单分子荧光检测

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  • 分子荧光光谱的新方法、新视角、新探索
    p style=" text-align: justify " span style=" font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai " 　　随着科研需求的发展，分子荧光光谱相关的新技术和新应用也在不断的深入拓展中,尤其是在附件的多样化、联机，以及其他功能性拓展方面表现得越来越明显。为了多方位展现分子荧光光谱领域的最新成果，仪器信息网特别策划制作《不可或缺分子荧光光谱技术及应用进展》网络专题，旨在展现分子荧光光谱仪的最新技术及应用情况。 /span br/ /p p style=" text-align: justify " span style=" font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai " 　　作为分子荧光光谱领域的代表企业，HORIBA一直在推陈出新，推出了一系列分子荧光光谱新产品、新技术，给相关的科研用户提供了新的方法和视角。今天，我们特别邀请了HORIBA荧光产品经理周磊博士给大家分享HORIBA在分子荧光产品方面的布局和规划。 /span /p p span style=" font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai " /span /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 230px height: 256px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/936d099b-37f2-46a1-87fb-50a656e98b66.jpg" title=" 周磊.jpg" alt=" 周磊.jpg" width=" 230" height=" 256" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-align: center " strong HORIBA荧光产品经理 周磊博士 /strong /p p style=" text-align: justify " strong 　　仪器信息网：与其他分析仪器相比，不少人认为分子荧光光谱新产品的推出不是很活跃，甚至市场也略显“沉寂”，请问您如何评价该类仪器的市场活力及竞争格局? /strong /p p style=" text-align: justify " strong 　　周磊: /strong 分子荧光光谱确实是比较经典成熟的方法，不过仪器的核心技术水平一直在不断提升，应用领域也在不断扩大。HORIBA的分子荧光产品就一直在推陈出新，这些产品技术不仅得到了仪器信息网各位专家和用户的好评，甚至多次获得仪器信息网“优秀新品奖”，对于整个荧光光谱仪的创新起到了积极鼓励的作用。 /p p style=" text-align: justify " 　　例如Aqualog(同步吸收-三维荧光光谱仪)，基于A-TEEM专利技术，在荧光内滤效应消除问题、超快三维荧光采集、复杂样品多组分分析等关键问题上具有全新突破，已在环境有机污染物、食品分析、医药等市场方面有突出的表现；另一款荧光寿命光谱仪Delta系列，具有全球同类产品中最快的寿命衰减采集时间(低至1ms)和超宽的寿命测试范围(25ps~1s)等性能。该系统一经推出，就受到了业界高度关注，发表了数篇重量级文献，其中仪器仪表类的国际一流期刊“Measurement science and technology”文章显示：“全球首次将百兆赫兹级半导体激光和超短10ns死时间TCSPC计时单元完美匹配，避免了样品的再激发和信号丢失问题，可快至1ms收集荧光衰减曲线。” 2014年刊登在“Spectrochimica acta part A: molecular and biomolecular spectroscopy”的文章显示：“基于最新技术的DeltaFlex系统，在无需更换检测器和电子器件条件下实现了皮秒至秒的宽寿命测试，首次利用内源氨基酸监测了不同温度对蛋白变性转换的动态影响。”另外，去年推出的小型荧光光谱仪Duetta也收到了良好反馈，解决了市场上小型荧光在近红外一区波长检测的短板，并且吸收和荧光功能二合一，因此在生物、医药等领域广受欢迎。 /p p style=" text-align: justify " strong 　　仪器信息网：从技术的角度出发，您认为目前分子荧光光谱有哪些新的技术值得期待? /strong /p p style=" text-align: justify " strong 　　周磊： /strong 随着稳瞬态荧光光谱技术的发展及多种硬件扩展附件的开发，如低温变温附件(液氮、液氦)、荧光显微镜耦合分析、各种激发源(白光激光器，OPO激光器、X射线源等)荧光光谱仪在不同科研实验室中发挥着重要作用。同时我们发现，在一些仪器功能上，市场正在逐渐接受新技术带来的新方法、新视角，还是以HORIBA几项新技术为例： /p p style=" text-align: justify " 　　Duetta的近红外一区高效检测能力解决了常规设备700nm以后的检测短板，拍照式的CCD检测技术带来了全新动态荧光光谱采集功能，可以在磷光材料、长余辉样品、易光漂白样品等应用上获得全新视角。 /p p style=" text-align: justify " 　　Delta荧光寿命光谱仪中的荧光寿命动力学技术，带来了全新的动力学研究视角，解决了光漂白样品不能直接用于动力学研究的问题以及常规寿命技术采集速度慢而不能用于动力学的困难局面，该技术已经成功的被用于蛋白质和药物的相互作用研究(Photochemistry and Photobiology, 2013, 89: 1071–1078)。TRES时间分辨发射光谱技术让我们能够观察到样品分子在某一时刻的发射光谱，并且可以按照很短的时间内(皮秒、纳秒)依次观察光谱的变化，从而说明发光机理。解决了常规寿命测试技术，因为测试速度慢，光源能量低，重复频率低以及高级拟合软件分析的问题，进而造成该技术没有很好地被利用起来的问题。Delta荧光寿命光谱仪可以同时配备多个检测器(最多可配置四个检测器)，实现多通道检测，同时检测多个波长在物质作用变化时寿命的动态变化，提供全新的分析方向。 /p p style=" text-align: justify " 　　在时间分辨发射光谱中还有一个重要分支，延迟光谱(或磷光光谱)技术，其特点是通过门控技术(或单脉冲实时采集SSTD技术)对信号采集时间控制，有效分离不同时刻的发射光信号，譬如OLED材料中的荧光、磷光光谱分析，常规技术只是采用虚拟或者电子的门控进行采集，其是将荧光和磷光信号一并采集，最终按照时间输出，这样存在样品中的强荧光信号造成检测器饱和，而弱磷光信号又没有得到有效采集的问题。真正的门控技术，可以有效控制硬件设备的采集时间，避开荧光信号，特别适用于弱的磷光信号采集，这对于揭示磷光材料的真实发射光谱和发光机理是非常必要的手段。 /p p style=" text-align: justify " 　　此外，在寿命成像方面，常规技术中的逐点扫描技术，在获得一张寿命成像上花费很长的时间，HORIBA最新推出的FLIMera是一款大视场成像相机，可以实现视频级的荧光寿命成像。FLIMera不是单点共聚焦扫描成像，其每个像素点均包含4096的时间通道，24576个像素点可实现基于TCSPC的荧光寿命成像，完成快速荧光寿命成像，满足动态寿命成像的需求。 /p p style=" text-align: justify " 　　在日益受到客户关注的近红外区域，HORIBA模块化荧光光谱仪也有着其独有的优势，通过同一检测器就可完成稳态与瞬态的测试，并且相比较于采用常规的PMT而言，红外测试范围可以扩展至5500nm。 /p p style=" text-align: justify " strong 　　仪器信息网：从应用的角度出发，当前分子荧光光谱仪器的应用和研究热点分布在哪些领域?在科研过程中能给大家带来哪些“惊喜”? /strong /p p style=" text-align: justify " strong 　　周磊： /strong 荧光作为一个热门技术，一直以来被广泛用于生物医学研究、制药、化工、半导体材料、太阳能电池等领域。如今通过荧光信息给出物质相互作用时能量传递的证据，比如载流子寿命，还可以评价材料改性的影响，这在太阳能、光催化材料开发中有重要意义。 /p p style=" text-align: justify " 　　例如，在OLED发光材料中，已经不局限于过去的激发/发射光谱、量子产量的测定。随着第三代OLED的进展，TADF得到了重点关注，在TADF机理阐述中对于延迟光谱(或磷光光谱)的表征显得尤其重要，这对荧光光谱仪提出了更高的要求，不仅仅局限于常规功能上的采集，还需要延迟光谱能力，以及极短微妙寿命测试。太阳能材料中的钙钛矿作为明星材料已经得到跨越式发展，在太阳能电池研究过程中，对于载流子传输的表征尤其重要。寿命技术是一种便捷、易于使用的方法，但是太阳能钙钛矿层极其薄(nm级别)、发射波长偏红外、表面散射光强以及怕水和氧气，这些对于寿命设备的灵敏度、检测能力、光路设计、测试速度和气氛保护装置都提出了更高的要求。 /p p style=" text-align: justify " 　　荧光影像技术在生物医学研究和临床诊断检测中已经被广泛使用。近红外探针的开发在荧光影像技术中具有广阔的应用前景。近红外探针分为近红外一区和近红外二区探针，在常规的荧光光谱仪中很难满足这两个区的波长范围，特别是近红外一区的检测，典型的PMT检测波长范围难以达到，而科研大型模块化设备需要定制化配置和高成本、操作复杂的近红外PMT(例如型号R5509的PMT，需要预热2h，续流型消耗液氮)。 /p p style=" text-align: justify " 　　中红外材料在通信、环境监测及医学等领域具有重要的应用价值，因为其发光的波长范围处于中红外段，常规的荧光设备很难实现这个波长范围检测，并且过去的技术中又很难检测发光寿命。提供适用波长范围的高灵敏度检测器，并且同时能够检测寿命的检测器尤为重要。 /p p style=" text-align: justify " strong 　　仪器信息网：分子荧光光谱仪相关的应用标准情况怎么样?在应用拓展方面，有哪些制约因素? /strong /p p style=" text-align: justify " strong 　　周磊： /strong 分子荧光光谱仪相关的一些国家标准正在制定，HORIBA也参与到了一些标准的制定中去，例如教育部的行业标准“荧光光谱分析方法通则”等。作为HORIBA用户，美国NIST还基于HORIBA的荧光光谱仪制定了荧光标准方法。 /p p style=" text-align: justify " 　　我也从HORIBA用户国家计量科学院的贾志立副研究员那了解到：现在分子荧光光谱仪相关的应用标准，主要针对的是分光光度计，一方面是仪器相关的标准，包括仪器的分级、技术要求和试验方法等：另一方面是检测方法的标准，如叶绿素含量测定、炭黑分散性和刑事技术的微量物证的检测方法等，检测方法中关于发光物质荧光检测相关的标准较少。 /p p style=" text-align: justify " 　　另外，分子荧光光谱仪不仅包括分光光度计，还包括光学显微镜与光谱仪相结合的微区荧光系统，微区荧光系统在研究荧光材料的显微光谱信息方面应用广泛，但目前缺乏相关的标准。 /p p style=" text-align: justify " 　　目前在分子荧光光谱的应用拓展方面，还受到一些因素的制约：一方面可能是相关标准的宣贯方面不足：另一方面是一些仪器客户如高校、研究所的科研人员，对相关标准不熟悉，没有认识到标准在科研应用中的重要性：除此之外，相关标准物质的缺乏也会限制校准方法类标准的应用拓展。 /p p style=" text-align: justify " strong 　　仪器信息网:贵公司当前主推的产品?最具优势的领域? /strong /p p style=" text-align: justify " strong 　　周磊: /strong HORIBA是唯一研发设计生产全系列科研荧光光谱仪的厂家，型号涵盖了稳瞬态光谱仪，覆盖了紫外-可见、近红外、中红外光谱范围。针对不同应用领域，HORIBA会根据客户的实际应用需求特点，来推荐相应的特色配置，可以说我们并不会强调说主推某款产品。 /p p style=" text-align: justify " 　　譬如：Aqualog主要针对于复杂水环境，大气颗粒物中的发光基团等的整体研究，无论是软件功能或者硬件设计，都从环境工作者的角度出发，解决环境科研分析的需求。例如通过专业软件，进行化学计量学分析；Duetta针对于生物荧光探针等具有近红外一区快速检测需求的应用时(量子点，有机荧光探针、金纳米团簇等)，由于其配备的CCD具有一次性采谱与宽检测范围(250~1100nm)的特点，在连续监测范围上十分具有优势，按压式的样品仓方面客户在实验室环境中操作时的便捷性，不开盖加样的设计满足了客户在测试过程中去添加样品，以此来查看两种或多种物质在反应过程中全谱的变化信息；荧光寿命光谱仪具有高能量窄脉宽寿命光源，皮秒稳瞬态检测器及自动拟合寿命软件，在太阳能钙钛矿，光催化研究中得到了广大科研用户的认可；模块化荧光光谱仪产品，通用性强，采用开放式模块化光路设计，根据用户的需求定制系统，并且在近红外光谱和寿命采集上具有其独有优势，可以同时检测近红外光谱与寿命。全新软件可以实现稳瞬态功能同时控制，内含特质化功能，同时包含多种数据处理方式，融合多种寿命测试技术，多元化满足客户寿命测试需求。模块化荧光光谱仪等主要针对于多功能，高灵敏度，定制化的科研领域在近红外研究领域，如稀土元素掺杂的材料中更有其独有的优势(碳管，三维荧光需求)，同一检测器就可实现近红外光谱与寿命的测量，性价比更高)；DeltaFlex和DeltaPro专注于荧光寿命的表征，在表征钙钛矿材料中载流子等方面(分子互作，比率荧光)，有着很大的应用优势；视频级的荧光寿命成像技术(FLIMera荧光寿命成像相机)，在研究神经传导，分子微环境(如pH值、离子浓度的不同)等领域有着非常广泛的潜在应用。 /p p style=" text-align: justify " strong 　　仪器信息网：针对当前的市场格局，贵公司在分子荧光光谱产品方面有什么样的定位和布局? /strong /p p style=" text-align: justify " strong 　　周磊： /strong HORIBA是以客户的需求为导向，不断开发满足客户不同应用需求的产品，并且针对不同热点研究领域，提供针对性的配置方案。HORIBA着重于科研应用市场，并且深入工业分析、研发市场。如果说HORIBA以往产品技术更加专注和擅长于高端科学研究领域，将来，更多领域的应用都需要更专业的仪器，我们会向专业化方向发展，新品Duetta的更快捷测试技术、更小巧的外观设计等也使该产品从科学研究领域向分析测试、工业应用市场的拓展成为可能，分析测试、工业领域等未来潜力市场也将得到HORIBA的重点关注。 /p p br/ /p
    时间： 2020-12-14
    作者： 叶子
  • 小分子荧光探针研究取得进展
    近日，中国科学院上海药物研究所李佳团队联合华东理工大学贺晓鹏团队、英国巴斯大学Tony D. James团队，以及美国德克萨斯大学奥斯汀分校Jonathan L. Sessler团队，撰写“指南综述”（Tutorial Review）文章Small-molecule fluorescence-based probes for interrogating major organ diseases，分类总结了可用于探查主要器官疾病的小分子荧光探针。相关研究成果在线发表在Chemical Society Reviews上。　　人体是由多个器官系统构成的有机体，每个器官在体内发挥着特定作用，器官之间的协同工作维持着人体的正常运行。然而，异常的器官功能障碍会影响机体的健康，并导致灾难性的后果。组学等鉴定技术的发展，促使与器官功能障碍相关的生物标志物相继被发现。开发非侵入性的、可实时观察特定器官疾病生物标志物的方法，将提高对特定器官病理变化的研究能力，并利于疾病的早期诊断，进而为开发有效的治疗方法提供帮助。基于荧光生物成像的检测技术，具有灵敏度高、操作简单、检测下限低、响应速度快、时空分辨率优异及无损体内原位成像等特性，被用于疾病生物标志物的检测，为器官疾病的诊断提供了较为可靠的依据。　　在科研团队前期研究的基础上，研究人员分类总结了可用于探查主要器官疾病的小分子荧光探针。该论文阐述了用于主要器官疾病研究的小分子荧光探针的设计策略；剖析了生物标志物检测对于研究器官功能障碍和其他器官相关疾病的重要性；阐明了小分子荧光探针在体外、体内监测各种致病过程的用途；介绍了目前用于研究器官疾病的小分子荧光探针存在的局限，并提出了建议与展望。该研究为开发新的有效的荧光分子探针用于早期诊断和治疗不同器官疾病具有重要的借鉴意义。　　研究工作得到国家自然科学基金重大研究计划、上海市科技重大专项、上海市国际合作与交流项目及中国博士后科学基金面上资助等的支持。 综述中涉及的人体主要器官示意图（a）及用于探查器官相关疾病的小分子荧光探针的设计策略示意图（b）
    时间： 2021-08-03
    作者： 情绪波动
  • 多项新技术写入《分子荧光光谱分析方法通则》
    日前，全国教育装备标准化技术委员会印发教育行业标准《分子荧光光谱分析方法通则》修订版的征求意见稿，实施了20年的《JY/T025-1996光栅型荧光分光光度方法通则》(JY/T 002—1996)迎来了一次"大修订"。说是“大修订”，是因为新《通则》增加了多项分子荧光光谱的新技术和新方法。　　《JY/T025-1996光栅型荧光分光光度方法通则》编写于1996年，1997年4月1日实施。原有标准主要是针对传统有机荧光化合物的分析，而在近20年的发展中，荧光分析的范畴得到了极大的拓展，包括荧光粉体材料、量子点等一大批的新型荧光材料不断涌现，它们均能够用分子荧光的技术进行分析和测试。　　此外，20年来，荧光光谱仪性能有了较大的发展，荧光寿命和绝对量子产率、时间分辨发射(激发)光谱等技术不断完善。　　为了更有效地发挥标准的作用，指导用户利用荧光光谱仪正确地实施检测分析，并作为制定具体分析方法标准的主要指导性技术文件，修订组根据原有标准的内容和荧光光谱分析在上次标准发布后的技术更新，并区分X-射线荧光分析，将标准名称更新为“分子荧光光谱分析方法通则”。　　与原通则相比，新通则增加了荧光偏振、荧光寿命和量子产率、同步荧光扫描、三维荧光光谱、时间分辨发射(激发)光谱测试等新的方法原理、分析步骤和结果表述。　　在原有试剂和材料的基础上，新《通则》补充了Nd-YAG、罗丹明101、Ludox、毛玻璃等，分别用于近红外区发射波长确认、绝对光致发光量子产率确认和校正、荧光寿命测试中灯谱测定、激发波长和发射波长精度的确认等。　　此外，在仪器方面，新《通则》还分别介绍了稳态荧光光谱仪、瞬态荧光光谱仪的相关情况，并给出了稳态荧光光谱仪的技术指标。　　本标准修订编写建议稿由四川大学分析测试中心作为主持修订单位，北京大学分析测试中心、东华大学分析测试中心、兰州大学分析测试中心作为辅助修订单位一起完成。具体来说，四川大学吴鹏负责范围、定义、方法原理和仪器 北京大学陈明星负责试剂和材料、分析步骤、仪器 东华大学徐洪耀负责样品和仪器 兰州大学巨正花负责分析结果的表述、安全注意事项、仪器。而且，工作组还邀请了Horriba Jobin Yvon公司技术中心应用专家对初稿进行审定和修正。　　详细内容参见附件：分子荧光光谱分析方法通则（征求意见稿）.doc
    时间： 2016-05-26
    作者： 叶子
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单分子荧光检测相关的方案

  • 日立荧光在环境分析中的应用
    环境分析和监测的对象往往是微量、超微量的样品，或者很多样品具有时间性和空间性，因此对分析方法的要求越来越高。通常要求分析方法由足够高的灵敏度和极低的检测限，分子荧光分析法由于灵敏度高，选择型号，取样量少，方法简便快捷等特点，成为环境分析中的重要手段。
  • 利用日立荧光进行皮肤胶原蛋白的无损检测
    关于皮肤的发光，最被人们熟知的是由于使用某些含有荧光剂的化妆品而造成的荧光，其实我们的真皮层中的一些物质，本身就可以发出荧光。为什么正常皮肤会发出荧光呢？这是因为胶原蛋白的存在，胶原蛋白是皮肤组织中的结构性蛋白，其数量和健康关系到外表皱纹的生成与皮肤的老化现象，由于胶原蛋白具有自体荧光，根据胶原蛋白的种类或交联状态的不同，真皮层荧光光谱或强度会发生变化[1]，因此可以根据皮肤的荧光光谱来检验胶原蛋白含量及结构，此检测法更具实时性与非侵入性，目前，市面上一些胶原蛋白产品也用这种方法来判断产品对于改变皮肤状态的功效。
  • 水质 石油类的测定 荧光分光光度法 技术方案（美国特纳TD-500D）
    美国特纳TD-500D便携式水中油分析仪，是一款用正己烷代替红外法四氯化碳作萃取剂的紫外荧光测油仪，检测原理为紫外荧光法（国内又称分子荧光法、荧光分光光度法），符合新国标（征求意见稿）的技术要求，可快速、轻松和可靠地测量水中油含量（原油、燃油、润滑油、柴油，部分的凝析油及精炼的碳氢化合物），测量范围为0.005~1000mg/L。TD-500D具有体积小、重量轻、精度高、重现性好、操作简单、检测速度快、萃取剂相对安全环保等优点。
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  • 浅谈单分子荧光检测技术的原理及其在生命科学中的应用

    浅谈单分子荧光检测技术的原理及其在生命科学中的应用

    [align=center][b][font=宋体]浅谈单分子荧光检测技术的原理及其在生命科学中的应用[/font][/b][/align][align=center][font=宋体]吴晶[/font][sup][font='Times New Roman',serif]1[/font][/sup][font=宋体]，刘皎[/font][sup][font='Times New Roman',serif]1,*[/font][/sup][/align][align=center][font='Times New Roman',serif]1. [/font][font=宋体]北京大学医药卫生分析中心，北京，[/font][font='Times New Roman',serif]100191[/font][/align][align=center][font='Times New Roman',serif]* [/font][font=宋体]通讯作者[/font][/align][b][font=宋体]摘要[/font][/b][font=宋体]由于单分子检测（[/font][font='Times New Roman',serif]SingleMolecule Detection, SMD[/font][font=宋体]）特有的[/font][font=宋体]高灵敏度、高空间分辨率、高时间分辨率、高信号质量等特点[/font][font=宋体]，使其[/font][font=宋体]有望发现其他常规实验中难以发现的实验现象，因此[/font][font=宋体]成为了生物学、医学及药学等生命科学领域重要的科研工具。本文结合作者所在的北京大学医药卫生分析中心生物成像平台的工作经验，概述了单分子荧光检测技术的原理以及在生命科学中的应用，以期为相关科研技术人员提供参考。[/font][b][font=宋体]关键词[/font][/b][font=宋体]单分子荧光检测，荧光互相关光谱，荧光寿命成像，应用[/font][b][font='Times New Roman',serif]Abstract[/font][/b][font='Times New Roman',serif]Single Molecule Detection (SMD)has become an important scientific research tool in the fields of biology,medicine and pharmacy due to its unique sensitivity, resolution and signalquality. Based on the author's work experience in the biological imaging lab ofPeking University Medical and Health Analysis Center, this paper summarizes theprinciple and applications of SMD in the life sciences, in order to providereference for related scientific researchers and technicians.[/font][b][font='Times New Roman',serif]KeyWords [/font][/b][font='Times New Roman',serif]SMD, FCS, FLIM, Application[/font][b][font='Times New Roman',serif]1 [/font][font=宋体]引言[/font][/b][font=宋体]单分子检测（[/font][font='Times New Roman',serif]Single Molecule Detection, SMD[/font][font=宋体]）技术是一种能够在单分子水平上检测分子的技术，它具[/font][font=宋体]有高灵敏度、高空间分辨率、高时间分辨率、高信号质量等特点[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]它不但实现了某种意义上可称之为最高灵敏度的分子检测，而且有可能实时监测反应途径和追踪大分子在执行生理功能时的结构变化，因此有望发现其他常规实验中难以发现的实验现象。[/font][font=宋体]在单分子检测技术发展之前，大多数的分子实验是探测分子的综合平均效应（[/font][font='Times New Roman',serif]Ensemble Averages[/font][font=宋体]），即探测大量由一种（或多种）对象组成的一个整体所表现出的平均响应和平均值[/font][font='Times New Roman',serif][1][/font][font=宋体]。这一平均效应掩盖了许多特殊的信息，尤其是生物学里很多小概率事件的发生。相比之下，单分子检测可以逐个地对体系中的单个分子进行研究，通过时间相关的方法，得到某一分子特性的分布状况。[/font][font=宋体]这对于了解机体细胞的物理、化学性质及其参与细胞正常功能的机制是十分必要的。它快速、卓越的进展无疑将影响许多科学领域，为医学、生物学、化学、物理[/font][font=宋体]学和纳米材料等领域提供新的检测手段，目前已成为当今科学研究的热点之一。[/font][font=宋体]在过去的几十年里，科研人员开发和设计了各种技术和实验来检测单个分子。例如上个世纪五十年代使用透射电镜拍摄了[/font][font='Times New Roman',serif]DNA[/font][font=宋体]和蛋白质等单分子的第一张图像；六十年代，有学者开展了间接检测水溶性生物分子的荧光研究，获得了含有高浓度底物的低浓度酶的液滴中存在的分子数量；七十年代，膜片钳被用于研究单分子，此后被广泛应用于离子通道蛋白的研究；八十年代，利用可扩散的多重荧光标记技术检测了单脂质分子；九十年代，应用宽场单荧光成像技术对单荧光团分子进行检测和成像，并且利用单分子荧光定位技术获得了大约[/font][font='Times New Roman',serif]30nm[/font][font=宋体]的分辨率；进入二十一世纪，研究人员开始在单分子水平上只使用一种荧光染料标签，对活细胞进行直接成像，并通过荧光显微镜进行观察[/font][font='Times New Roman',serif][2][/font][font=宋体]。[/font] [font=宋体]单分子荧光检测技术是实现单分子检测的手段之一，它利用单个荧光分子的荧光发射特性，对其进行精细控制和观测。[/font][font=宋体]本文拟通过对单分子荧光检测技术，包括荧光相关光谱[/font][font='Times New Roman',serif]/[/font][font=宋体]荧光互相关光谱（[/font][font='Times New Roman',serif]Fluorescence Correlation Spectroscopy/ Fluorescence Cross-CorrelationSpectroscopy, FCS/FCCS[/font][font=宋体]）及荧光寿命成像（[/font][font='Times New Roman',serif]Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy, FLIM[/font][font=宋体]）技术的特征、原理及这些技术在生命科学领域的应用等方面进行阐述，以其为相关科研技术人员提供参考。[/font][b][font='Times New Roman',serif]2 [/font][font=宋体]单分子荧光检测技术概述[/font][/b][font='Times New Roman',serif]2.1[/font][font=宋体]荧光发射原理[/font][font='Times New Roman',serif][3][/font][font=宋体]荧光作为一种发射光，它的产生涉及对光子的吸收和再发射两个过程。简单的说，荧光产生有四个步骤（图[/font][font='Times New Roman',serif]1[/font][font=宋体]）：[/font][align=center][img=,337,387]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310241358038590_3596_3237657_3.png!w337x387.jpg[/img][/align][align=center][font=宋体]图[/font]1 [font=宋体]荧光发射循环示意图[/font][/align][font='Times New Roman',serif]（1）[/font][font=宋体]电子吸收入射光子后由基态向激发态跃迁，其跃迁速率在一定范围内与激光功率成正比；[/font][font='Times New Roman',serif]（2）[/font][font=宋体]电子跃迁到不同电子能级或同一电子能级的不同振动能级上，经内转换和振动弛豫降落到最低激发单重态的最低振动能级上，这一过程需[/font][font='Times New Roman',serif]1x10[sup]-11[/sup]~1x10[sup]-13[/sup]s[/font][font=宋体]；[/font][font='Times New Roman',serif]（3）[/font][font=宋体]电子由激发态经发射光量子跃迁到基态的不同振动能级上，这一过程称为荧光发射；[/font][font='Times New Roman',serif]（4）[/font][font=宋体]电子基态的内弛豫。[/font][font=宋体]物质发射荧光的能力用荧光量子产率来衡量。[/font][font='Times New Roman',serif]2.2 [/font][font=宋体]单分子荧光检测的基本要求[/font][font=宋体]对单分子荧光的检测必须满足两个基本要求[/font][font='Times New Roman',serif][1][/font][font=宋体]：[/font][font='Times New Roman',serif]（1）[/font][font=宋体]在被照射的体积中只有一个分子与激光发生相互作用。这一点可以很方便地通过调整研究体系的浓度（密度）来达到；[/font][font='Times New Roman',serif]（2）[/font][font=宋体]确保单分子的信号大于背景干扰信号（[/font][font='Times New Roman',serif]background signal[/font][font=宋体]），其中关键的问题是要有效减少拉曼散射、瑞利散射及其杂质荧光所造成的干扰。[/font][font=宋体]因此，要获得理想的信噪比，需要将激发体积最小化。因显微镜物镜的焦点最小体积约[/font][font='Times New Roman',serif]1μm[sup]3[/sup][/font][font=宋体]，故激光扫描共聚焦显微镜（[/font][font='Times New Roman',serif]laser scanning confocalmicroscopy, LSCM)[/font][font=宋体]是探测单分子荧光的主要方法之一。[/font][b][font='Times New Roman',serif]3 [/font][font=宋体]单分子荧光检测技术在生命科学中的应用[/font][/b][font='Times New Roman',serif]3.1 [/font][font=宋体]荧光相关光谱[/font][font='Times New Roman',serif]/[/font][font=宋体]荧光互相关光谱（[/font][font='Times New Roman',serif]FCS/FCCS[/font][font=宋体]）技术[/font][font='Times New Roman',serif][4-7][/font][font='Times New Roman',serif]FCS[/font][font=宋体]和[/font][font='Times New Roman',serif]FCCS[/font][font=宋体]都是在涨落光谱技术的基础上衍生而来的，通过检测某一微小区域内荧光信号的瞬时涨落变化，分析分子的密度、扩散以及分子之间的相互作用，是一种新兴的单分子检测技术。由于[/font][font='Times New Roman',serif]FCS/FCCS[/font][font=宋体]的高灵敏性可以用来检测生物系统中发生的小概率时间，因此此技术主要用于分子之间相互作用、活细胞分析、核酸分析、蛋白质的寡聚化、蛋白质的动力学研究以及纳米制剂粒径测量等研究，在检测物质浓度、扩散速度、分子结合速率等方面体现出巨大的优越性，亦可用于肿瘤的早期诊断以及高通量药物筛选等。[/font][font='Times New Roman',serif]FCS[/font][font=宋体]技术，即在[/font][font='Times New Roman',serif]CLSM[/font][font=宋体]焦点的微小测量区域内，通过对荧光强度随时间变化的自发性波动分析和其时间函数自相关的分析，并通过计算机统计与拟合运算，在活细胞内单分子水平给出分子的扩散系数、分子数目、分子浓度及分子之间结合与分离状态等动力学参数的检测方法。其实质是监测带有荧光基团的物质在激光作用体积内的扩散情况，可揭示异质群体中的每个个体，并对各自的亚群进行鉴定、分类、定量比较，亦可对复杂的生化反应提供详细、确定的动力学参数。例如，张强课题组就通过[/font][font='Times New Roman',serif]FCS[/font][font=宋体]技术测定了负电蛋白与不同电荷的纳米颗粒结合情况不同，导致扩散系数呈显著性差异，从而判断出纳米颗粒与血浆中蛋白结合情况[/font][font='Times New Roman',serif][8][/font][font=宋体]。而薛采宁等人也使用[/font][font='Times New Roman',serif]FCS[/font][font=宋体]技术实现了无标记小分子药物筛选[/font][font='Times New Roman',serif][9][/font][font=宋体]：[/font][font='Times New Roman',serif]FCS[/font][font=宋体]可以根据荧光标记的蛋白分子的特征扩散时间的变化来区分蛋白质的聚集程度，定量评价蛋白质与药物的相互作用，如荧光标记蛋白聚集体的特征扩散时间越短，蛋白质与药物之间的相互作用越强。[/font][font=宋体]发明[/font][font='Times New Roman',serif]FCS[/font][font=宋体]的最初目的是在生物系统中研究非常稀的样本浓度的化学动力学特征。随着探测手段、自相关电子学等方面的技术进步，[/font][font='Times New Roman',serif]FCS[/font][font=宋体]在生物化学中的研究和应用越来越广泛，如经典的细胞膜中脂质扩散研究就是通过[/font][font='Times New Roman',serif]CLSM[/font][font=宋体]整合了[/font][font='Times New Roman',serif]FCS[/font][font=宋体]技术后所取得的巨大进展。[/font][font='Times New Roman',serif]FCCS[/font][font=宋体]技术，确切来说是[/font][font='Times New Roman',serif]FCS[/font][font=宋体]技术的一种延伸应用。其既保持了[/font][font='Times New Roman',serif]FCS[/font][font=宋体]技术的灵敏性，又可以解决[/font][font='Times New Roman',serif]FCS[/font][font=宋体]对两种粒子的扩散速度要有明显不同的要求（至少相差[/font][font='Times New Roman',serif]2[/font][font=宋体]倍，即二者质量差相差[/font][font='Times New Roman',serif]8[/font][font=宋体]倍）。该技术在实验中通常将两种粒子用不同的荧光进行标记，荧光分子被激发后，产生两种互不干扰的荧光信号，分别被两个独立的检测器探测，然后将探测到的信息进行交叉函数分析。如果分子间存在相互作用，那么两种不同的荧光信号将同时经过检测通道，这时两个检测器就会产生同步的信号波动，从而产生互相关信号；而当单色荧光分子独立在微区域内运动时，则不会产生互相关信号。这样，相互作用的荧光分子和独立运动的荧光分子就被区分开来。由于[/font][font='Times New Roman',serif]FCCS[/font][font=宋体]技术直接反映分子间的相互作用，而不像[/font][font='Times New Roman',serif]FRET[/font][font=宋体]技术那样受分子扩散或聚集的影响，因此在生物分子互作、蛋白寡聚化、酶活性研究领域中有重要的应用前景。[/font][font='Times New Roman',serif]3.2 [/font][font=宋体]荧光寿命成像（[/font][font='Times New Roman',serif]FLIM[/font][font=宋体]）技术[/font][font='Times New Roman',serif]FLIM[/font][font=宋体]技术是研究细胞内生命活动状态的一种非常可靠的方法。荧光寿命是指分子受到光脉冲激发后返回基态之前在激发态的平均停留时间，是荧光团的固有性质（表[/font][font='Times New Roman',serif]1[/font][font=宋体]），取决于荧光分子所处的微环境，因此其不受探针浓度、激发光强度和光漂白效应等因素影响，且能区分荧光光谱非常接近的不同荧光团，故具有非常好的特异性和很高的灵敏度。此外，由于荧光分子的荧光寿命能十分灵敏地反映激发态分子与周围微环境的相互作用及能量转移，因此[/font][font='Times New Roman',serif]FLIM[/font][font=宋体]技术可提供细胞自身荧光寿命信息，亦可被用来实现对微环境中许多生化参数的定量测量，如细胞中折射率、黏度、温度、[/font][font='Times New Roman',serif]pH[/font][font=宋体]值的分布和动力学变化、局部氧气浓度测量、活细胞内钙浓度测量等，这在生物医学研究中具有非常重要的意义。目前[/font][font='Times New Roman',serif]FLIM[/font][font=宋体]技术在细胞生物学中一些重要科学问题的研究、临床医学上一些重大疾病的诊断与治疗研究以及纳米材料的生物医学应用研究等方面均有广泛应用，并取得了许多利用传统的研究手段无法获取的数据。如[/font][font='Times New Roman',serif]Melissa C Skala[/font][font=宋体]等人[/font][font='Times New Roman',serif][10][/font][font=宋体]及李慧等人[/font][font='Times New Roman',serif][11][/font][font=宋体]均报道了通过[/font][font='Times New Roman',serif]FLIM[/font][font=宋体]手段无标记测量肿瘤细胞或组织内[/font][font='Times New Roman',serif]NADH, FAD[/font][font=宋体]和其他内源性光学生物标志物的荧光特性，来实现对正常细胞或组织与肿瘤细胞或组织之间代谢途径差异的检测。[/font][align=center][font=宋体]表[/font][font='Times New Roman',serif]1 [/font][font=宋体]荧光寿命特性[/font][/align] [table][tr][td] [align=center][font=宋体][color=black]取决于[/color][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][color=black]不依赖于[/color][/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [font=宋体][color=black]染料浓度[/color][/font] [/td][td] [font=宋体][color=black]染料固有特性（如异构化、质子化、蛋白质折叠等）[/color][/font] [/td][/tr][tr][td] [font=宋体][color=black]光漂白[/color][/font] [/td][td] [font=宋体][color=black]微环境（如[/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black]pH[/color][/font][font=宋体][color=black]、离子浓度、环境氧浓度、温度等）[/color][/font] [/td][/tr][tr][td] [font=宋体][color=black]样品厚度[/color][/font] [/td][td] [font=宋体][color=black]分子结合[/color][/font] [/td][/tr][tr][td] [font=宋体][color=black]激发光强度[/color][/font] [/td][td] [font='Times New Roman',serif][color=black] [/color][/font] [/td][/tr][tr][td] [font=宋体][color=black]光源噪声[/color][/font] [/td][td] [font='Times New Roman',serif][color=black] [/color][/font] [/td][/tr][/table][font='Times New Roman',serif]3.3 [/font][font=宋体]荧光寿命成像[/font][font='Times New Roman',serif]-[/font][font=宋体]荧光共振能量转移[/font][font='Times New Roman',serif](Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy- Fluorescence Resonance EnergyTransfer, FLIM-FRET[/font][font=宋体]）[/font][font='Times New Roman',serif][12][/font][font=宋体]荧光共振能量转移[/font][font='Times New Roman',serif](Fluorescence Resonance Energy Transfer, FRET) [13][/font][font=宋体]是指两个荧光基团间能量通过偶极[/font][font='Times New Roman',serif]-[/font][font=宋体]偶极耦合作用以非辐射方式从供体传递给受体的现象。目前[/font][font='Times New Roman',serif]FRET[/font][font=宋体]技术可广泛用于单个固定细胞、亚细胞或活细胞原位生理环境下检测生物大分子的构象变化和分子间的直接相互作用，如检测配体[/font][font='Times New Roman',serif]-[/font][font=宋体]受体、蛋白分子共定位、转录机制、蛋白折叠以及蛋白质二聚化等，亦可用于检测酶活性变化、细胞凋亡以及膜蛋白的研究等[/font][font='Times New Roman',serif][12][/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]在[/font][font='Times New Roman',serif]FRET[/font][font=宋体]体系中，常用的荧光能量供体、受体对主要有：[/font][font='Times New Roman',serif]CFP/YFP[/font][font=宋体]、[/font][font='Times New Roman',serif]BFP/RFP[/font][font=宋体]、[/font][font='Times New Roman',serif]CY3/CY5[/font][font=宋体]等。进行[/font][font='Times New Roman',serif]FRET[/font][font=宋体]实验时，需要满足以下几个条件：[/font][font='Times New Roman',serif]① [/font][font=宋体]所检测样品包含两个荧光分子，能量的提供者叫做供体，能量的接受者叫做受体；[/font][font='Times New Roman',serif]② [/font][font=宋体]供体与受体的距离在[/font][font='Times New Roman',serif]10nm[/font][font=宋体]之间；[/font][font='Times New Roman',serif]③ [/font][font=宋体]供体的发射波长与受体的激发波长一致。当供体的激发波长照射样品时，若没有[/font][font='Times New Roman',serif]FRET[/font][font=宋体]效应产生，只会检测到供体的发射光；反之，如果有[/font][font='Times New Roman',serif]FRET[/font][font=宋体]效应发生，则[/font][font='Times New Roman',serif]CLSM[/font][font=宋体]可检出供体发射的荧光减弱，而受体的发射光增强。[/font][font='Times New Roman',serif]FRET[/font][font=宋体]本身不是一种成像技术，而是一个物理过程。传统的[/font][font='Times New Roman',serif]FRET[/font][font=宋体]过程分析通常是基于荧光强度成像来实现，分析的结果容易受光谱串扰的影响。而将[/font][font='Times New Roman',serif]FLIM[/font][font=宋体]技术应用于[/font][font='Times New Roman',serif]FRET[/font][font=宋体]过程分析，利用了[/font][font='Times New Roman',serif]FLIM[/font][font=宋体]技术可定量测量这一优势，可非常灵敏地反映供体荧光分子与受体荧光分子之间的能量转移过程，目前被认为是测量[/font][font='Times New Roman',serif]FRET[/font][font=宋体]效果的金标准。[/font][font=宋体]当受体分子与供体之间的距离[/font][font='Times New Roman',serif]10nm[/font][font=宋体]时，供体的能量转移到受体，受体从基态发生能量跃迁，从而影响供体的荧光寿命。与没有受体分子的时候相比，发生[/font][font='Times New Roman',serif]FRET[/font][font=宋体]的供体分子的荧光寿命降低。因此，[/font][font='Times New Roman',serif]FLIM-FRET[/font][font=宋体]联合能够实时监测生物细胞中蛋白质的动态变化，如蛋白质折叠、分子间（蛋白[/font][font='Times New Roman',serif]-[/font][font=宋体]蛋白，蛋白[/font][font='Times New Roman',serif]-[/font][font=宋体]核酸）相互作用和细胞间信号分子传递、分子运输以及病理学研究等。[/font][b][font='Times New Roman',serif]4 [/font][font=宋体]结论和展望[/font][/b][font=宋体]近年来，研究人员应用了多种技术来检测单分子，如从传统的技术到最近发展的生物传感技术。而荧光检测越来越受欢迎，并且在等离子体共振、全内反射荧光、多光子激发荧光显微镜和近年来发展起来的生物传感技术等改进形式中仍然受到关注。随着近场扫描显微镜、光激活定位显微镜、受激发射损耗显微术或超分辨率荧光显微镜等先进显微技术的发展，单分子的超分辨率成像亦成为可能。此外，随着纳米生物技术的发展，几种先进的纳米技术也对单分子检测在更大程度上发挥着指导作用。[/font][font=宋体]总之单分子检测特有的[/font][font=宋体]高灵敏度、高空间分辨率、高时间分辨率、高信号质量等特点[/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]经过近几十年的发展，在[/font][font=宋体]生物学、医学及药学等生命科学领域已经成为不可或缺的科研工具。[/font][font='Times New Roman',serif] [/font][b][font=宋体]参考文献[/font][/b][font='Times New Roman',serif]1. [/font][font=宋体]周拥军[/font][font='Times New Roman',serif], [/font][font=宋体]陈德强[/font][font='Times New Roman',serif], [/font][font=宋体]夏安东[/font][font='Times New Roman',serif], [/font][font=宋体]黄文浩[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]单分子的荧光特性及其在生物学上的应用[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]物理[/font][font='Times New Roman',serif], 2000, 29(11): 657-661[/font][font='Times New Roman',serif]2. [/font][font='Times New Roman',serif]NidhiChauhan, Kirti Saxena, Utkarsh Jain. Single molecule detection from microscopyto sensors. 2022. doi: https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2022.04.038[/font][font='Times New Roman',serif]3. [/font][font=宋体]盖宏伟[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]单分子荧光成像检测及其应用研究[/font][font='Times New Roman',serif][D]. [/font][font=宋体]大连[/font][font='Times New Roman',serif]: [/font][font=宋体]中国科学院大连化学物理研究所[/font][font='Times New Roman',serif], 2005, 2-3[/font][font='Times New Roman',serif]4. [/font][font=宋体]曲绍峰[/font][font='Times New Roman',serif], [/font][font=宋体]林金星[/font][font='Times New Roman',serif], [/font][font=宋体]李晓娟[/font][font='Times New Roman',serif]. FCS/FCCS[/font][font=宋体]技术及其在植物细胞生物学中的应用[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]电子显微学报[/font][font='Times New Roman',serif], 2014, 33(5): 461-468[/font][font='Times New Roman',serif]5. [/font][font=宋体]张普敦[/font][font='Times New Roman',serif], [/font][font=宋体]任吉存[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]荧光相关光谱及其在单分子检测中的应用进展[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]分析化学[/font][font='Times New Roman',serif], 2005, 33(6): 875-880[/font][font='Times New Roman',serif]6. [/font][font=宋体]黄茹[/font][font='Times New Roman',serif], [/font][font=宋体]周小明[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]荧光相关光谱在生物化学领域中的应用[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]激光生物学报[/font][font='Times New Roman',serif], 2013, 22(4): 289-293[/font][font='Times New Roman',serif]7. [/font][font=宋体]游俊[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]荧光相关光谱（[/font][font='Times New Roman',serif]FCS[/font][font=宋体]）在生物活细胞中的应用[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]湖北大学学报[/font][font='Times New Roman',serif]([/font][font=宋体]自然科学版[/font][font='Times New Roman',serif]), 2005, 27(1): 53-56[/font][font='Times New Roman',serif]8. [/font][font='Times New Roman',serif]ZibinZhang, Junji Ren, Wenbing Dai, etc. Fast and Dynamic Mapping of the ProteinCorona on Nanoparticles Surfaces by Photocatalytic Proximity Labeling. Advancedmaterials, 2023, 35: 2206636[/font][font='Times New Roman',serif]9. [/font][font='Times New Roman',serif]CainingXue, Wenxin Yu, Haohan Song, etc. A study of protein-drug interaction based onsolvent-induced protein aggregation by fluorescence correlation spectroscopy.Analyst, 2022, 147: 1357[/font][font='Times New Roman',serif]10. [/font][font='Times New Roman',serif]MelissaC Skala, Kristin M Riching, Annette Gendron-Fitzpatrick, etc. In vivomultiphoton microscopy of NADH and FAD redox states, fluorescence lifetimes,and cellular morphology in precancerous epithelia. PNAS, 2007, 104(49): 19494-9[/font][font='Times New Roman',serif]11. [/font][font='Times New Roman',serif]Hui Li,Jia Yu, Rongli Zhang, etc. Two-photon excitation fluorescence lifetime imagingmicroscopy: A promising diagnostic tool for digestive tract tumors. Journal ofInnovative Optical Health Sciences, 2019, 12(5):1930009 1-16[/font][font='Times New Roman',serif]12. [/font][font=宋体]罗淋淋[/font][font='Times New Roman',serif], [/font][font=宋体]牛敬敬[/font][font='Times New Roman',serif], [/font][font=宋体]莫蓓莘[/font][font='Times New Roman',serif],[/font][font=宋体]等[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]荧光共振能量转移[/font][font='Times New Roman',serif]-[/font][font=宋体]荧光寿命显微成像（[/font][font='Times New Roman',serif]FRET-FLIM[/font][font=宋体]）技术在生命科学研究中的应用进展[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]光谱学与光谱分析[/font][font='Times New Roman',serif], 2021, 41(4): 1023-1031[/font][font='Times New Roman',serif]13. [/font][font=宋体]肖忠新[/font][font='Times New Roman',serif], [/font][font=宋体]张进禄[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]荧光共振能量转移技术在激光共聚焦显微镜中的应用[/font][font='Times New Roman',serif]. [/font][font=宋体]中国医学装备[/font][font='Times New Roman',serif], 2014,8(11): 73-75[/font]

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    价格： 300万 - 400万元
  • 分子荧光光谱仪FL820 400-860-5168转0185
    FL820荧光光谱仪是我公司新研发的分子荧光光谱分析仪器，可用于分子定性和定量分析。该仪器能够测试激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等参数，为实现高效、精确的荧光分析提供有力保障。此外，FL820荧光光谱仪兼容液态、粉末、薄膜等多种样品形态，便于在材料研究、药品分析、生化及临床检验、水质监测、食品安全检测等领域轻松实现定性定量分析需求。仪器特点：1. 能在规定时间内进行荧光强度扫描。2. 波长扫描可测重复扫描，并设定重复周期，时间在0-180分钟。3. 定发射波长，激发单色器在设置波长范围内扫描。4. 定激发波长，发射单色器在设置波长范围内扫描。5. 同步扫描：同时输入发射和激发波长，激发单色器和发射单色器同时在设定的波长范围及采样间隔下扫描。6. 时间扫描结束后可计算信噪比。7. 使用波长法进行定量，通过标准浓度的每个点来绘制多边形标准曲线。8. 可通过手动输入已知标准数据从而绘制标准曲线。9. 测量数据和标准曲线可同时显示在屏幕窗口上，获得标准曲线同时可执行样品测量并计算浓度。10. 在准备好标准曲线的情况下，能执行单波长，双波长，三波长的计算。11. 可设置数据采集的间隔波长。12. 三维图谱，激发，发射的二维图谱能同时显示并跟踪波长及峰值。13. 可打印平面视图或立体试图。
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    厂商： 天津市拓普仪器有限公司（天津市光学仪器厂）
    品牌： 拓普/TP
    型号： FL820
    价格： 面议
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    真核基因表达调控研究常用的方法是进行报告基因的检测，生物发光法又是报告基因检测最常用的有效手段。萤光素酶能催化底物萤光素的转化，并发射出光子。该产品为萤火虫萤光素酶报告基因在哺乳动物细胞中的表达提供快速、灵敏、稳定的检测方法。能够检测最低10-20 mol的萤光素酶，在10-14至10-20mol的酶浓度范围内呈很好的线性关系。Luciferase Assay Reagent采用优化的酶反应体系，产生的萤光半衰期超过15分钟。试剂容易配制，操作方便，适用于高通量萤火虫萤光素酶活性检测。订货信息：订货号产品名称RS-CL0102单萤光素酶报告基因检测试剂盒
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    荧光检测器是高压液相色谱仪常用的一种检测器。用紫外线照射色谱馏分，当试样组分具有荧光性能时，即可检出。适合于多环芳烃及各种荧光物质的痕量分析。也可用于检测不发荧光但经化学反应后可发荧光的物质。适用于食品工业、化妆品制造业、医疗单位卫生等监测。更高性能的光学系统和数字过滤器保证了更高的仪器信噪比，且测量波长范围更宽，提升了仪器的基本性能；通过双波长同时测量可提供两种波长的色谱图，也可通过光谱扫描获得激光光谱和荧光光谱；更换氙灯式无需光学校正调整，且可以监控氙灯的使用寿命；配备具有温控功能的流通池和自动波长检查功能。
    供应商： 青岛盛瀚色谱技术有限公司
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    ATP荧光快速检测拭子产品功能ATP荧光检测拭子检测管含有独特的高灵敏度液态稳定一体化试剂。拭子检测管检测物体表面上的细菌或其他微生物以及食物残留物中所含的总ATP活性，给出快速全面的洁净检测结果。保存及有效期：拭子需要放在冰箱里面冷藏温度在-4-0℃。尽量避免试剂反复冻融；短时间存放时，可以存放于4℃，注意避光，密封保存；有效期12个月。超过保质期的试剂请不要使用。注意事项： 1. 本试剂需与ATP荧光检测仪匹配使用。 2. ATP拭子中含有荧光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。为取得较好的使用效果，冻融的次数不宜超过3次，且需要避光保存。 3. 实验时应穿戴一次性手套进行操作，以免外源ATP污染。 4. 取样过程中不要触摸拭子或棉签，确保拭子第一时间直接与被测的物体表面接触。 5. 拭子中样品和溶液反应后，需放置在荧光仪中，并于60秒之内读数。 6. 标准操作的涂抹区域为100cm2。对于不规则的物表，最重要的是保证对每个控制点的每次检测都采用连续一致的方法。控制点应考虑不同物表的特殊结构不同而自行设立标准，如桌面光滑度、仪器接缝、凹陷区域、餐具是否有裂痕（容易藏污垢）等。 7. 本仪器检测的是低出肉眼分辨率的物体表面的洁净度。因此若被测的控制点有肉眼可见的污垢，或涂抹后拭子头部明显变黑，即可停止后续操作以免浪费拭子。 8. 若被待检物表面有多余液体存在，应等表面液体稍许干燥后再进行检测，以免稀释试剂。（无需特别干燥）
    供应商： 北京鼎蓝科技有限公司
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