溶液颜色检查法

p 　　为了减少大家在注射剂评价中对药品溶液颜色方面的困惑，改变大家对药典通则色差计检查法知之甚少的现状，加强药检仪器生产企业与药企和科研机构的联系，建立多方交流合作平台，2018年9月15日，北京医恒健康科技有限公司与专门研发生产药检仪器的天津市天大天发科技有限公司在北e咖啡屋联合举办了“溶液颜色检查法在注射剂再评价中的应用”业务交流沙龙活动。此次活动在北京医恒健康科技有限公司的子公司北e咖啡屋举行。医恒公司总经理余立老师主持了此次沙龙活动。本次沙龙的内容主要涉及国内外药品溶液颜色检查方法的差异，各方法的优缺点及色差计在药品溶液颜色检查中的角色定位，溶液颜色测定仪(色差计)的测定原理、主要特点以及仪器的使用和维护等。 /p p 　　 img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/5533fb8e-94ae-4d19-948e-7dba2198dd4a.jpg" title=" 1.jpg" alt=" 1.jpg" style=" text-align: center " / /p p 　　沙龙在上午9:00准时开始。北京医恒健康科技有限公司总经理余立首先开场。她是国家药典委员，《中国药典》通则溶液颜色检查法主要起草者之一，她在题为“溶液颜色检查法之方方面面”的报告中主要介绍了药品溶液颜色检查的几种通用方法，中美欧溶液颜色检查方法的差异，特殊品种溶液颜色检查方法建立与标准制订，仿制药与原研药溶液颜色标准的评价与合理转换，《中国药典》通则与各论中涉及溶液颜色检查的变化趋势。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/c2a62288-9eb9-404a-9cc3-97eaf50e3eee.jpg" title=" 2.jpg" alt=" 2.jpg" / /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/b0d38ac5-da6f-44ac-829a-d2d78b4276b4.jpg" title=" 3.jpg" alt=" 3.jpg" / /p p 　　余立老师用生动幽默的语言向到场听众深入浅出地阐述了溶液颜色检查的方方面面，尤其讲到色差计在药品溶液颜色检查中的重要性及应用方法时，赢得现场听众的积极响应。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/0721399c-05f6-46ac-b0b0-ec277a69abbb.jpg" title=" 4.jpg" alt=" 4.jpg" / /p p 　　随后，天津市天大天发科技有限公司副总经理兼高级工程师赵海山向大家介绍了溶液颜色检测仪(色差计)的测量原理、主要特点以及使用和维护。 /p p 　　提到天大天发，大家最熟悉的莫过于他们公司的溶出仪了，搞药检分析的人很少不知道!现在天大天发又根据《中国药典》“色差计法”设计了一款测色软件，既可以显示颜色测量数据，又可以直观的标出供试品在三维颜色坐标中的位置。不仅操作简便，还具备数据计算、存储、实验报告、操作日志等功能。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/78ca8418-4edc-4314-88a9-187b99813a29.jpg" title=" 5.jpg" alt=" 5.jpg" / /p p 　　这款SY-1溶液颜色测定仪采用光谱测色原理，LED复合光源、双光路测色，可消除光源波动、温度对测量产生的影响，实现仪器测量的实时校准，提高仪器的准确度和稳定性。药典—沃特世联合开放实验室曾对该仪器进行多项性能考察，结果表明：仪器在测量范围、稳定性、准确度、灵敏度、台间差以及抗干扰性方面居国内领先地位，完全满足药典关于色差计测定法的使用要求。 /p p 　　由于该仪器性能的提高，使用多台仪器测定由“标物中心”制备的《中国药典》标准比色液(6个色调，各11个色号)的颜色，经分析计算，还可将测量数据内置于测色软件中，形成数据库。测色软件可以给出与供试品颜色最相近的标准比色液的色调及色号，由此可以摆脱了随行标准比色液的使用!这些性能与国内外同类产品相比，性能优于国内同类产品，达到国际同类仪器水平。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/bebd7a1c-3aba-40c7-8e4e-afd0ff869ae8.jpg" title=" 6.jpg" alt=" 6.jpg" / /p p 　　在报告结束后，北e沙龙特色现场互动环节气氛更加热烈，大家与余立老师就工作当中出现的和溶液颜色检查相关联的各种问题进行了深入的交流和沟通。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/ba7043fe-1113-473c-b5a4-52977fd8aebd.jpg" title=" 7.jpg" alt=" 7.jpg" / /p p 　　本次活动还安排了上机实验，天大天发公司带来了轻巧灵便的色差计(SY-1溶液颜色测定仪)和浊度计(CY-1澄清度测定仪)各2台供到场者自己上机操作，大家都十分积极踊跃，将自带的样品在现场工作人员的配合下逐一进行实验。并就出现的疑问就地现场解决，这种大型会议得不到的问题高效处理及解决体验赢得参会人员的一致好评。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/0fbc14cd-33ac-4dd8-8894-da435e3ffd48.jpg" title=" 8.jpg" alt=" 8.jpg" / /p p 　　参与此次活动的人员大多是药厂的实验人员，大家在周六带着业务上的需求和工作中的疑问而来，到场人员近40人，这种小型接地气的沙龙形式是北e咖啡学术活动的特色之一，为大家提供了近距离深入相互学习、交流经验、促进合作的机会。 /p p 　　北e咖啡是北医校友和创业者共同筹建的一个专业交流，资源信息共享的一个平台，秉承为校友和同行服务的宗旨，追求互惠互助互利的效果。相信这个平台平等融洽、互助互帮的氛围可以吸引越来越多的企业和校友前来参与、分享、互动。北e咖啡小屋欢迎您带着信息、技术、经验、项目甚至需求前来! /p p 　　大家如果对余立老师的这个题目和天大天发公司的色差计和浊度计有兴趣，不必为没有参加这次活动遗憾，你可以在10月18~19日南京第81届原料会(API China)的平行论坛《多角度深入探讨注射剂再评价中的关键影响因素》中听到余立老师再次讲这个题目，也在会场可以看到天大天发展台与这两台仪器哦!这次就千万不要再错过啦! /p

中/美/欧/日四大药典澄清度检查规范-中英双译中国药典20200902 澄清度检查法澄清度检查法系将药品溶液与规定的浊度标准液相比较，用以检查溶液的澄清度。除另有规定外，应采用第一法进行检测。品种项下规定的“澄清”，系指供试品溶液的澄清度与所用溶剂相同，或不超过0.5号浊度标准。“几乎澄清”，系指供试品溶液的浊度介于0.5号至1号浊度标准液的浊度之间。第一法（目视法）除另有规定外，按各品种项下规定的浓度要求，在室温条件下将用水稀释至一定浓度的供试品溶液与等量的浊度标准液分别置于配对的比浊用玻璃管（内径15-16 mm,平底，具塞，以无色、透明、中性硬质玻璃制成）中，在浊度标准液制备5 分钟后，在暗室内垂直置于伞棚灯下，照度为1000 lx，从水平方向观察、比较。除另有规定外外，供试品溶解后应立即检视。第一法无法准确判定两者的澄清度差异时，改用第二法进行测定，并以其测定结果进行判定。浊度标准存贮液的制备 称取于105℃干燥至恒重的硫酸肼1.00 g，置于100 ml量瓶中，加水适量使溶解，必要时可在40℃的水浴中温热溶解，并用水稀释至刻度，摇匀，放置4-6小时；取此溶液于等容量的10%乌洛托品溶液混合，摇匀，于25℃避光静置24小时，即得。该溶液置冷处避光保存，可在2个月内使用，用前摇匀。浊度标准原液的制备 取浊度标准贮备液15.0 ml，置1000 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，取适量，置1 cm吸收池中，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在550 nm的波长处测定，其吸光度在0.12-0.15范围内，该溶液应在48小时内使用，用前摇匀。浊度标准液制备 取浊度标准原液与水，按照下表配置，即得。浊度标准液应临用时制备，使用前充分摇匀。 第二法（浊度仪法）供试品的浊度可采用浊度仪测定。溶液中不同大小、不同特性的微粒物质包括有色物质均可使入射光产生散射，通过测定透射光或者散射光的强度，可以检查供试品的浊度。仪器测定模式通常有三种类型，透射光式、散射光式和透射光-散射光比较测量模式（比率浊度模式）。1.仪器的一般要求采用散射光式浊度仪时，光源峰值波长为860 nm；测量范围应包含0.01-100ntu。在0-10ntu范围内分辨率应为0.01ntu；在10-100ntu范围内分辨率应为0.1ntu.2.适用范围及检测原理本法采用散射光式浊度仪，适用于低、中浊度无色供试品溶液的浊度测定（浊度值为100ntu以下的供试品。）因为高浊度的供试品会造成多次散射现象，时散射光强度迅速下降，导致散射光强度不能正确反映供试品的浊度值。0.5-4号浊度标准液的浊度值范围约为0-40ntu。采用散射光式浊度仪测定时，入射光和测定的散射光呈90℃夹角，入射光强度和散射光强度关系式如下。i=k’t i0式中 i为散射光强度，单位为cd； i0 为入射光强度，单位为cd； k’为散射系数； t为供试品溶液的浊度值，单位为ntu（ntu是基于福尔马肼浊度标准液液测定的散射浊度单位，福尔马肼浊度标准液即为第一法中的浊度标准贮备液）。在入射光i0不变的情况下，散射光强度i与浊度值成正比。因此，可以将浊度测量转化为散射光强度的测量。3.系统的适用性试验仪器应定期（一般每月一次）对浊度标准液的线性和重复性进行考察，采用0.5号至4号浊度标准液进行浊度值测定，浊度标准液的测定解果（单位ntu）与浓度间应呈线性关系，线性方程的相关系数应不低于0.999；取0.5号至4号浊度标准液，重复测定5次，0.5号和1号浊度标准液测量浊度值的相对标准偏差应不大于5%，2-4号浊度标准液测量浊度值的相对标准偏差不大于2%。4.测定法按照仪器说明书要求并采用规定的浊度液进行仪器校正。溶液剂直接取样测定；原料药或者其它剂型按照个论项下的标准规定制备供试品溶液，临用时制备。分别取供试品溶液和相应浊度标准液进行测定，测定前应摇匀，并避免产生气泡，读取浊度值。供试品溶液浊度值不得大于相应浊度标准液的浊度值。 美国药典usp44 visual comparison 视觉比较the purpose of this test is to provide the details for the visual comparison of the color and/or turbidance of sample solutions of certain concentration to a standard solution or a series of standard solutions of known concentration. where a color or turbidity comparison is directed, follow the procedures and conditions outlined below for performing these tests.本试验的目的是提供特定浓度的样品溶液与已知浓度的标准溶液或一系列标准溶液的颜色和/或浊度的视觉比较细节。如果需要进行颜色或浊度比较，请遵循以下程序和条件进行这些测试 comparison vessels: color-comparison tubes matched as closely as possible in internal diameter, in depth of sample solution, and in all other respects should be used.对比容器：应使用内径、样品溶液深度和所有其他方面尽可能匹配的颜色对比管。 viewing conditions for turbidity comparison: tubes should be viewed horizontally against a dark background with the aid of a light source directed fromthe sides of the tubes.浊度比较的观察条件：应在黑暗背景下，借助从管子侧面发出的光源水平观察管子。 viewing conditions for color comparison: tubes should be viewed downward against a white background. most of the time, common room lighting is sufficient to perform the assessment. a light source directed from beneath the bottoms of the tubes may be used if needed and if the practice is consistent between the materials under comparison.颜色比较的观察条件：管子应在白色背景下向下观察。大多数情况下，公共空间照明足以进行评估。如果需要，并且对比材料之间的实践一致，可以使用从管底部下方引导的光源 nephelometry and turbidimetry 散射光浊度法和透射光比浊法1. introduction 介绍nephelometry and turbidimetry are analytical techniques that are based on the principles of light-scattering phenomena. light scattering is the physical phenomenon in which a beam of light changes its direction of propagation (known as deflection) as a result of interaction with sufficiently small matter particles. it has been established from the maxwell electromagnetic theory that a prerequisite for scattering to occur is that the refractive indexes of the suspended particles must be different from those of the suspending liquid. the larger the difference, the more intense the scattering becomes. there are two types of light scattering: 1) elastic scattering, in which the wavelength of the scattered light and incident light are the same and 2) inelastic light scattering, in which the wavelength of the scattered light and incident light are different. only the first type of light scattering (elastic) is relevant to nephelometry and turbidimetry.散射光浊度法和透射光比浊法是基于光散射现象原理的分析技术。光散射是一种物理现象，其中光束由于与足够小的物质粒子相互作用而改变其传播方向（称为偏转）。根据麦克斯韦电磁理论，散射发生的先决条件是悬浮颗粒的折射率必须不同于悬浮液体的折射率。差异越大，散射越强烈。光散射有两种类型：1）弹性散射，其中散射光和入射光的波长相同；2）非弹性光散射，其中散射光和入射光的波长不同。只有前一种光散射（弹性）与散射光浊度法和透射光比浊法有关。 in turbidimetry, the intensity of the transmitted light is measured and the attenuation of the intensity of incident light as a result of scattering is measured at the direction of incident light (i.e., 0°) and compared to the intensity of incident light (blank measurement). the measured property is an indirect measurement of the scattering effect of the suspended particles and is referred to as turbidance. any absorbance of light by the suspended sample will result in additional attenuation of light intensity (see ultraviolet-visible spectroscopy and ultraviolet-visible spectroscopy—theory and practice ). hence, it is important to ensure that the material being measured does not absorb light at the measurement wavelength. indeed the equations governing absorption and turbidimetry are the same (albeit with different values for the attenuation constants). in nephelometric techniques, the intensity of the scattered light at a 90° angle from the propagation direction of the incident light is measured. therefore, a nephelometric measurement is a direct measurement of the scattering effect of suspended matter.在透射光比浊法中，测量透射光的强度，并在入射光方向（即0°）测量散射导致的入射光强度的衰减，并与入射光强度进行比较（空白测量）。被测特性是悬浮颗粒散射效应的间接测量，称为浊度。悬浮样品对光的任何吸收都会导致光强度的额外衰减（参见 ultraviolet-visible spectroscopy和 ultraviolet-visible spectroscopy—theory and practice）。因此，确保被测材料不会吸收测量波长处的光非常重要。实际上，控制吸收和浊度测定的方程式是相同的（尽管衰减常数的值不同）。在散射光浊度法中，测量与入射光传播方向成90°角的散射光强度。因此，散射光浊度法浊度测量是对悬浮物散射效应的直接测量。 2. terms and definitions 术语和定义terms commonly used in describing turbidimetric and nephelometric techniques are:• turbidance (symbol, s): a measure of the decrease of the transmitted incident light beam intensity as a result of the light-scattering effect of suspended particles. the amount of suspendedmatter may be measured by observation of either the transmitted light (turbidimetry) or the scattered light (nephelometry).log i0/it = kbc = ti0 = intensity of incident lightit = intensity of transmitted lightk = molar turbidity coefficientb = cell path lengthc = concentrationt = turbidance• turbidity (symbol, τ): in turbidimetric measurements, the turbidity is the measure of the decrease in incident beam intensity/unit length of a given suspension. the international organization for standardization defines turbidity as “the reduction of transparency of a liquid caused by the presence of undissolved matter”.• turbidity measurement units: the turbidity units are stated using a descriptor which indicates the method of measurement.• nephelometric turbidity units (ntus): when the turbidity is measured using a nephelometer, which measures the scattered light at a 90° angle from the direction of propagation of incident light, the units of turbidity are called nephelometric turbidity units (ntus). the magnitude of ntu is defined based on the turbidity generated by primary formazin standard (a suspension made by mixing solutions of hydrazine sulfate and hexamethylenetetramine in water). safer polymer-bead suspensions are now commercially available and are recognized as an acceptable alternative. however, all those standards are traced to formazin. the primary formazin standard solution has been assigned a turbidity of 4000 ntus.other recognized units for turbidity include the formazin turbidity unit (ftu) and the formazin nephelometric unit (fnu). these units are equivalent to ntu for the range from 0–40 ntus.描述浊度法和浊度法的常用术语包括：• 浊度（符号s）：由于悬浮颗粒的光散射效应，透射入射光束强度降低的一种度量。悬浮物的量可以通过观察透射光（比浊法）或散射光（浊度法）来测量。log i0/it = kbc = ti0=入射光强度it=透射光强度k=摩尔浊度系数b=样品池路径长度c=浓度t=浊度• 浊度（符号，τ）：在透射光浊度测量中，浊度是给定悬浮液的入射光束强度/单位长度减少的量度。国际标准化组织将浊度定义为“由于存在未溶解物质而导致液体透明度降低”。• 浊度测量单位：浑浊度单位用一个描述符表示，该描述符指示测量方法。• 散射光浊度计浊度单位（ntu）：当使用散射光浊度法测量浊度时，浊度计以与入射光传播方向成90°角的角度测量散射光，浊度单位称为散射光浊度法浊度单位（ntu）。ntu的大小是根据初级福尔马肼标准品（一种将硫酸肼和六亚甲基四胺溶液混合在水中制成的悬浮液）产生的浊度定义的。更安全的聚合物微珠悬浮液现已上市，并被公认为可接受的替代品。然而，所有这些标准都可以追溯到福尔马肼。初级福尔马肼标准溶液的浊度为4000 ntu。其他公认的浊度单位包括福尔马肼比浊法单位（ftu）和福尔马肼浊度法单位（fnu）。这些单位相当于0-40 ntu范围内的ntu。3. applications 应用turbidimetric and nephelometric techniques have applications that include 1) concentration determination of solutions and/or suspensions (determination of several cations and anions by precipitating and suspending the resulting precipitate at well-controlled reaction parameters) 2) measurement of the degree of turbidity of turbid solutions or suspensions 3) determination of weight-average molecular weights and dimensions of polydisperse systems in the molecular weight range from 1000 to several hundred million 4) measurement of immunoassays’ reaction kinetics or kinetics of immunoprecipitations (rate nephelometry) 5) monitoring of cell and bacteria growth and 6) particle size distribution determination of suspended material, particle counting, etc.透射光比浊法和散射光浊度法技术的sfer 50 ml of primary formazin standard to a 200-ml volumetric flask, and dilute with particle-free water to volume and mix. the resulting suspension has a turbidity of 1000 ntus.• formazin reference suspensions: prepare by mixing in a 100-ml volumetric flask, portions of the respective formazin stock standard suspension and particle-free water according to table 1.[注：以下所有的程序必须在20±2°的条件下进行（参见）]• 硫酸肼溶液：将1.000 g acs级硫酸肼（n2h4h2so4）溶解在100 ml 的a类容量瓶中中，并用无颗粒水稀释至刻度。让该溶液静置4-6

p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 细菌内毒素是革兰氏阴性菌的细胞壁成分，当细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。其化学成分本质为磷脂多糖-蛋白质复合物，毒性成分主要为类脂质A。内毒素小量入血后被肝脏枯否细胞灭活，不造成机体损害。大量进入人体循环系统后可引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等反应——又叫“热原反应”。因此，生物制剂、注射剂、抗生素类、疫苗类、透析液等制剂以及医疗器材类（如一次性注射器，植入性生物材料）必须经过细菌内毒素检测试验合格后才能使用。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 化学药品注射剂除内毒素策略及超滤去除内毒素的应用及优势。在化学药品注射剂的制备过程中，难以避免的会从原辅料，过程，人员，设备和环境等环节中引入微生物及内毒素。出于药物安全的考量，药典对于化学注射剂的内毒素水平有严格的限定。这要求注射剂生产企业采取合理的策略，严格控制注射剂中的内毒素含量。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 20px " & nbsp span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 内毒素特点 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " 1.耐热：100℃，加热1小时，不会被破坏。只有在160℃，加热2–4个小时，或用强碱、强酸或强氧化剂加温煮沸30分钟才能破坏它的生物活性。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 2.抗原性弱：内毒素不能被稀甲醛溶液脱去毒性成为类毒素；把内毒素注射到机体内虽可产生一定量的特异免疫产物（称为抗体），中和作用较弱。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 15px " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 内毒素的检测 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " 内毒素的检测常用家兔热原法和鲎试验法。由于家兔对“热原”的反应与人基本相似，所以半个世纪以来用家兔来检测热原，为保障药品质量和用药安全发挥了重要作用。1956年美国人Bang发现美洲鲎血液遇革兰氏阴性菌时会产生凝胶。其后Levin和Bang又搞清楚微量革兰氏阴性菌内毒素也可以引起凝胶反应，从而创立了鲎试剂检测法。由于鲎试剂法简单﹑快速﹑灵敏﹑准确，已广泛用于临床、制药工业药品检验等方面。鲎的来源目前主要有2大区域，除了美洲还有亚洲的中国鲎。 /p p style=" text-align: center margin-top: 10px " img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 326px height: 250px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202007/noimg/9215e3a6-00d0-4b49-bd14-853b4702aea8.gif" title=" 鲎.gif" alt=" 鲎.gif" width=" 326" height=" 250" / /p p style=" margin-top: 10px text-align: center margin-bottom: 5px " span style=" color: rgb(127, 127, 127) font-size: 14px " strong (图片来自网络) /strong /span br/ /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " 2005年版中国药典规定168个品种进行细菌内毒素检查法。其中收录的细菌内毒素检查法包括2种：凝胶法和光度法，都是使用鲎试剂检测内毒素。前者利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的原理来定性检测或半定量内毒素，后者包括浊度法和显色基质（比色）法，系分别利用鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化及产生的凝固酶使特定底物释放出呈色团的多少来定量测定内毒素。比色法又可分为终点显（比）色法和动态比色法。该方法灵敏度、精密度高。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 鲎试验收载于1980年20版美国药典，又叫 span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 细菌内毒素试验 /strong /span （ span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong BET，Bacterial Endotoxin Test /strong /span ）；随后英、德、意、日以及中国相继在药典中收载。此后鲎试验逐渐替代家兔热原试验。但由于部分药品自身特殊性无法通过稀释法消除干扰，故鲎试验无法完全取代家兔热原试验。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 鲎试剂是鲎的血液变形细胞溶解物制成的无菌冷冻干燥品，含有丝氨酸蛋白酶原(C因子)、G因子。其中，C因子能被细菌内毒素激活，G因子能被真菌葡聚糖激活，引起一系列酶促反应。根据鲎试剂反应原理，分别有针对细菌内毒素和真菌葡聚糖两种检测试剂盒，用于细菌内毒素含量和真菌感染的检测(G试验)。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 15px " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 原则解读 /strong /span br/ /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " 该指导原则是对 span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong 《1143细菌内毒素检查法》 /strong /span 内容和应用做进一步的说明。归纳起来有以下几个重点： /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 15px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 1.详细阐释了内毒素限值的设定依据： /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " 内毒素限值由公式“L = K/M”计算得到。其中M为“人用每千克体重每小时最大供试品剂量“，详见《1143细菌内毒素检查法》对公式的解读。K的取值考虑了不同剂型的特点。 /p p style=" text-align: center margin-top: 15px " img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 341px height: 290px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/28bbe22b-3c49-497a-9635-e0664f8bf099.jpg" title=" 1143章节.png" alt=" 1143章节.png" width=" 341" height=" 290" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " 指导原则中增加了 span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong “联合用药”“婴幼儿”“营养不良” /strong /span 和 span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong “恶病质” /strong /span 等情况的用药。考虑到细菌内毒素对体弱患者人群可能导致更严重的影响而更加严格的控制最大可接受量。 span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 100 mL /strong /span 及以上装量的大输液类制剂，其细菌内毒素限值一般不得超过 span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 0.50 EU/mL /strong /span 。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong & nbsp 2.对于测量方法的选择的考量： /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " 对于这两种检查方法，可以根据需要进行选择。凝胶法简便易操作，有可能不能排除干扰作用；光度法可以定量，并且预测趋势。凝胶法常用的反应容器为10 mm × 75 mm的玻璃小试管或空安瓿等，光度法常用的反应容器为测定仪专用试管或酶标板。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong 凝胶法： /strong /span 凝胶法的优点是操作简便，供试品在排除干扰作用后均可使用凝胶法进行检验。若样品稀释到MVD仍不能排除干扰作用，应进一步对供试品的前处理进行研究，再用干扰试验验证能否使用凝胶法。由于动态法的检测限范围比凝胶法宽，使得有干扰的样品可以有更大的稀释倍数，对于部分使用凝胶法无法排除干扰的样品，可以尝试使用动态法建立细菌内毒素检测方法。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong 光度法： /strong /span 包括浊度法和显色法，可定量检测内毒素的含量。能较为准确评估产品在生产过程中污染的相对风险，定量检测的数据不仅有利于追踪产品质量趋势，还能起到风险预警的作用，更易达到数据完整性的要求。光度测定法可通过回收率判断出干扰的趋势，尤其对于研究性质的样品(如新产品)更具有优势。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 15px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 3.供试品的前处理技术： /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " *溶解样品：内毒素检查用水 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " *助溶：超声波、加热、助溶剂、调节pH等 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " *有机溶剂（如乙醇、DMSO等）溶解时，必须进行干扰试验 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " *包合技术（如微球、脂质体），采取适宜方法破坏，释放内毒素 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 15px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 4.检查法的建立： /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " 鲎试剂反应的一致性：应使用两个生产厂家的鲎试剂对至少三批样品进行干扰试验。 span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 0em " span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong 不宜建立细菌内毒素检查项的情况： /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " *无法排除供试品对细菌内毒素检查的干扰作用 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " *只能使用最高灵敏度鲎试剂（凝胶法0.03 EU/mL，光度法0.001 EU/mL）排除干扰 br/ /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 5.其他： /strong /span br/ /p p style=" text-align: justify margin-top: 10px text-indent: 2em " *避免支间差异：规格大于0.1 mL/支装量的鲎试剂时，为避免支间活性差异带来的影响，应复溶后混合，再分装使用。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " *若MVD值不是整数，可以使用小于MVD的整数进行实验。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 15px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 6.重组C因子法 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " 对于含有 span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong β葡聚糖干扰 /strong /span 的样品检测，该原则中给出了“重组C因子法”进行测试。C因子是鲎试剂中对细菌内毒素敏感的蛋白，能够选择性识别内毒素。被细菌内毒素活化后，可与荧光底物作用产生与内毒素浓度成比例的荧光信号。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 重组C因子法试验需采用荧光酶标仪，激发/发射波长一般为: strong 380 nm/440 nm /strong ，检测温度一般为37° C ± 1° C。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 15px " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 检测与除杂 /strong /span br/ /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " 内毒素不仅可以通过快速检测，还可以通过专用的酶标仪配合相关试剂精准检测。对于实验用水中的内毒素，可以使用专用的超滤设备以及纯水机进行测试。 span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong 仪器信息网 /strong /span 编辑整合了相关资源，为广大制药工作者提供参考。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 15px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 快速检测平台 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " 查士利华检测平台支持相同的卡片技术，准确、方便、实时检测内毒素和葡聚糖浓度。此外，每个系统都与 a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C305827.htm" target=" _blank" strong Charles River /strong /a Cortex& #8482 数据管理软件平台集成，创建了一个真正强大，可控的内毒素检测程序。 /p p style=" text-indent: 0em text-align: center margin-top: 10px " & nbsp img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 140px height: 193px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/2bc46807-b781-4c83-85a1-1246fb4d3b43.jpg" title=" 便携.png" alt=" 便携.png" width=" 140" height=" 193" / span style=" font-size: 14px color: rgb(127, 127, 127) " strong br/ /strong /span /p p style=" text-indent: 0em text-align: center " span style=" font-size: 14px color: rgb(127, 127, 127) " strong Endosafe sup & reg /sup nexgen-PTS& #8482 新一代便携式检测系统 /strong /span /p p style=" text-indent: 0em " span style=" font-size: 14px color: rgb(127, 127, 127) " strong /strong /span /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 198px height: 272px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202011/uepic/fbd7daa6-e453-49fc-85dd-15064ef82a9c.jpg" title=" 查氏维尔-cutted.jpg" alt=" 查氏维尔-cutted.jpg" width=" 198" vspace=" 0" height=" 272" border=" 0" / /p p style=" text-indent: 0em text-align: center " span style=" color: rgb(89, 89, 89) font-size: 14px " strong 实拍Endosafe sup & reg /sup nexgen-PTS& #8482 /strong /span span style=" font-size: 14px color: rgb(127, 127, 127) " strong /strong /span br/ /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " 15分钟内提供定量鲎实验结果；FDA认证，检测范围在0.005-10 EU/mL；系统便携，采样现场直接获得检测结果。 /p p style=" text-align: center margin-top: 10px " & nbsp img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 311px height: 122px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/e69fe2a9-77ca-4c0d-9024-609aa7adb801.jpg" title=" 5卡.png" alt=" 5卡.png" width=" 311" height=" 122" / /p p style=" text-align: center text-indent: 0em " span style=" font-size: 14px color: rgb(127, 127, 127) " strong Endosafe sup & reg /sup nexgen-MCS& #8482 多卡片式细菌内毒素检测系统 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 高样品通量，多个卡片共同测定，叠加的台式系统；15分钟内可同时检测5个样品；样品独立检测，允许随时插取，无需等待整批取样。 /p p style=" text-align: center " img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 271px height: 167px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202007/noimg/68f78cdd-3c6f-4408-9285-fd5d04858e4f.gif" title=" 全自动N.gif" alt=" 全自动N.gif" width=" 271" height=" 167" / /p p style=" text-align: center " span style=" font-size: 14px color: rgb(127, 127, 127) " strong Endosafe sup & reg /sup Nexus& #8482 全自动细菌内毒素检测系统 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 消除技术人员在样品制备上可能造成的差异；客户仅需要添加带条形码的样品到平台上即可完成。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 20px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 鲎试剂专用 a href=" https://www.instrument.com.cn/zc/142.html" target=" _blank" 酶标仪 /a /strong /span /p p style=" text-align: center text-indent: 0em margin-top: 15px " a href=" https://www.instrument.com.cn/application/Solution-881680.html" target=" _blank" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 284px height: 240px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/5f454915-b77f-4a81-b2bf-4c9743d1a359.jpg" title=" Thermo专用酶标仪.png" alt=" Thermo专用酶标仪.png" width=" 284" vspace=" 0" height=" 240" border=" 0" / /a span style=" color: rgb(127, 127, 127) font-size: 14px " strong br/ /strong /span /p p style=" text-indent: 0em text-align: center margin-top: 5px " span style=" color: rgb(127, 127, 127) font-size: 14px " strong Thermo Varioskan LUX多功能微孔板读数仪 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " Varioskan LUX多功能微孔板读数仪是使用鲎试剂检测细菌内毒素适配的酶标仪。在传统酶标仪的基础上，专为内毒素检测优化设计光路，可满足不同鲎试剂检测需求。单通道检测，避免了多通道检测中不同光路之间的差异，另有2个参比通道，确保读数的高度精确性。检测波长范围 strong 340–850 nm /strong ，满足多种鲎试剂检测需求，可进行动态显色法和动态浊度法检测。适用于微量96孔板，在提高检测通量的同时，降低实际成本。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 内置自我诊断程序，在启动阶段，系统对载板位置、光源和滤光片在内的各种相关参数进行全面的检测，确保结果的准确可靠内置振荡器及孵育器。最高温度达50℃，有热盖设计保证温控精确，满足内毒素检测的温度。 /p p style=" margin-top: 15px text-indent: 2em text-align: justify " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 过滤模块 /strong /span /p p style=" text-align: center margin-top: 10px " img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 245px height: 173px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/016a48e4-8fb8-48e8-8606-e457748318f5.jpg" title=" 过滤膜.png" alt=" 过滤膜.png" width=" 245" height=" 173" / /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(127, 127, 127) font-size: 14px " strong Merck——盒式超滤膜包Pellicon& reg 2 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " 超滤去除内毒素，使用孔径小于内毒素聚体的膜截留内毒素而让料液通过。使用8kD或者10kD的超滤膜包，内毒素截留率通常可以达到99.99%以上。超滤后的液体无相变，无杂质，不影响产品量；可验证；通量高，产品收率高。设备易于清洗消毒除热原，可重复使用。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 15px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 超纯水机——去除内毒素等杂质 /strong /span br/ /p p style=" text-align: center margin-top: 10px " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C274810.htm" target=" _blank" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201708/pic/3f90cbaf-a94c-4eb8-bd04-4b273495e56b.jpg!w300x300.jpg" / /a /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " strong 点击进入专场，查看更多 /strong a href=" https://www.instrument.com.cn/zc/478.html" target=" _blank" strong span style=" color: rgb(0, 176, 80) " 纯水机 /span /strong /a strong 的信息。 /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 15px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 2020药典系列文章： /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " strong /strong /p table style=" border-collapse: collapse " align=" left" tbody tr class=" firstRow" td style=" border: 1px solid rgb(255, 255, 255) word-break: break-all " width=" 433" valign=" top" p class=" F24 Fw L40 G2" a href=" https://www.instrument.com.cn/news/20200710/553590.shtml" target=" _blank" 2020药典 |《9306 遗传毒性杂质控制指导原则》解读与对策 /a /p /td /tr tr td style=" border: 1px solid rgb(255, 255, 255) word-break: break-all " width=" 433" valign=" top" p class=" F24 Fw L40 G2" a href=" https://www.instrument.com.cn/news/20200709/553518.shtml" target=" _blank" 解读2020药典比表面积新增章节 这些仪器五星标注 /a /p /td /tr /tbody /table