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[font='calibri'][size=13px]抗体fc段和Fab段什么意思?抗体的功能有哪些?[/size][/font]抗体(antibody),是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原。Fab段:抗原结合片段(fragment of antigen binding,Fab),相当于抗体分子的两个臂,由一个完整的轻链和重链的VH和CH1结构域组成。Fc段:可结晶段(fragment crystallizable,Fc)相当于Ig的CH2和CH3结构域,是Ig与效应分子或者细胞相互作用的部位。由以上信息可以看出:Fab段包含完整的可变区,以及恒定区的CH1区域。Fc段仅指Ig恒定区CH2和CH3的区域,相当于Y字结构下面那一部分。抗体的功能有哪些?(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。(2)激活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。(7)通过与细胞Fc受体结合发挥多种生物效应。①调理作用 IgG、IgM的Fc段与吞噬细胞表面的FcγR、FcμR结合,增强其吞噬能力,通常将抗体促进吞噬细胞吞噬功能的作用称为抗体的调理作用 (opsonization)。②发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用。义翘神州在重组抗体表达方面具有丰富的经验,除了表达全长抗体外,还可以表达各种形式的抗体片段,如单链抗体 (scFv)、抗原结合片段(Fab)、纳米抗体 (VHH) 和抗体融合蛋白 (antibody-fusion proteins)等。基于优化的哺乳动物蛋白平台,义翘神州可在HEK293或CHO细胞中的表达和生产Fab抗体片段。 利用此技术生产的Fab片段较酶切全长抗体获得的Fab片段具有更好的质量。scFv可以在微生物系统如E. coli中表达, 也可以通过瞬转技术在哺乳动物细胞中表达。义翘神州具备在不同系统中表达不同抗体片段的能力,您可以根据实际需求进行选择。您只需将抗体片段的基因序列发送给我们,义翘神州负责完成从基因合成到最终纯化抗体片段的整个过程。更多抗体片段生产服务可以参看:https://cn.sinobiological.com/services/fab-scfv-antibody-production-service
[font=宋体]抗体亲和力成熟是抗体药物研发的重要环节,旨在提高抗体的特异性和效力,降低毒副作用,提高治疗效果。本文将介绍抗体亲和力成熟的方法、机制和意义。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]抗体亲和力成熟的方法有哪些[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]各自有什么优点:[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]随机突变:通过随机突变引入随机突变,在基因水平上对抗体进行改造,以获得亲和力更高的抗体。该方法的优点是能够快速获得亲和力较高的抗体,但需要大量的筛选工作。[/font][font=宋体][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]改组:通过[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]改组技术对抗体基因进行改造,以获得亲和力更高的抗体。该方法的优点是能够快速获得大量突变体,并且可以通过表面展示技术进行筛选,但需要掌握相应的技术。[/font][/font][font=宋体]抗体亲和力成熟质粒库的构建及筛选:通过构建抗体亲和力成熟质粒库,筛选出亲和力较高的抗体。该方法的优点是能够获得亲和力较高的抗体,但需要掌握相应的技术。[/font][font=宋体]噬菌体表面展示技术:将抗体基因与噬菌体表面展示技术结合,筛选出亲和力较高的抗体。该方法的优点是能够快速获得亲和力较高的抗体,且可以结合其他表面展示技术进行筛选。[/font][font=宋体][font=宋体]总之,抗体亲和力成熟的方法包括随机突变、[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]改组、抗体亲和力成熟质粒库的构建及筛选和噬菌体表面展示技术。这些方法各有优缺点,需要根据具体情况选择合适的方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体亲和力成熟的主要机制:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体亲和力成熟的主要机制是通过体内的亲和力成熟中心([/font][font=Calibri]germinal center[/font][font=宋体])发生。亲和力成熟中心是淋巴结和脾脏等淋巴器官中[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞活化和分化的特定区域。在亲和力成熟中心内,[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞经历多轮突变和选择,使其产生高亲和力的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]高亲和力的抗体是由[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞受体基因的突变引起的。突变是指[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞受体基因中特定区域的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]序列发生随机突变,这些突变导致了抗体亲和力的变化。突变是一个非常高效的过程,每个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞大约会经历一到两次突变。这样的高度选择性突变能够增加亲和力较高的抗体的产生概率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]选择是亲和力成熟过程中的关键步骤。选择性地扩增亲和力较高的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞是由[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞辅助完成的。在这个过程中,抗原与[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞表面的抗原受体结合,形成抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体复合物。这些复合物将被[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞辅助细胞识别,并提供刺激信号,使得亲和力较高的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞得到更多的刺激和扩增。通过这种选择性扩增的过程,亲和力较高的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞将占据免疫反应中的主导地位。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体亲和力成熟的意义:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①抗体亲和力成熟的意义在于提高抗体的特异性和效力,有助于减少用药剂量,降低毒副作用等。在抗体亲和力成熟的过程中,通过[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞受体基因的突变和选择性扩增,使得机体能够产生高亲和力的抗体,提高了抗体与抗原的结合能力和特异性识别能力。这有助于提高抗体的效价和减少交叉反应,使得抗体更具有针对性和有效性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②抗体亲和力成熟还有助于人们更好地理解抗体与靶点相互作用的机理,更好地认识靶点的功能。通过研究抗体亲和力成熟的过程和机制,可以进一步优化抗体药物的研发和质量改善,为临床治疗提供更安全、有效的治疗手段。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③抗体亲和力成熟在免疫应答和抗体药物研发中具有重要意义,有助于提高抗体的特异性和效力,减少用药剂量,降低毒副作用等,为临床治疗提供更安全、有效的治疗手段。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service]抗体亲和力成熟服务[/url],其优势:[/b][/font][font=宋体]①丰富的经验及多例成功案例[/font][font=宋体]②专业的抗体数据库分析系统[/font][font=宋体]③计算机建模结构模拟优化[/font][font=宋体]④随机突变、定点突变技术[/font][font=宋体]⑤快速、高通量哺乳动物细胞抗体表达与筛选技术平台[/font][font=宋体][font=宋体]⑥[/font][font=Calibri]OCTET Affinity, Kinetics, off-rate, ranking[/font][/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service[/font][/font]
[font='calibri'][size=13px]什么是中和抗体?如何检测[/size][/font][font='calibri'][size=13px]假病毒[/size][/font][font='calibri'][size=13px]中和抗体?[/size][/font]什么是中和抗体?中和抗体是一类与病毒结合并使病毒失去传染性的抗体。当病毒侵入人体时,浆细胞会产生病毒特异性抗体,但只有少数是中和抗体。中和机制如下:(1)改变病毒表面的构象;(2)与吸附相关的病毒表位结合,阻断其与宿主细胞受体的相互作用;(3)与病毒形成免疫复合物,易于被巨噬细胞清除;(4)当病毒表面抗原与中和抗体结合时会激活补体,从而导致病毒裂解。S蛋白(spike protein)是SARS-CoV-2病毒的主要包膜蛋白,由S1和S2亚基组成的三聚体跨膜糖蛋白,负责识别宿主细胞受体即血管紧张素转换酶2(ACE2)并介导膜融合。S1亚基上的受体结合域(RBD)直接参与宿主受体识别并介导病毒入侵。S蛋白上的受体结合结构域(RBD),被认为是病毒感染宿主细胞的关键位点和大多数中和抗体的靶标。中和抗体可阻止S1或RBD与ACE2结合,从而防止病毒侵入宿主细胞并最终阻止病毒感染(图1)。因此,S1或RBD的突变可能会导致SARS-CoV-2有较强的传染性。如何检测假病毒中和抗体?中和抗体检测试验包括病毒中和试验、假病毒中和试验和替代病毒中和试验。病毒中和试验中和抗体检测的金标准是病毒中和试验,主要包括空斑减少中和试验和微量中和试验。两种方法都使用定量的活病毒与不同稀释度的等量血清混合,并接种预先准备好的单层细胞。最后,根据空斑形成单位或细胞病变效应来评估中和抗体的效价。由于涉及到活病毒的操作,这些检测只能在生物安全三级实验室进行,极大地限制了空斑减少中和试验和微量中和试验的使用。假病毒中和试验目前,越来越多的实验室使用假病毒中和试验进行中和抗体检测。SARS-CoV-2假病毒以非致病性病毒(如复制缺陷型HIV-1)为载体,将载体病毒的包膜蛋白替换为SARS-CoV-2的S蛋白,并引入检测信号分子,例如GFP和荧光素酶。假病毒利用S蛋白的RBD结构域与ACE2结合,模拟病毒入侵的过程。中和抗体可有效抑制SARS-CoV-2假病毒感染宿主细胞(图2),并通过信号检测评估中和抗体效价。由于假病毒为一次性感染病毒,不具备自我复制能力,无生物安全危险,所以这种方法可以在生物安全二级实验室进行。替代病毒中和试验替代病毒中和试验是基于竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)的原理,利用重组RBD蛋白与重组ACE2蛋白的结合作用来模拟病毒-细胞相互作用。样品中的中和抗体可有效阻断RBD蛋白与ACE2蛋白的结合。与病毒和假病毒中和试验相比,替代病毒中和试验更安全、更容易执行且耗时更少。中和检测服务信息由北京义翘神州科技股份有限公司(Sino Biological Inc.)为您提供,如您想了解更多关于SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike假病毒中和检测服务报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。具体详情可点击:https://cn.sinobiological.com/services/pseudovirus-neutralization-assay-service