进一步研究，明确了SdeA的mART和PDE结构域经过两步催化反应最终完成对底物的泛素化过程【4】。在该过程中，泛素第42位的精氨酸先在mART结构域的作用下被修饰成ADP核糖基化泛素。随后，该修饰形式的泛素在PDE结构域的作用下生成磷酸核糖基化泛素，并转移到底物或SdeA自身的丝氨酸残基上。此外，罗招庆实验室的另一项工作证明SidJ具有去泛素化功能以逆转由SidE家族蛋白对底物的修饰，其活性不依赖于活性的半胱氨酸残基【5】。 br/ /p p 　　巧合的是，在Ivan Dikic组Cell文章在线发表的同一天(2016年12月1日)，冯越研究组获得了SdeA核心区231-1190区域的初步结构信息(图1a)，确认了SdeA中mART和PDE组成活性中心，C端结构域形成scaffold的基本结构组成方式(图1b)。通过结构分析和功能实验，冯越研究组发现，与PDE结构域自身即具备催化活性(即可以以ADP核糖基化泛素作为底物催化该新型泛素化反应)不同的是，mART结构域则需要PDE结构域的稳定作用才能维持正常的活性。在维持mART活性的结构要素中，mART结构域一段伸到PDE结构域中的loop(789-797段氨基酸)发挥了重要功能，在该文章中被命名为“Plug” loop。随后，冯越研究组又进一步获得了该区段SdeA与泛素复合物、及与泛素-NADH复合物的晶体结构，从而揭示了泛素与mART结构域的结合模式。 span style=" color: rgb(255, 0, 0) " 在二者结合的过程中，mART结构域的ARTT和PN loop，以及α-helical lobe均发挥了重要作用 /span (图1c)。而泛素分子中参与结合的则主要是其C端区域，尤其是泛素的R72和R74两个氨基酸分别结合到mART结构域表面的两个带负电的凹槽中(图1d)，起到最关键的锚定作用。这两个氨基酸的单突变均可使得泛素失去被SdeA的mART结构域修饰的能力。 /p p style=" text-align: center " img title=" 2.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201805/insimg/ecdeddf9-3bc8-480c-94b1-0a95e6a21c9d.jpg" / /p p style=" text-align: center " 图一& nbsp /p p 　　在SdeA mART和泛素-NADH复合物结构中，最令人吃惊的一点在于，R72要比被修饰的R42更靠近活性中心(作为亲核基团的R42的ε氨基N原子距离作为亲电基团的NAD+中与烟酰胺基团相连的核糖C1原子之间的距离为11.7埃)。从直观上看，这与R42被mART修饰是相矛盾的。经过查阅文献，冯越研究组发现部分mART蛋白的催化机制被认为是SN1反应，即烟酰胺基团会先从NAD+中脱离，使得NAD+转变为活性中间体(oxocarbenium cation intermediate)，之后发生亲核攻击反应。受此启发，冯越研究组将复合物结构中的NADH替换成该活性中间体，并对该体系进行了分子动力学模拟。其结果显示，R72在模拟过程中远离了活性中心，而R42则进入活性中心并占据了之前R72所在的位置，最终使得R42的亲核基团和NAD+的亲电基团之间的平均距离缩短至4.46埃。 br/ /p p 　　文章的最后部分还对SdeA的C端结构域的功能进行了研究，通过体外pull down和凝胶过滤层析实验，冯越研究组证明了SdeA的C端结构域结合IcmS-IcmW蛋白复合物，并且其1191-1350区域可与IcmS-IcmW及DotL的C端形成四元复合物。这表明 span style=" color: rgb(255, 0, 0) " SdeA的C端结构域可能在SdeA转移到宿主细胞的过程中发挥功能 /span 。 br/ /p p 　　 strong SdeA是目前为止世界上首个鉴定出的新型泛素连接酶，其与泛素复合物结构的解析揭示了一种全新的泛素化结构机理 /strong 。由于哺乳动物也含有类似结构，同时其他细菌可能也具有类似的、尚未发现的泛素化系统，所以在未来，该研究将帮助鉴定出其它新型泛素化系统，从而丰富我们对细胞生命过程的认知 同时，嗜肺军团菌是军团菌肺炎这一潜在致死性肺炎的致病微生物，SdeA的结构解析也为设计针对该家族蛋白的小分子抑制剂，作为治疗军团菌肺炎的潜在抗生素奠定了重要基础。 br/ /p p 　　据悉，北京化工大学硕士研究生 strong 董亚南 /strong 、 strong 穆雅娟 /strong 、 strong 解永超 /strong 及清华大学博士研究生 strong 张玉鹏 /strong 依次为本论文的共同第一作者， strong 冯越 /strong 教授为本文的通讯作者， strong 北京软物质科学与工程高精尖创新中心 /strong 及 strong 北京化工大学 /strong 为第一完成单位。 /p p style=" text-align: center " img title=" 3.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201805/insimg/bd22f066-6d36-42e6-8e93-c7244d62eb5c.jpg" / 　 /p p style=" text-align: center " 冯越教授课题组合影 /p p 　　 span style=" color: rgb(0, 176, 80) " BioArt后记：冯越研究组的这篇文章是与Ivan Dikic研究组和美国康奈尔大学的Yuxin Mao研究组一起以back-to-back的形式共同向Nature投稿的( span style=" color: rgb(127, 127, 127) " 2017年9月24日投稿，2018年3月28日接收 /span )。在这三篇文章中，冯越研究组以mART结构域为主要研究对象，而另外两个研究组的重点则是PDE结构域。在三篇文章投到Nature四个多月后，中科院生物物理所高璞组将SidE家族的另一蛋白SidE的结构功能研究投稿到Cell杂志，该文章也于日前发表( span style=" color: rgb(79, 129, 189) " Cell丨高璞组揭示新型泛素化修饰的作用机制——胡荣贵、王丰点评 /span )。值得一提的是，在这四篇文章中，冯越研究组报道的结构所包含的SidE家族蛋白的长度是最长的，同时该文章也是四篇文章中最早接收的。 /span /p p style=" text-align: center " & nbsp img title=" 4.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201805/insimg/7f148278-a4e4-4914-a656-49f2a40ebdae.jpg" / /p p style=" text-align: center " Nature同期发表的Ivan Dikic研究组和Yuxin Mao研究组的研究论文 /p p span style=" color: rgb(192, 0, 0) " 冯越教授简介： /span /p p style=" text-align: center " 　　 img title=" 5.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201805/insimg/43fed980-f71b-488b-9b41-08880433a4b5.jpg" / /p p 　　冯越，1985年生，辽宁锦州人，教授、博士生导师。2013年7月博士毕业于清华大学结构生物学中心，经高层次人才引进进入北京化工大学生命科学与技术学院工作，主要以蛋白质结构生物学为手段，对多酶生物分子机器及重大疾病相关蛋白质的结构与功能进行研究。共发表SCI论文23篇，其中第一作者或通讯作者论文11篇，分别发表在Nature (两篇，第一作者和通讯作者各一篇)、Nature Plants (通讯作者)、PNAS (共同第一作者)等国际著名期刊上。作为项目负责人主持国家及省部级项目3项，其中国家自然科学基金青年项目和面上项目各一项，北京市自然科学基金项目一项。 /p p span style=" color: rgb(192, 0, 0) " 参考文献 /span /p p 1. Hershko, A., A. Ciechanover, and A. Varshavsky, Basic Medical Research Award. The ubiquitin system.Nat Med, 2000. 6(10): p. 1073-81. /p p 2. Komander, D. and M. Rape, The ubiquitin code. Annu Rev Biochem, 2012. 81: p. 203-29. /p p 3. Qiu, J., et al., Ubiquitination independent of E1 and E2 enzymes by bacterial effectors. Nature, 2016.533(7601): p. 120-4. /p p 4. Bhogaraju, S., et al., Phosphoribosylation of Ubiquitin Promotes Serine Ubiquitination and Impairs Conventional Ubiquitination. Cell, 2016. 167(6): p. 1636-1649 e13. /p p 5、Qiu, J., Yu, K., Fei, X., Liu, Y., Nakayasu, E. S., Piehowski, P. D., ... & amp Luo, Z. Q. (2017). A unique deubiquitinase that deconjugates phosphoribosyl-linked protein ubiquitination. Cell research, 27(7), 865. /p
    时间： 2018-05-24
    作者： 段寒冰
  • ALPHA前沿案例 | 玩转泛素化筛选
    泛素化过程对于细胞稳态调控的重要性不言而喻。除了参与UPS（泛素-蛋白酶体系统，ubiquitin-proteasome system）介导的蛋白降解外，泛素化还是重要的信号通路和亚细胞定位调控手段。随着PROTAC药物的兴起，泛素化系统也受到了进一步的重视，成为了新兴的药物研发方向。在本期的前沿案例中，研究人员关注重要的细胞周期和DNA修复调控蛋白PCNA(增殖细胞核抗原)，及其K164单泛素化修饰。该修饰过程是DNA损伤耐受通路激活的关键步骤，也是潜在的抗肿瘤靶点。利用强大、灵活，并可支持定量的ALPHA蛋白互作技术，研究针对PCNA单泛素化过程中的各个环节均建立了高通量筛选和分析体系。以此为基础，研究进一步开展小分子药物筛选，并成功获得一系列具有靶向活性的氧杂蒽酮化合物。这些药物不仅为研究PCNA单泛素化功能供了新的工具，也为该方向的抗肿瘤药物研发打下基础。作为核心的PPI筛选和分析平台，ALPHA技术主要参与了该研究以下工作:一、建立靶向PCNA单泛素化各个环节的筛选和分析体系与常见的泛素化过程一致，PCNA 单泛素化也需要E1（Uba1，泛素活化酶），E2（Rad6，泛素携带蛋白）和E3（Rad18，泛素蛋白连接酶）发挥作用。利用一系列反应中出现的相互作用，研究基于APLHA技术构建了Uba1-ubiquitin相互作用；Rad6-ubiquitin相互作用；Rad18自泛素化和最终的PCNA泛素化检测和分析平台（见上图）。并在此基础上，研究进一步建立Rad6和Rad18以及Rad6和Ubr1互作分析方法，用于协助评价候选小分子。上述方法全面覆盖了泛素化过程中的各个反应，也展现ALPHA技术用于PPI分析的高度灵活性。二、靶向PCNA单泛素化的小分子抑制剂筛选在之前PCNA单泛素化检测的基础上，研究继续从蛋白浓度、稀释倍数和Beads浓度等多个方面优化ALPHA体系，并开展高通量小分子药物筛选。研究发现一系列的氧杂蒽酮化合物，如NSC 9037能有效抑制PCNA的泛素化，而类似结构的荧光素和阴性化合物则不能。上述发现与经典的Western blot或 Gel-based法的检测结果有较好的一致性，也间接反应了ALPHA技术抗荧光干扰的优势（见上图）。三、候选小分子活性评价针对泛素化的主要环节，研究继续利用ALPHA技术分析一系列候选药物的特异性和可能的工作机制。通过对比Uba1-ubiquitin相互作用(上图左，该检测中NSC 9037为阴性化合物)；Rad6-ubiquitin相互作用(上图中)和Rad18自泛素化(上图右)检测的结果，研究证明NSC 9037能特异抑制Rad6和ubiquitin的相互作用，以及下游的Rad18自泛素化。基于ALPHA平台，研究继续构建和优化Rad6和Rad18（上图左）/Ubr1（上图中）相互作用检测平台，证明NSC 9037能特异阻断Rad6和Rad18的相互作用，是首个报道的Rad6-Rad18互作抑制剂。最后，在肿瘤细胞模型上，NSC 9037和其他筛选获得的PCNA泛素化抑制剂，均表现出不同程度的细胞毒性(上图右)，为肿瘤药物研发提供了新的潜在方向。在PCNA泛素化抑制剂筛选和解析的过程中，ALPHA技术因其强大的灵活性发挥了重要的推动作用。相较于传统技术路线，ALPHA具有高灵敏度、优越的动态范围和能灵活支持不同亲和力范围和距离下的互作检测，是蛋白互作筛选和分析的利器。靶向蛋白互作的抑制剂筛选，除了ALPHA平台外，我们还提供同样均相的HTRF技术和非均相DELFIA技术平台，和相应的涵盖试剂、微孔板、检测平台和自动化的全线解决方案，满足不同的蛋白蛋白/蛋白小分子互作检测需求。
    时间： 2022-06-20
    作者： PerkinElmer
  • 我国科学家揭示去泛素化酶OTUD1抑制肠炎发生新机制
    中国科学院微生物研究所刘翠华团队长期致力于病原感染与宿主免疫调控方面的研究，在病原感染免疫以及蛋白泛素化等翻译后修饰调控机制等方面取得了一系列成果，先后在Nature Immunology、Molecular Cell、Nature Communications、Autophagy、Proc Natl Acad Sci、Cellular & Molecular Immunology、EMBO reports等杂志发表系列研究工作，为结核病（TB）等疾病防治提供了多种新思路和潜在新靶点。　　炎症性肠病（IBD）是一类因免疫反应失调所致的反复发作的慢性肠道炎症性疾病，包括溃疡性结肠炎（UC）和克罗恩病（CD），多发于结肠和回肠末端。近几十年来，中国乃至全球的IBD发病率呈明显上升趋势，且目前临床上尚未找到有效根治IBD的治疗方案。肠道免疫系统能通过多种细胞和分子机制维持肠道免疫稳态，其紊乱可能导致多种炎症和免疫性疾病乃至肿瘤的发生。深入探寻肠道免疫微环境稳态的调控机制将为IBD等肠道免疫性疾病的防治提供新的分子标识。OTUD1 作为一种重要的去泛素化酶可调控自身免疫性疾病、病毒和真菌感染以及肠癌发生，但其在肠道炎症性疾病中的作用及调控机制尚不清楚。　　近期，刘翠华团队与军事科学院军事医学研究院张令强研究员团队的最新合作研究揭示：去泛素化酶OTUD1能与RIPK1结合并通过去除其627位赖氨酸的K63多聚泛素化修饰，阻碍RIPK1对下游信号分子NEMO的招募及NF-κB信号通路的激活，进而抑制肠道免疫细胞中促炎细胞因子（包括TNF-α、IL-6和IL-1β等）的产生及肠炎发生（图1）。该研究发现葡聚糖硫酸钠（DSS）处理可诱导小鼠结肠组织中OTUD1的表达升高。通过在Otud1敲除小鼠中构建DSS结肠炎模型，发现Otud1敲除促进了小鼠肠道组织中促炎细胞因子的产生和肠炎发生。　　同时，小鼠骨髓移植实验也证明了髓系细胞表达的OTUD1对肠炎的抑制作用是必不可少的。进一步的机制探寻发现LPS能诱导OTUD1启动子区域的低甲基化从而促进OTUD1的高表达。之后OTUD1与RIPK1相互作用并通过去除RIPK1的627位赖氨酸的K63多聚泛素链，从而抑制其对NEMO的招募以及NF-κB信号通路的激活。该研究还发现相比于健康人群，UC患者肠道粘膜中OTUD1的表达更低，并且与UC相关的OTUD1 G403V突变体丧失了抑制RIPK1介导的NF-κB信号激活和肠炎发生的能力。　　综上，该研究揭示了去泛素化酶OTUD1通过去除RIPK1的K63多聚泛素链而抑制肠道免疫细胞中NF-κB通路介导的促炎细胞因子的产生进而抑制肠炎发生的分子机制，表明以OTUD1-RIPK1信号轴为靶点的免疫干预可能是治疗IBD的有效途径，该研究为肠道炎症性疾病的防治提供了潜在的干预新靶点。图1：去泛素化酶OTUD1抑制肠炎发生的机制示意图　　相关结果已在线发表于Cellular & Molecular Immunology，题为“The deubiquitinase OTUD1 inhibits colonicinflammation through suppressing RIPK1-mediated NF-κB signaling”。军事科学院军事医学研究院的吴波博士，中科院微生物研究所的博士研究生强丽华，清华大学-军事科学院联合培养博士研究生、中科院微生物研究所的客座研究生张勇以及军事科学院军事医学研究院的付业胜博士为本文共同第一作者，中科院微生物研究所的刘翠华研究员和军事科学院军事医学研究院、国家蛋白质科学中心（北京）的张令强研究员为本文共同通讯作者。苏州大学生物医学研究院的郑慧教授为本研究提供了Otud1敲除小鼠。该研究受到了国家生物安全特别项目、国家自然科学基金、中科院战略先导科技专项和蛋白质组学国家重点实验室等联合资助。　　文章链接：https://www.nature.com/articles/s41423-021-00810-9
    时间： 2021-12-10
    作者： dahua1981
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  • 蛋白质泛素化：基本概念、蛋白大小与泛素化蛋白组学的应用

    [font=宋体][font=宋体]泛素化是一种细胞内的蛋白质标记系统，蛋白质泛素化是指将小的蛋白质泛素共价地连接到其他蛋白质分子上的过程。泛素（[/font][font=Calibri]ubiquitin[/font][font=宋体]）是一种高度保守的蛋白质，其结构由[/font][font=Calibri]76[/font][font=宋体]个氨基酸残基组成。泛素连接到目标蛋白质上的过程，经历了泛素激活、泛素转移和靶蛋白接受三个主要步骤。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质泛素化具有多种特点，例如它是高度选择性的，不同蛋白质泛素化的位置和数量可以影响其功能；它是可逆的，通过去泛素化反应可以调控蛋白质的泛素化状态；它还是动态调控的，受到多种因素的调控，如细胞信号通路和环境刺激。[/font][b][font=宋体]泛素化蛋白大小：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白泛素化是指将小蛋白颗粒泛素（[/font][font=Calibri]Ubiquitin[/font][font=宋体]）与其他蛋白质共价结合的修饰过程。 泛素化修饰通常会导致泛素共价连接在蛋白质的赖氨酸残基上形成多重泛素链。 这种蛋白质泛素化增加了蛋白质的分子量，因为每个泛素分子的质量大约为[/font][b][font=Calibri]8.5[/font][font=宋体]千达尔顿（[/font][font=Calibri]kDa[/font][/b][font=宋体][b]）[/b]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]泛素化蛋白质组学在许多领域有重要的应用，主要包括：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①疾病机制研究：泛素化是一种广泛存在于细胞中的蛋白质修饰方式，参与了细胞的生长、分化、修复和调控等多个生命活动。泛素化蛋白质组学的研究可以帮助我们了解泛素化修饰的生物学功能和调控机制，为疾病发生机制和治疗策略的研究提供重要线索。例如，在癌症、代谢综合征、神经退行性疾病等疾病中，则会出现异常泛素化。[/font][font=宋体]②药物研发：通过分析药物对泛素化蛋白质的影响，可以评估药物的效力和选择性，为药物研发提供指导。[/font][font=宋体]③临床诊断：泛素化蛋白质组学鉴定与定量分析技术可以揭示细胞调控的机制，通过分析泛素化蛋白质的组学数据，可以确定泛素化修饰在细胞信号转导、蛋白质降解和细胞周期调控等过程中的重要作用。此外，通过比较病态和正常样品中泛素化蛋白质的差异，可以鉴定与疾病发生发展相关的泛素化修饰靶点，并进一步理解疾病的分子机制。因此，这些技术也可用于临床诊断。[/font][font=宋体]④蛋白质降解调控：在癌症、神经退行性疾病和免疫相关疾病等病症中，蛋白质降解调控出现异常。而泛素化蛋白组在调控蛋白质降解中发挥重要作用。通过与泛素连接，目标蛋白质被送入蛋白酶体或蛋白酶体样体中进行降解。这个过程是细胞清除异常、老化或受损蛋白质的重要途径。[/font][font=宋体]⑤高通量技术应用：高通量泛素化蛋白质组学鉴定与定量分析技术的发展包括质谱鉴定和抗体鉴定两种方法。质谱鉴定技术利用质谱仪的高灵敏度和分辨率，能够鉴定泛素化修饰的蛋白质及其泛素化位点。抗体鉴定技术则通过特异性抗体的使用，可以富集和鉴定泛素化修饰的蛋白质。这些技术为全面了解泛素化在细胞中的作用机制和调控网络提供了可能。[/font][font=宋体]总的来说，泛素化蛋白质组学在多个领域都有重要的应用价值，推动了我们对生命过程的深入理解以及疾病治疗的创新发展。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]更多详情关于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]蛋白资源[/b][/url]详情可以参看：[/font][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][u][font=宋体][color=#0000ff][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review[/font][/color][/font][/u][/url][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 藤黄酸靶向USP2诱导KRAS泛素化降解治疗多发性骨髓瘤

    [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]GA[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]诱导[/color][/font][font=&][color=#0070c0]KRAS[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]降解[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][size=15px][font=宋体]作者首先通过筛选了一个自制的化合物库，用含有[/font][font=&] KRAS[sup]G12A[/sup][/font][font=宋体]突变的[/font][font=&]MM[/font][font=宋体]细胞系[/font][font=&]MM.1S[/font][font=宋体]和[/font][font=&]RPMI 8226[/font][font=宋体]鉴定可以降低[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]水平的化合物，发现藤黄酸（[/font][font=&]Gambogic acid[/font][font=宋体]，[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]，）处理可降低两种细胞系中[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的水平，而其他化合物没有表现出相似或较弱的效果。进一步实验表明，[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]可以以浓度和时间依赖性方式降低两种细胞系中[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的水平，以及[/font][font=&] KRAS[/font][font=宋体]的下游[/font][font=&]p-ERK[/font][font=宋体]（[/font][font=&]MAPK[/font][font=宋体]通路）和[/font][font=&]p-AKT[/font][font=宋体]（[/font][font=&]PI3K[/font][font=宋体]通路）。此外，[/font][font=&]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]显示[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]不会改变[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的转录水平，表明[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]可能在转录后水平降低[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]。[/font][font=&][/font][/size][size=15px][font=宋体]进一步使用蛋白酶体抑制剂[/font][font=&]MG132[/font][font=宋体]发现[/font][font=&]MG132 [/font][font=宋体]部分挽救了[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]诱导的[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]蛋白下调，表明[/font][font=&] KRAS [/font][font=宋体]蛋白降解与泛素[/font][font=&]-[/font][font=宋体]蛋白酶体途径有关，此外，我们采用放线菌酮（[/font][font=&]CHX[/font][font=宋体]）测定评估显示[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]处理后，[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的半衰期显著缩短。这些数据表明[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]可以诱导[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的蛋白酶体降解，进而损害[/font][font=&]MM[/font][font=宋体]细胞中的下游信号转导[/font][font=宋体] [size=15px][b]2、鉴定USP2作为GA的新靶标[/b][/size][size=15px]为了确定GA诱导KRAS降解的靶标，作者合成了生物素标记的GA，发现它保留了在MM细胞中诱导KRAS降解的能力，进一步利用该探针开展Pulldown+MS，鉴定到的互作蛋白中，HSP90和USP2这两种与蛋白质降解相关。HSP90是一个已知的GA靶点，作为伴侣蛋白，它可以调节各种蛋白的稳定性，然而HSP90抑制剂STA9090处理不能降低MM.1S细胞中KRAS的蛋白水平，表明KRAS不是 HSP90的底物。因此，作者更加关注USP2，一种新型的GA互作蛋白。通过Pulldown+WB、免疫荧光共定位、竞争实验、CETSA、DARTS实验共同证实了USP2是GA的直接相互作用蛋白。此外，GA在体外相对特异性地抑制USP2的去泛素化活性（ [/size][size=15px][b]3、半胱氨酸284对于GA与USP2的共价结合至关重要[/b][/size][size=15px]然后，作者研究了GA和USP2之间的相互作用模式，发现碘乙酸（IAA，一种半胱氨酸烷化剂）与USP2的预孵育完全抑制了GA与USP2的结合，表明GA可能与USP2的半胱氨酸共价结合，这与之前的报道一致，即GA可以通过半胱氨酸残基与其靶标共价结合。接着，通过USP2蛋白与GA一起孵育后质谱鉴定，发现Cys284残基被GA共价修饰。此外，通过构建USP2的两个突变体（C276S、C284S），发现GA 与 USP2（C276S）结合，而不是USP2（C284S），表明GA可以与USP2的Cys284残基特异性形成共价键。结合动力学显示GA 以剂量和时间依赖性方式与 USP2 共价结合，分子对接显示P565和 R289对于形成GA与USP2结合的口袋至关重要。同样通过蛋白点突变实验发现P565 和 R289对GA-USP2相互作用至关重要 [/size][size=15px][b]4、USP2调节KRAS的稳定性[/b][/size][size=15px]前面发现GA降低MM细胞中KRAS蛋白水平并抑制USP2活性，表明USP2可能调节KRAS的稳定性。作者利用CRISPR/Cas9敲除MM.1S和RPMI 8226细胞系中的USP2，发现敲除USP2导致KRAS蛋白水平降低，mRNA水平不变， KRAS的下游效应子p-ERK水平也显著降低。此外，敲除诱导的KRAS下调可被两种细胞系中的蛋白酶体抑制剂MG132挽救。结果表明USP2可以增强KRAS的蛋白质稳定性。进一步研究发现USP2与KRAS互作并使KRAS去泛素化，表明KRAS是USP2的底物 [/size][size=15px][b]5、USP2敲除抑制MM细胞的增殖[/b][/size][size=15px]鉴于KRAS在MM细胞增殖和存活中的关键作用，作者假设USP2敲除可能会使KRAS不稳定，从而导致MM细胞增殖抑制。结果显示USP2敲除显著抑制MM.1S和RPMI 8226细胞系的增殖，诱导这两种MM细胞系凋亡。此外，MM.1S 细胞的异种移植 MM 模型发现，USP2敲除显著抑制肿瘤生长，免疫组化染色也显示USP2敲除组的KRAS水平降低，这些数据共同表明USP2在MM细胞的增殖和存活中起着关键作用 [/size][size=15px][b]6、GA通过靶向USP2和破坏KRAS的稳定性来诱导MM细胞凋亡[/b][/size][size=15px]据报道，GA通过抑制PI3K/Akt/mTOR、[i]NF-κ[/i]B 和其他信号通路诱导MM细胞凋亡。作者发现GA处理可以以剂量依赖性方式降低MM.1S和RPMI 8226细胞的活力并促进细胞凋亡。此外，过表达USP2的细胞对GA诱导的活力降低和KRAS降解表现出部分抗性，且GA处理可以提高 KRAS的泛素化水平。KRAS[sup]G12C[/sup]的过表达可以部分消除USP2敲除诱导的细胞生长抑制。这些数据表明，GA在 MM 细胞中诱导的细胞毒性至少部分归因于其靶向USP2，这降低了KRAS的稳定性。[/size][size=15px]最后，作者探讨了USP2在MM中的临床意义。通过GSE13591数据集发现MM患者骨髓样本中的USP2 mRNA水平明显更高。此外，作者发现原发性骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞系中USP2的蛋白水平高于正常外周血单核细胞（PBMC）和正常骨髓活检，且高USP2水平的MM患者的总生存期降低，这些结果共同表明USP2表达增加与MM中较差的结局之间存在很强的相关性，表明USP2可能是MM治疗的有前途的靶点。[/size][/font][font=&][/font][/size]

  • 冬凌草乙素靶向Keap1介导PGAM5泛素化促进肝癌细胞线粒体凋亡

    [size=15px][font=宋体][color=black]冬凌草乙素[i][/i]（[/color][/font][font=&][color=black]Ponicidin[/color][/font][font=宋体][color=black]）是从中药冬凌草（[/color][/font][i][font=&][color=black]Rabdosia rubescens[/color][/font][/i][font=宋体][color=black]）中提取的二萜类化合物，具有免疫调节、抗炎、抗病毒和抗癌等多种活性。尽管冬凌草乙素对多种恶性肿瘤有疗效，但其与肝细胞癌（[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]）相关的确切功能和作用机制仍然未知。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]冬凌草乙素体外显著抑制肝癌细胞增殖和迁移，体内抑制肿瘤生长并促进肿瘤细胞凋亡。[/color][/font][font=宋体][color=red]机制上，冬凌草乙素靶向[/color][/font][font=&][color=red]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=red]（[/color][/font][font=&][color=red]E3[/color][/font][font=宋体][color=red]泛素连接酶）并促进[/color][/font][font=&][color=red]Keap1-PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=red]复合物形成，介导[/color][/font][font=&][color=red]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=red]的泛素化降解。此外，冬凌草乙素通过[/color][/font][font=&][color=red]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=red]激活半胱氨酸依赖性线粒体通路，导致线粒体损伤和[/color][/font][font=&][color=red]ROS[/color][/font][font=宋体][color=red]产生，从而促进肝癌细胞线粒体凋亡。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、冬凌草乙素抑制[/color][/font][font=&][color=#0070c0]HCC[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]细胞的增殖和迁移[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [align=center] [/align] [size=15px][font=宋体][color=black]作者首先通过体外实验发现能以剂量依赖性方式有效抑制[/color][/font][font=&][color=black]HepG2[/color][/font][font=宋体][color=black]细胞[i][/i]的增殖和迁移。为了确定冬凌草乙素的靶标，作者合成生物素标记的冬凌草乙素（[/color][/font][font=&][color=black]Bio-Ponicidin[/color][/font][/size][font=宋体]）开展[/font][font=宋体]Pulldown[/font][font=宋体]实验，通过质谱鉴定[/font][font=宋体]Keap1[/font][font=宋体]蛋白（[/font][font=宋体]Kelch-like ECH-associated protein 1[/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]Keap1[/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]E3[/font][font=宋体]泛素连接酶的底物识别亚单位）为冬凌草乙素的可能靶标。[/font] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]在[/color][/font][font=&][color=#0070c0]HCC[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]组织样本中上调[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]接着，作者利用[/color][/font][font=&][color=black]TCGA[/color][/font][font=宋体][color=black]数据库发现[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]高表达与[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]患者较低的生存率有关，并利用[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]组织芯片发现肝癌组织中[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]的表达高于癌旁组织，结果表明[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]在[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]发病机制中具有潜在作用。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白是一种重要的调节蛋白，可以通过与其他蛋白质相互作用来调节细胞内信号通路，于是作者通过文献检索发现[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]是一种与[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]互作的重要蛋白质，且前面的[/color][/font][font=&][color=black]Pulldown[/color][/font][font=宋体][color=black]实验也显示[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]被拉下。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=&][color=black]TCGA[/color][/font][font=宋体][color=black]数据库分析显示[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]高表达与[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]存活率较低相关，组织芯片显示[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]组织中的[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]表达高于癌旁组织，且与较高的病理分级相关，结果表明[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]同样在[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]发病机制中具有潜在作用。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]进一步作者通过人类蛋白质组微阵列[i][/i]检测冬凌草乙素的直接靶蛋白，发现冬凌草乙素与[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]直接结合而不与[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白结合，结果表明冬凌草乙素可能直接与[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]结合并影响[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]，从而在[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]中发挥药理作用。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]3[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]和[/color][/font][font=&][color=#0070c0]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]相互作用的结构基础[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]可以与[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]结合，然而，它们结合的结构基础尚不清楚。为了观察[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]结合过程的动态变化，作者通过分子动力学模拟发现[/color][/font][font=&][color=black]Keap1-PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]复合物的结构总体上保持稳定，且[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]上的[/color][/font][font=&][color=black]Val78[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]Glu79[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]Ser80[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]Glu83[/color][/font][font=宋体][color=black]氨基酸与[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]的[/color][/font][font=&][color=black]Kelch[/color][/font][font=宋体][color=black]结构域相互作用。采用[/color][/font][font=&][color=black]AlphaFold3[/color][/font][font=宋体][color=black]算法来预测[/color][/font][font=&][color=black] Keap1-PGAM5 [/color][/font][font=宋体][color=black]的相互作用，发现复合物的总体预测折叠与真实结构相似。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]4[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]Keap1-PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]配合物中晶体整体结构及相互作用的洞察分析[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]为了更好地理解[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]相互作用的分子机制，作者进行了结构生物学实验。通过晶体学实验获得了[/color][/font][font=&][color=black]Keap1-PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]配合物的结构，分析得到两者的结合模式和结合位点，并通过蛋白点突变后的[/color][/font][font=&][color=black]ITC[/color][/font][font=宋体][color=black]实验发现[/color][/font][font=&][color=black]Glu79[/color][/font][font=宋体][color=black]是[/color][/font][font=&][color=black]Kelch[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]结合的关键残基。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]进一步作者通过[/color][/font][font=&][color=black]SPR[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]CETSA[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]Co-IP[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]EMSA[i][/i][/color][/font][font=宋体][color=black]等实验验证冬凌草乙素和[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]的[/color][/font][font=&][color=black]Kelch[/color][/font][font=宋体][color=black]结构域结合，而不能和[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]的[/color][/font][font=&][color=black]?54-PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]（[/color][/font][font=&][color=black]54-289[/color][/font][font=宋体][color=black]号氨基酸）突变蛋白结合。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]考虑到[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]是一种[/color][/font][font=&][color=black]E3[/color][/font][font=宋体][color=black]连接酶，促进蛋白质的泛素化和降解。作者发现冬凌草乙素可以增加[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]的泛素化，增加[/color][/font][font=&][color=black]Keap1-PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白共定位，表明冬凌草乙素可以与[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]结合，从而促进[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]的互作，促进[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]的泛素化。 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]冬凌草乙素影响[/color][/font][font=&][color=#0070c0]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]的[/color][/font][font=&][color=#0070c0]Kelch[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]结构域的变构来稳定[/color][/font][font=&][color=#0070c0]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]与[/color][/font][font=&][color=#0070c0]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]结合[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]进一步通过分子对接模拟发现冬凌草乙素可以与[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font]

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    价格： 1800元
  • Monolith新一代生物分子互作检测仪 - 诺坦普 (NanoTemper) 400-860-5168转3541
    诺坦普 (NanoTemper) 新一代 Monolith 系列分子互作分析仪MO 系列分子互作仪，采用创新性的光谱位移技术 (Spectral Shift) 和 经典的微量热泳动技术 (MicroScale Thermophoresis, MST)，轻松检测具有挑战性的分子互作。仅需极微量的样品 , 即可在液体环境中快速、精确地定量检测各种类型的分子间相互作用力，且检测浓度范围广、操作简单。1. 技术优势功能全面，灵活应对不同类型的亲和力检测项目（1）实现几乎所有类型分子间的亲和力检测：从IDPs、膜蛋白、大型蛋白复合体到PROTACs、小分子甚至离子，检测各种类型的分子间结合。（2）不依赖于分子量和粒径变化检测：结合检测不受由配体结合引起的粒径和分子量变化限制。（3）样品消耗量极低：为 ITC 实验准备大量的、高浓度的互作样品是非常困难的。Monolith 系列仅需几微升的样品浓度即可，为您节约宝贵的样品。（4）液体环境检测，更接近天然条件：在液体环境中直接检测，且适用于几乎所有的缓冲液，保证样品在天然条件下自由发生相互作用，获得更可靠的结果。（5）不仅限于取得Kd值数据：研究人员还可计算结合的化学计量比*和热力学参数*，并通过竞争结合实验进行相对亲和力 和协同性评估*。 * 需进行线下数据处理及分析，无法在MO系列仪器配套软件中完成。（6）不局限于两种分子间的互作分析：竞争结合实验、多种分子结合检测都可以轻松搞定。高品质的毛细管则保证了高品质的数据，使用毛细管的优势众多：仅需微量样品，在溶液中检测， 接近天然环境，无需固定样品，甚至无需进行蛋白纯化。2. 技术原理Monolith 可搭载光谱位移和 MST 两种生物物理检测方法，用于结合亲和力的检测。 在实验中，我们对其中一个分子进行荧光标记*，然后将其与一系列梯度稀释的结合分子等量混匀，接下来使用毛细管吸取样品并放入仪器开始检测。 *此外，色氨酸内源荧光也可用于免标记 MST 检测。（1）光谱位移技术（Spectral Shift ）光谱位移技术通过荧光发射光谱的蓝移或红移来检测分子间的结合。Monolith X 在等温条件下精确检测 650nm 和 670nm 双波长的发射光，因而能够精确检测到极细微的光谱位移。接下来，以配体浓度为横坐标，双波长荧光强度的比值为纵坐标作图，拟合得到平衡解离常数 Kd。（2）微量热泳动技术（MicroScale Thermophoresis）微量热泳动（MicroScale Thermophoresis，MST） 是一种定量分析生物分子间相互作用的前沿技术。通过精确检测荧光变化，结合灵敏的热泳动现象，MST 提供了一种灵活、强大和快速测量分子间相互作用的 方法。MST 技术是通过激光在溶液中产生精确而短暂的温度变化从而检测配体结合引起的荧光强度变化。以配体浓度为横坐标，荧光值为纵坐标作图，从而获得平衡解离常数 Kd。MO 系列仪器测量一个 Kd 值仅需 10 分钟，专家模式下最快仅需 90 秒，而无需额外冗长的数据分析。通过检测与配体结合后，荧光标记的蛋白或者具有自发荧光的样品的荧光强度在温度梯度中随时间而变化 (上左图中灰色部分)，然后将选定时间段内的荧光强度对应配体浓度进行拟合作图，软件自动计算得到该结合的亲和常数 Kd 值 (上右图)。3. 仪器软件智能软件自动进行数据分析，使您对实验结果更加自信。对于大多数的软件，当您加载样品之后才会启动。但是 MO 软件别具一格——它不但可以在实验启动之前 为您提供每一步骤的详细指导，助您快速设置实验；而且实验结束时，会立即根据所得数据提供实验优化 建议，全程为您提供可靠信息。MO. Control 2 软件增加而了缓冲液条件优化功能，提高效率，帮助您快速获得结果。4. 应用范围Monolith 系列分子互作仪可以检测几乎所有类型的分子互作，包括蛋白，小分子，多肽，核酸， 脂类等，应用范围非常广泛。（1）蛋白——小分子 &bull 自噬—溶酶体靶向降解 &bull 基于结构的药物设计 &bull “靶向降解组学”鉴定中药成分靶点 &bull 中药小分子抑制剂作用机制 &bull 靶向雄激素受体液 - 液相分离的药物开发 &bull 新型泛素化反应的分子机制（2）蛋白——离子 &bull 植物硝态氮新受体 &bull 植物免疫抑制与广谱抗病机理 &bull 铜元素调节水稻广谱抗病毒的机制 &bull 低温特异钙信号的感知和应答机制（3）蛋白——多肽 &bull 植物防止多精受精的分子机制 &bull 小肽—受体激酶调控花粉与柱头识别的分子机理 &bull 植物重要肽激素作用机理 &bull 多肽 PROTAC 降解致癌蛋白（4）蛋白——蛋白 &bull 淬灭抑制蛋白 SOQ1 调节 qH 的作用机制 &bull 胃癌基因治疗新靶点 CPEB3 作用机制研究 &bull 精子与卵子受精识别的结构基础 &bull 抗原表位研究（5）蛋白——核酸 &bull CRISPR-Cpf1 识别剪切 RNA 的分子机制 &bull 核酸适配体检测霉菌毒素（6）蛋白——脂类 &bull 新冠病毒 S 蛋白结合胆固醇 &bull 调控蛋白与磷脂酰肌醇二磷酸识别机制（7）蛋白——复合物 &bull 蛋白酶体与去泛素化酶动态调控机制（8）蛋白——纳米颗粒 &bull 靶向乳酸代谢的工程仿生纳米颗粒治疗胶质瘤 &bull 多肽修饰的纳米颗粒抑制病毒侵染 &bull 核酸适配体修饰的纳米颗粒探针（9）蛋白——糖类 &bull 流感病毒结构改变介导病毒在人类传播的机制（10）免纯化 / 无标记检测 &bull 老药新用，Wnt/β-catenin 信号通路活性抑制 &bull 血清中多克隆抗体 - 海洛因结合检测 &bull 葡萄糖转运蛋白抑制剂—— 技术参数 ——
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    厂商： 上海昊扩科学器材有限公司
    品牌： 诺坦普/NanoTemper
    型号： Monolith
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