双栖小泡蛋白

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双栖小泡蛋白相关的耗材

  • 艾杰尔agela-Halo小分子蛋白、多肽专用分析柱
    小分子蛋白、多肽专用分析柱 蛋白和多肽类化合物由于特殊的化学结构和分子特性,常规的C18柱已不能满足其分离分析的要求,主要的原因是保留差,柱子易堵塞,重现性不好。 博纳艾杰尔针对此类药物水溶性强、分子量大、基质复杂等特点,特推出蛋白、多肽类分析专用柱Halo Peptide ES-C18柱,该柱采用反向色谱疏水作用模式,平均粒径2.7um,120Å 孔径,低比表面积150㎡/g,不仅对蛋白和多肽类药物有很强的保留能力,同时色谱柱耐污染性能也特别强,重现性好,是分离此类化合物的理想选择。 如需了解此色谱柱的适用情况或产品详情,欢迎来电400-0717-168咨询!
  • 白蛋白、IgG、IgA、转铁蛋白、触珠蛋 白、抗胰蛋白酶和纤维蛋白原去除色谱柱
    安捷伦蛋白质分级分离系统和蛋白质组学试剂 生物样品的LC/MS 分析 电泳分析的准备 生物标志物研究的样品制备 仪器和工作流程验证 经济实惠的免疫去除 样品脱盐、浓缩和分馏为了更方便地对生物样品(如血清、血浆和脑脊液(CSF))中的蛋白质进行分离和鉴定,安捷伦的多重亲和去除系统(MARS)用色谱方法去除生物样品中存在的干扰性高丰度蛋白。这些高丰度蛋白的去除,改善了后续对样品进行的液/质分析和电泳分析,有效地扩展了动态范围。针对样品的馏分和脱盐,安捷伦设计了mRP-C18 高回收率蛋白柱,可以用一个简单的步骤同时完成脱盐、浓缩和分馏,极高的样品回收率可以与常规RP HPLC 柱媲美,后者与LC/MS 分析完全兼容。另外,安捷伦还提供生物标志物研究中样品制备和其它蛋白质组学应用的验证试剂,包括复杂标准品和蛋白质组学级胰蛋白酶。为便于使用,这些试剂均与安捷伦LC/MS 方法完全兼容,无需任何额外的样品预处理。我们的定制配置还可以满足您的大体积进样需求和定制其他色谱柱规格。多重亲和去除系统用安捷伦的多重亲和去除系统可以对血清、血浆和其它体液中高价值的低丰度蛋白和生物标志物进行鉴定和表征。多重亲和去除系统能够可重现地、特异地去除人的生理体液中多达14 种高丰度蛋白,和小鼠生理体液中3 种高丰度蛋白。多重亲和去除系统可以使用各种液相柱规格和离心小柱。安捷伦多重亲和去除系统与安捷伦优化的缓冲液、方便的离心过滤膜和浓缩器结合在一起,形成了一个自动化的一体式蛋白去除解决方案,可以与大多数液相色谱仪(色谱柱)和台式离心机(离心小柱)兼容。用多重亲和去除系统净化的样品适用于下游的各种分析,如二维凝胶电泳、LC/MS 和其它分析技术。订货信息:
  • 鱼类小清蛋白(Parvalbumin)过敏原酶联免疫检测试剂盒
    1、产品介绍产品名称:PriboFast® 鱼类小清蛋白(Parvalbumin)过敏原酶联免疫检测试剂盒英文名称:PriboFast® Fish (Parvalbumin) ELISA Kit货号:EKT-F40规格:48T/96T 过敏原酶联免疫试剂盒采用双抗夹心ELISA法,可用于检测食品原料、辅料、成品的过敏原残留检测,及生产线、生产环境的检测。试剂盒产品重复性好,交叉率低、准确度高、种类齐全;可以最大程度的降低因误差发生的食品安全问题;操作过程简单,可提高实验室效率。pribolab助力企业过敏原风险监控,提供多种过敏原检测产品与样品检测服务。2、普瑞邦过敏原检测产品:过敏原试剂盒产品名称过敏原试纸条产品名称PriboFast® 花生(Peanut)过敏原酶联免疫检测试剂盒PriboFast® Peanut ELISA KitPriboStripTM杏仁(Almond)过敏原快速检测试纸条PriboStripTMAlmond Rapid Test StripPriboFast® 杏仁(Almond)过敏原酶联免疫检测试剂盒PriboFast® Almond ELISA KitPriboStripTM花生(Peanut)过敏原快速检测试纸条PriboStripTMPeanut Rapid Test StripPriboFast® 牛奶β-乳球蛋白(β-Lactoglobulin)过敏原酶联免疫检测试剂盒PriboFast® β-Lactoglobulin (Bovine milk) ELISA KitPriboStripTM麦麸(Gluten/Gliadin)过敏原快速检测试纸条PriboStripTMGluten/Gliadin Rapid Test StripPriboFast® 牛奶酪蛋白(Casein)过敏原酶联免疫检测试剂盒PriboFast® Casein (Bovine milk) ELISA KitPriboStripTM蛋(Egg)过敏原快速检测试纸条PriboStripTMEgg Rapid Test StripPriboFast® 甲壳类原肌球蛋白(Tropomyosin)过敏原酶联免疫检测试剂盒PriboFast® Crustaceans Tropomyosin ELISA KitPriboStripTM大豆(Soy)过敏原快速检测试纸条PriboStripTMSoy Rapid Test StripPriboFast® 鸡蛋(Egg)过敏原酶联免疫检测试剂盒PriboFast® Egg ELISA KitPriboStripTM牛奶酪蛋白(Casein)过敏原快速检测试纸条PriboStripTMCasein (Bovine milk) Rapid Test StripPriboFast® 鸡蛋蛋白(Ovomucoid-Egg White)过敏原酶联免疫检测试剂盒PriboFast® Egg White (Ovomucoid) ELISA KitPriboStripTM甲壳类(Crustaceans )过敏原快速检测试纸条PriboStripTMCrustaceans Rapid Test StripPriboFast® 芝麻(Sesame)过敏原酶联免疫检测试剂盒PriboFast® Sesame ELISA KitPriboStripTM鱼类(Fish)过敏原快速检测试纸条PriboStripTMFish Rapid Test StripPriboFast® 卵清蛋白(Ovalbumin)过敏原酶联免疫检测试剂盒PriboFast® Ovalbumin ELISA KitPriboStripTM芝麻(Sesame)过敏原快速检测试纸条PriboStripTM Sesame Rapid Test StripPriboFast® 巴西坚果(Brazil Nut)过敏原检测试剂盒 PriboFast® Brazil Nut ELISA KitPriboStripTM榛子(Hazelnut)过敏原快速检测试纸条PriboStripTM Hazelnut Rapid Test Strip 3、关于普瑞邦 普瑞邦(Pribolab)专注于食品检测产品的研发与应用,以认证认可的检测实验室为技术依托,先后建立四个专业性技术研发与产品应用平台,产品覆盖真菌毒素、蓝藻/海洋毒素、食品过敏原、转基因、酶法食品分析、维生素、违禁添加物等领域。尤其在生物毒素类标准品、稳定同位素内标(13C,15N)、免疫亲和柱、多功能净化柱、ELISA试剂盒/胶体金检测试纸及样品前处理仪器等产品在不同行业得到广泛应用和认可。 Pribolab始终以持续创新的态度,致力于食品安全每一天!

双栖小泡蛋白相关的仪器

  • 仪器特点1、紧凑的光学设计,便于现场携带2、抛弃式芯片卡,降低维护成本3、双通道流路设计,实验结果更准确4、搭配全套试剂耗材,一站式完成实验准备检测案例产品参数1.检测原理:纳米超表面等离子共振(MetaSPR)技术2.光学通道:2个光纤检测通道3.检测应用:动力学/亲和力表征、动力学/亲和力筛选、小分子相互作用分析、片段药物筛选、表位作图、免疫原性、浓度分析、不依赖标曲的浓度分析、热动力学、相似性以及样品回收质谱联用等。4.折光率:1.33-1.435.进样体积:5μL6.流速:5-600μL/min7.温度范围:室温8.数据显示:显示实时动力学结合曲线图、拟合结果图,动力学数据列表,表位鉴定图、柱状图等9.导出文件:EXCEL、TXT,JPG10.样本类型:可用于检测不同来源的样品(例如,含DMSO的缓冲液、纯化样本、血浆、血清、细胞上清、裂解液等),从小分子候选药物到高分子量蛋白、抗体(以及多肽、DNA、RNA、多糖、脂质、细胞和病毒)11.结合常数(ka):蛋白:10¹ -107M⁻ ¹ s⁻ ¹ 小分子:10³ -510⁷ M⁻ ¹ s⁻ ¹ 12.解离常数(kd):10⁻ ⁶ -10⁻ ¹ s⁻ ¹ 13.平衡解离常数(KD):pM-mM14.最低检测下限:150Da15.短期背景噪音:1RU/min(RMS)16.长期背景噪音:.2RU/min17.检测时间:每个循环5-15min18.仪器尺寸:350282217mm19.重量:5kg
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  • 酪蛋白酸钠厂家 酪蛋白酸钠生产厂家 酪蛋白酸钠作用用途 西安拉维亚生物科技有限公司为您提供 电话中文名称 酪蛋白酸钠 CAS NO. 9005-46-3 中文别名 酪朊酸钠 酪朊酸钠具有良好的乳化作用和稳定作用,它还能起增粘、粘结、发泡、稳泡等作用,也常用于蛋白质强化。因其为水溶性乳化剂,应用广泛。 白色至浅黄色片状体、颗粒或粉末, 1.可用于肉类及水产肉糜制品、冰淇淋、饼干、面包、面条等谷物制品。 2.在香肠中使用可使脂肪分布均匀,增强肉的粘结性。用于鱼糕可增强弹性。香肠中用量为0.2%一0.3%。 3.在冰淇淋中使用能使制品中气泡稳定,防止反砂和收缩。在面包中使用可起增强作用。 4.在面包、饼干、面类中用量为0.2%一0.5%。 5.在西式糕点、炸面圈、巧克力中用量为0.59%一5.0%;在奶油乳饮料中用量为0.2%一0.39%。 6.此外还可用于其他乳制品、蛋制品等。酪蛋白酸钠作用用途:根据我国《食品添加剂食用卫生标准》(GB2760-1996)中规定:酪蛋白酸钠可按生产需要适量用于各类食品。酪蛋白酸钠可用于午餐肉、灌肠等肉制品,可以增加肉的结着力和持水性,改进肉制品质量,可以提高肉的利用率,降低生产成本。用于冰淇淋、人造奶油、酸乳饮料等乳制品中,作为增稠剂、乳化剂和稳定剂,可进一步提高制品的质量。酪蛋白酸钠还可用作高蛋白谷类食品、老人用食品、婴儿食品、糖尿病患者用食品等特殊食品的营养强化剂 [3] 。肉食品酪朊酸钠在肉食品中的应用大致可分为3类: ① 肉糜类制品. 如多种肉肠。②碎肉制品, 如碎牛羊肉、汉堡包。③ 未经剁碎的肉制品, 如盐水火腿。具体应用时, 由于考虑在肉肠的生产、加工过程中肌肉蛋白质同样具有乳化特性,故添加酪朊酸钠的目的,主要是, 一方面节省用于乳化脂肪的肌肉蛋白质,使其进一步提高肉制品的感官和营养质量;另一方面则是增加利用动物的可食资源, 如脂肪、皮、腱等组织。操作技术上, 则既可在生产加工过程中直接添加,也可先将其与脂肪、水等预制成一定的乳化液再行添加。为扩大食物资源的利用, 降低生产成本和保证产品质量,多采用预制乳化液的方法, 而这又多用于肉糜类产品之中。酪朊酸钠乳化液的制备要制备好乳化液, 首先应根据所用酪朊酸钠的乳化、增稠性能来选定酪朊酸钠和脂肪(肥肉)、水的配比关系。可制成稳定的乳化液,并应用于低档肉肠的生产。猪皮的添加, 既扩大了肉肠中食物资源的利用。而且还增加了肥肉的利用, 却又降低了产品中脂肪的相对含量。此外, 由于猪皮中胶原蛋白的作用,可增强乳化液的乳化、增稠特性,使产品符合一定的感官要求。至于配方中脂肪,既可用猪脂, 也可用牛、羊脂及禽类脂肪。将lkg酪朊酸钠、10kg肥肉、5kg猪皮、4kg鸡皮和14kg水进行乳化, 最后加lkg食盐。一共制成35kg乳化液。仍很稳定, 并应用于肉食品生产。乳化液在肉糜类制品中的应用上述乳化液主要应用于罐头午餐肉和肉肠等乳糜类产品的制作,它们均可在其原生产工艺的基础上将预制乳化液按一定比例(如占原料肉的5%~ 20%)在对原料肉进行斩拌时添加, 由于所用乳化液配方和乳化液所占原料肉比例的不同,以及其它工艺配方等的差别, 可分别制成高、中、低档不同的产品。通常, 乳化液中肥肉和水的比例较高,且乳化液所占原料肉的比例也较高时,则产品的档次较低。值得注意的是,即使对低档产品而言,上述乳化液中脂肪和水的比例也不宜过高,乳化液所占原料肉的比例亦不宜过大,尤其还应按季节的不同有适当调整, 如夏季天热,上述比例均应有所降低,否则产品弹性不够, 口感差, 且易渗油。至于制品因添加大量脂肪、猪皮和水后,对其色泽、风味等的影响,则应适当添加一定的着色剂和香精等使之完善。酪朊酸钠胶冻的制备酪朊酸钠胶冻实际上是酪朊酸钠的浓缩液,即将酪朊酸钠充分溶于水所得胶状物。制备时它不发生乳化作用, 因而不同于乳化液的制备, 只有当该胶冻与肉混合时才会有肉类脂肪在胶冻中的乳化。这同样应有一定的设备,以便将酪朊酸钠和水充分搅拌制成胶冻。具体操作可将酪朊酸钠和等量的碎冰同时放入搅拌机中,使之湿润,防止结块,然后加入其余待加的水。至于水量则视需要而定。通常酪朊酸钠与水一起斩拌几分钟,便可形成均匀的粘稠物。在胶冻的制作中也可使用一定量的猪皮。这可先将其斩碎,然后加入酪朊酸钠, 再加热水斩至成白色均匀的粘稠物。最后添加总量1.5%~ 2.0% 的食盐。关于酪朊酸钠与猪皮的用量,可按需要并与用水量相结合。酪朊酸钠胶冻主要用于脂肪比例较少的碎肉制品。酪朊酸钠在烹煮火腿中的应用酪朊酸钠也可应用于未经剁碎的肉制品,如盐水火腿等, 由于猪后腿肉价格较高, 人们为了一定的感官要求和更加经济起见, 往往向肉中注入一定比例的含某些添加剂的盐水, 这通常除含有硝酸盐、亚硝酸盐、磷酸盐和食盐等之外,还可有一定量非肉蛋白质。它除可满足对增量火腿所含蛋白质的质量规格外, 还可避免制品充满水等的不良外观。在制作盐水火腿时常加入一定量的植物蛋白(大豆分离蛋白), 若改用酪朊酸钠, 除其本身所具有酪蛋白同样的营养价值外,尚可有更好的乳化作用。酪朊酸钠常用于焙烤食品,这除了利用其良好的乳化性、提高产品质量、延长货架期以外,营养的角度考虑,由于酪朊酸钠富含赖氨酸,以大大补允谷物蛋白质中赖氨酸的不足,从而提高焙烤制品的营养价值。具体应用时为了获得更好的效果,生产上常将酪朊酸钠与某些其它乳化剂并用,或进一步组成特定的配方予以应用。乳制品酪朊酸钠本身即可认为足一种乳制品,将其应用于其它乳品,可进一步提高其它制品的质量。冰淇淋柔软、细腻的口感和良好的膨胀率对优质冰淇淋十分重要。在生产时,为了改善冰淇淋的口感和质构、避免乳固体含量低而造成粗糙和不稳定等,通常需要加入奶粉、炼乳等以增加蛋白质含量。但这些物质中的蛋白质含量并不够高,而乳糖含量却又偏高(如奶粉的蛋白质含量约28%,乳糖约36%)。若添加较多,由于乳糖的溶解度不高可使混合物料凝冻搅拌后在成品贮藏时产生结晶。造成冰淇淋质地粗糙,甚至有砂质感,如适当添加酪朊酸钠,则可因其蛋白质含量高(约90%)、起泡性又好,有助于改善冰淇淋的组织结构、提高损打起泡性和膨胀率,再通过酪朊酸钠本身的乳化作用及与其它乳化剂并用的增效作用,可大大提高产品质量。值得注意的是,在冰淇淋的生产中不能用酪朊酸钠全部取代奶粉和炼乳。这是因为单用酪朊酸钠制成的乳化液稳定性不够好,从而影响奶油在冰冻过程中的稳定性。通常以添加量0.5%~ 1%的效果较好,最好能与其它乳化剂适当配合使用。乳固体饮料在乳固体饮料生产时通常易出现蛋白质含量低于国家标准8% (一般多为6—7%)和产品比体积小等问题。若多加奶粉、炼乳亦不理想,此时如适当添加酪朊酸钠,可使问题得到较好解决。酸奶生产酸奶时除应有一定的蛋白质含量外,还需有一定的胶凝性。适当添加酪朊酸钠,可增加其胶凝能力和提高硬度,使之口感更好,从而提高产品质量。此外,酪朊酸钠还可应用于羹和汤料、快餐、卤汁,可增加粘稠性,改善口感;用于饮料尤其是植物蛋白饮料,防止脂肪析出,提高稳定性以及饮料和果酒的澄清等。可食薄膜应用在当前大力发展方便、快餐食品的同时,如何防止用塑料制品包装对环境的污染是人们颇为关注的问题。可食薄膜的研制即由此应运而生。良好的可食薄膜应能有效地控制水汽、氧、二氧化碳、脂质等在食品体系中的转移,止风味化合物的挥发损失等。现有一种发明涉及一种乳清分离蛋白-酪朊酸钠复合可食性膜及其制备方法。该可食性膜是在添加增塑剂的情况下将乳清分离蛋白溶液和酪朊酸钠溶液混合而制成的,其中,乳清分离蛋白溶液和酪朊酸钠溶液的重量比为1:1。所述乳清分离蛋白溶液和酪朊酸钠溶液的重量百分比浓度均为2%-7%,增塑剂重量与乳清分离蛋白和酪朊酸钠重量之和的百分比为30%-55%。 [5]
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  • Olink 超微量高灵敏靶向蛋白组分析仪一、仪器主要用途Signature Q100可以直接对不同基质(包括血浆、血清、脑脊液、泪液、肺泡灌洗液、尿液、外泌体裂解液和细胞提取物等)中多种低丰度蛋白分子进行超高灵敏度检测。仅需要1ul上样量即可同时检测92种蛋白因子,一个样品中可检测多达上千种蛋白,灵敏度可以达到fg/ml的水平,动态范围可以达到10个log值。这些功能蛋白涉及炎症、免疫应答、心血管、肿瘤、神经、代谢、器官损伤、发育和细胞调节等相关功能蛋白。Olink技术认可度高,人类血浆蛋白组官网推荐,美国癌症登月计划临床检测技术官方推荐,UKB和deCODE大量用于人群队列研究,近几年发表文献超过1000篇,其中包括高分杂志LANCET、NEJM、Cell、Nature、Science等,涉及心血管、神经、肿瘤、感染性疾病、免疫炎症、内分泌、生殖、眼科、精神类等各种疾病研究领域的应用。该仪器型号Signature Q100,产地瑞典,品牌Olink Proteomics,代理商是斑马鱼(北京)科技有限公司。二、检测原理Signature Q100超微量高灵敏靶向蛋白组分析仪采用PEA(Proximity Extension Assay,邻位延伸技术)的专利技术,这是一种靶向蛋白检测方法,它结合了基于双抗体夹心的免疫分析和“DNA 条形码”技术,它的原理非常巧妙(如下图所示):首先针对目标蛋白设计一对抗体,让每种抗体上连接互补的独特的DNA寡核苷酸探针;这对抗体特异性地与目标蛋白结合后,抗体对上的DNA寡核苷酸链杂交,创建一个双链DNA"条形码",该条形码对于靶蛋白来说是唯一的,并且在数量上与靶蛋白的初始浓度成正比。杂交和延伸后立即进行PCR扩增信号放大,最后再通过SignatureQ100微流控技术进行检测。通过这一过程,蛋白浓度信号会转换成核酸信号,从而实现不同丰度蛋白的检测。 三、实验流程(以血浆检测为例):1、免疫孵育:将1ul血浆加入反应溶液中,再加入92对偶联寡核苷酸链的抗体,在4 ℃进行免疫孵育反应;2、延伸及预扩增:结合在同一蛋白上邻近的一对抗体的寡核苷酸单链会形成互补配对,并在DNA聚合酶等的作用下延伸成一条完整“DNA”条形码,并进行PCR扩增;3、信号检测:将扩增后的样品加入到Signature Q100设备的微流控芯片中,机器自动进行Loading、定量检测以及信号读取。 四、Signature Q100性能优势:1、超高灵敏度:目标蛋白检测灵敏度(低至fg/ml水平),可以在组学水平上检测疾病相关的成百上千种低丰度蛋白(尤其是血浆、血清、房水、脑脊液、胸水、尿液等各种体液样本中的低丰度蛋白);2、样本微量:仅需要1ul上样量可同时检测多达92种非常低浓度的蛋白因子,可检测微量样品,节约珍贵样本;3、多重能力:一个样品中可检测多达上千种功能蛋白,达到组学研究水平;4、宽动态范围:检测范围横跨10个log值,可以同时兼顾不同丰度的蛋白;5、高重复性:引入成熟“DNA”条形码技术及定量作为检测手段,重复性非常好,数据质量高重现性好,适合疾病研究、多组学联合应用以及大队列大数据分析要求。质控设计和充分验证,所有数据具备组学水平最高6、高特异性:基于PEA专利技术的独特性,克服了多重免疫检测中公认存在的抗体交叉反应及信号串扰问题(如下图A所示),而PEA是对目标蛋白的双抗体识别和高保真DNA杂交检测的双重要求,所以不会检测出任何非特异性抗体结合的信号(如下图B所示): 五、Olink 与质谱检测技术比较:1、Olink检测的灵敏度更高,能检测到fg级别的蛋白:质谱目前检测的多为血浆血清里的偏高丰度的蛋白,实际上那些中低丰度的蛋白也有非常重要的作用,这部分蛋白olink可以非常好的检测到,如下图所示: Stefanie M. Hauck团队的在“Systems biology in cardiovascular disease: a multiomics approach”文中写道:高丰度蛋白质的存在,如血清白蛋白或免疫球蛋白,在高度复杂的血浆基质中直接影响质谱检测的灵敏度,使得低丰度蛋白质如细胞因子没办法好的被检测出来。而邻位延伸技术(Olink)相对于质谱分析增加了蛋白质组覆盖的深度。2、Olink PEA在“靶向检出蛋白数”、“重现性”方面综合显著优于DDA、DIA:质谱在多样本检测时形成的蛋白与样本的表达矩阵中存在比较多的缺失值。引用参考文献中数据:基于KORA队列中的173份血浆样本进行MS(DIA、DDA)与Olink PEA检测(8个Panel)数据比较,结果如下:六、Olink技术 vs 其它蛋白检测技术科学家在瑞典斯德哥尔摩乌普萨拉地区的不同实验室对多个技术平台进行了头对头比较,Olink平台的检测指标通量、灵敏度、样品量、动态范围、重复性等方面都具有领先优势,如果感兴趣,可以和斑马鱼公司联系。技术培训和支持:斑马鱼(北京)科技有限公司是Olink代理商,负责仪器和试剂的推广销售,具备丰富的细胞因子和蛋白标志物检测方面经验,可为用户提供样本制备、仪器操作、数据分析等一整套解决方案。在购买仪器后,将安排有资质的工程师进行现场安装和培训。在培训完成后,客户还将获得全方位支持,包括远程技术支持(Technical Support)、现场应用科学家(FAS)、现场服务工程师(FSE)和生物信息学应用(Applied Bioinformatics)团队,覆盖实验工作流程、试剂耗材、仪器和软件的各个方面。七、Olink在转化医学和临床研究中的应用1、生物样本库进行人群规模队列血液蛋白组检测应用案例:英国生物样本库和冰岛deCODE中心均采用olink蛋白组平台进行世界级大规模人群队列的血液蛋白组检测;2、疾病早筛及伴随诊断蛋白标志物的开发(IVD及LDT开发)应用案例:Octave公司的多发性硬化症伴随诊断试剂盒开发、香港叶玉如院士阿尔兹海默症早诊标志物开发、加拿大卵巢癌诊断标志物的开发;3、药物靶点发现验证应用案例:Scallop联盟采用基因组数据加olink蛋白组数据进行孟德尔随计划分析,做pQTL寻找因果关系;4、临床预后疗效预测,病人分层&伴随诊断标志物开发应用案例:美国癌症登月计划将Olink公司的Immuno-Oncology panel指定为肿瘤免疫治疗中第一梯队的检测方法,主要用于免疫疗法的安全性及有效性评估;5、免疫类组学研究应用案例:近期新冠炎症反应相关文章,自身免疫病,多组学联用研究免疫系统,早产儿、新生儿免疫系统发育评估等等;6、分泌组学研究(主要用于细胞培养上清中蛋白因子检测):应用案例:无创胚胎评估技术、细胞系药物实验等7、新技术应用开发应用案例:CTC细胞及稀有细胞的转录&蛋白质组研究,外泌体的蛋白质组研究,生物标志物发现等。八、技术参数1、功能用途:可以对细胞因子及蛋白标志物进行超微量、低丰度、超高灵敏度的多重检测;广泛应用于基础科学、转化医学、药物开发、临床试验、生物样本库和人群大队列研究;也可进行实验方案开发和优化,有利于生理状态评估、药物安全性有效性评估、诊断及疗效预测标志物开发,适合科研创新和开创性研究;2、样品类型:血浆、血清、脑脊液、泪液、肺泡灌洗液、尿液、外泌体裂解液和细胞提取物等;3、仪器为一体化设计,触屏操作,采用微流控技术自动构建纳升级反应体系;4、最小上样量:≤1ul血浆或其它体液样本;5、多重检测:1ul样本可同时检测≥92种细胞因子;6、灵敏度:fg/ml,发现不易检测的蛋白标志物;7、动态范围:10 log(fg/ml-ug/ml),可同时在一个体系里检测低表达和高表达的蛋白靶标;8、可检测指标数:每个样本可检测蛋白指标数≥1000个;9、高重复性:CV值小于10%;10、高特异性:基于PEA技术,克服了多重免疫检测中抗体交叉反应及信号串扰问题;11、温控范围:4–99 º C;12、抗体孵育:待检测蛋白的抗体与样本在同一个孔中完成均相孵育,无需洗板和包被;13、绝对定量:可以进行绝对定量;14、发表文献≥1000篇;九、斑马鱼(北京)科技有限公司,是Olink的经销商,负责超微量高灵敏靶向蛋白组分析仪的推广销售和技术支持,为您提供仪器的参数、价格、选型、技术原理等信息,更多相关信息可留言或来电咨询。
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  • 【讨论】除蛋白样品气泡

    毛细管电泳中若有气泡,对其分离分析影响很大,基线上常出现尖峰。特别是做蛋白样品时,很容易出气泡(此时超声会引起更多的气泡)加上配样时还要摇匀,气泡更多。不知各位是怎么去泡的,可以加去泡剂吗?望大家就各自的经验来讨论和指教以下。[em0715]

  • 蛋白电泳小技巧1

    1. 跑page胶的时候,小电压跑会避免高电压产生的热量尔导致的胶层变形。低电压泳道会比大电压泳道跑的直一些,且分离效果更高,有利于分子量相差不大的蛋白分离。2. 做WESTERNBLOT 的时候,大家往往会摸索一抗、二抗的浓度,封闭时间,曝光时间等等,而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜,甚至重新提蛋白,这样会浪费大量的时间。其实完全没有必要这样。一次转膜后,将PVDF膜晾干,裁减成小块,保存起来,用的时候取出一块,没有任何影响。这对于摸索条件的战友来说,节约了大量的时间。3. 可将SDS-PAGE的积层胶,分离胶预先配好大体积如100ml储存在4度冰箱(注:10%AP,TEMED不加,切记!!!),每次配置时只需吸取相应体积的预制胶加入AP,TEMED即可,没必要每次制胶时候翻分子克隆,特别方便,而且,这样的预制胶可储存半年以上,不失为偷懒的绝佳方法;更关键的是可大大减少与丙稀酰胺的接触,因此大大减少中毒的机会。

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  • 基于单个细胞外囊泡蛋白红外光谱的无创癌症识别
    作为动态生物分子,蛋白质在肿瘤产生和发展过程中会发生丰度和结构的变化。与肿瘤发生关联的蛋白质异质性为阐明癌症发病机制提供了诊断信息,因此特异性蛋白是肿瘤诊断和药物设计的重要生物标志物。小细胞外囊泡(sEV)是由细胞释放的纳米尺度(直径30–200 nm)的膜囊泡。来自源细胞的蛋白质、核酸和脂质等与肿瘤产生发展相关的生物载物可以选择性地包装到sEV中,并通过膜融合和内吞作用等生理途径传递到受体细胞,影响受体细胞的生理功能,进而促进肿瘤的发生和发展。图 1 细胞外分泌囊泡的提取和纯化由于肿瘤来源sEV中的蛋白质异质性与肿瘤的恶性程度相关,并反映了肿瘤进展和转移的能力,因此对sEV蛋白组分的研究,有助于阐明sEV在肿瘤转移和侵袭中的作用,并促进体液活检的发展和癌症标志物的开发。传统蛋白质组学仅限于获得肿瘤细胞衍生的sEV族群的蛋白质表达信息,其在用于研究单个sEV蛋白组分时缺乏分辨率和灵敏度,特别是对蛋白质结构信息的获取。因此单个sEV的分子分析和异质性评估在技术上仍具有挑战性。光学表征提供了无损、快速、非侵入性的便捷探测手段研究蛋白质的组分和结构信息,然而由于远场光谱学的微米级光斑与百纳米级sEV直径之间的尺寸差异,使得远场光谱技术仅限于开展对sEV族群的大样本分析,其检测灵敏度和特异性受到sEV的异质性和sEV纯化挑战的影响。针对单个sEV蛋白组分分析的瓶颈,中国科学院物理研究所/北京凝聚态物理国家研究中心L04组陈佳宁研究员,SM4组叶方富研究员与国家纳米科学中心朱凌研究员、杨延莲研究员、王琛研究员和中国科学技术大学附属第一医院马小鹏副主任医师合作。利用自搭建纳米红外光谱系统(nano-FTIR)的10 nm尺度红外光场局域增强,在蛋白质酰胺I带(1600–1700 cm-1)和酰胺II带(1510–1580 cm-1)的指纹光谱频段内,通过对直径160–200 nm,高度为50–60 nm的单个sEV开展原位红外指纹光谱研究。图 2 单个细胞外分泌囊泡的近场红外成像和原位红外吸收光谱结合酰胺I带吸收频率对蛋白质骨架结构的高度敏感性,通过对健康和不同恶性程度细胞来源的单个sEV的红外光谱进行统计分析发现由于蛋白质中的C-O键和氨基酸C-OH基团中的氢键随着癌症的发展遭到破化,酰胺I/II吸收比值随着sEV来源细胞系的恶性程度增加而增加;高恶性癌症细胞来源sEV中蛋白质二级结构α-螺旋+随机卷曲的含量发生显著下降,反平行β-折叠+β-转角显著增加,这种蛋白质二级结构的改变一方面与癌细胞来源sEV在癌症发展演化起到的生理功能有关,另一方面在癌变细胞中富含β-折叠+β-转角的蛋白质的生物合成消耗更多的能量,癌症中线粒体异常的有氧糖酵解表现出异常能量代谢(即Warburg效应)在癌症的发生和发展中起着至关重要的作用,而癌变细胞来源sEV中β-折叠+β-转角含量增加带来的更多能量消耗是Warburg效应的一种表现。图 3 单个细胞外分泌囊泡的蛋白指纹光谱作为癌症恶性程度的指标作为临床应用的探索,进一步分析了从两名乳腺癌患者的原发肿瘤组织中提取的sEV(I期,无转移;IIB期,有淋巴结转移)。相较于无转移患者来源的sEV,淋巴结转移患者的α-螺旋+随机卷曲比例显著降低,分子间反平行β-折叠+β-转角比例显著提高,病人组织来源sEV蛋白质二级结构占比的变化与细胞来源的sEV中的结论一致。研究结果显示了nano-FTIR在单个sEV分子鉴定的优势,证明了sEV蛋白异质性在癌症检测和肿瘤恶性评估中的意义和临床价值,为基于sEV的nano-FTIR分子指纹谱识别的癌症诊断提供了体液活检解决方案。图 4组织来源细胞外分泌囊泡的蛋白指纹光谱区分无转移和淋巴结转移的乳腺癌患者国科温州研究院博士后薛孟飞(中国科学院物理研究所毕业)和清华大学博士叶思源(国家纳米科学中心联合培养)为共同一作。陈佳宁研究员和国家纳米科学中心的朱凌研究员、杨延莲研究员为共同通讯作者。相关工作近期以“Single-vesicle Infrared Nanoscopy for Noninvasive Tumor Malignancy Diagnosis”发表在《JACS》杂志上,上述研究工作得到了科技部重点研发计划、国家自然科学基金、中国科学院战略性先导科技专项、中国博士后科学基金和中国科学院青年创新促进会的支持
  • 蛋白样品在跑胶前要如何处理
    一、蛋白样品制备  之前和大家介绍过细胞和组织蛋白质的提取,当我们做WB的时候,需要对提取好的蛋白样品进行处理:在蛋白样品中加入SDS loading buffer 6X(蛋白上样缓冲液)稀释至1X(如蛋白样品有120ul,则加入SDS loading buffer 6X 600ul),混匀,75-95度加热10-15分钟,使蛋白变性以充分暴露抗原位点。在加热结束后,进行离心,使蛋白样品适当降温,防止PAGE胶被融化。  PS:要测量的蛋白如果是磷酸化形式,一般加热到75度,一般情况可95度加热。市面上买到的SDS loading buffer 有2X的也有5X的,最后稀释至1X即可。  那么为什么我们加入SDS loading buffer呢?主要就是用它的不同成分在电泳中起了关键的作用。  SDS loading buffer 的主要成分及作用:A:0.1%溴酚蓝,作为指示剂,方便观察电泳进行的程度;B:10%甘油,密度大,增加样本的重量,可携带样本沉到底部;C:2%SDS,是一种阴离子表面活性剂,能打断蛋白质的氢键和疏水键,按一定比例和蛋白质分子结合成为复合物,是蛋白质带满负电荷,从而是蛋白带电荷一致,减少电荷对电泳结果的影响;D:巯基乙醇还原剂,使蛋白质的二硫键断开,使得蛋白保持线性结构。  二、蛋白上样  1. 将之前配好的胶固定在电泳装置上,加入1X电泳液  2. 拔出梳子,应该两侧同时用力,缓慢拔出,注意在拔除梳子时防止气泡进入梳孔使其变形,若上样孔有变形,可用适当粗细的针头拨正。  3.加入蛋白样品,一般10孔的梳孔,每孔可以加入20ul -40ul蛋白样品,15孔的梳孔,每孔可以加入10ul -30ul蛋白样品,是用微量注射器加样,平时我们也可以用普通的移液枪加样,尽量让枪头深入梳孔底物,防止蛋白样品飘出,一般在目的蛋白两侧加入等量的marker,如果两侧有空的梳孔,应该加入1X的loading buffer,起“压边”作用,可以使蛋白样品在一条水平线上往下跑。  4.电泳:接上电极,正负极不要弄反,红色对红色,黑色对黑色,初始电压设为90V,当样品跑至分离胶时将电压调至120V,一般在溴酚蓝跑出胶时停止电泳,也可根据目的蛋白的分子量来选择跑的时间,如分子量较大,可以延长电泳时间,使得分子量大的marker跑的分散开,容易判断分子量。  三、注意事项  1.蛋白样品上样量最好相等,不要过多。  2.不要过多重复使用电泳Buffer  3.最佳分辨区在分离胶的2/3  4.电泳后测定的分子量有10%的误差,不可完全信任。有些蛋白质由亚基(如血红蛋白)或两条以上的肽链(α-胰凝乳蛋白酶)组成的,它们在巯基乙醇和SDS的作用下解离成亚基或多条单肽链,SDS-PAGE电泳法测定的只是它们的亚基或是单条肽链的相对分子量,有的蛋白质(如电荷异常或结构异常的蛋白质,带有较大辅基的蛋白质)不能采用该发测相对分子量。  5.如果电泳中出现拖尾,染色带的背景不清晰等现象,可能是SDS不纯引起。
  • BLT小课堂 | 蛋白芯片技术原理及应用
    概念蛋白质芯片技术是在DNA芯片技术基础上发展的一项蛋白质组学技术。其原理是将大量不同的蛋白质分子(如酶、抗原、抗体、受体、配体、细胞因子等)通过微阵列的形式有序排列在固相载体表面,利用蛋白质与蛋白质或者蛋白质与其他分子之间的特异性结合,获得与之特异性结合的待测蛋白(如血清、血浆、淋巴、间质液、尿液、渗出液、细胞溶解液、分泌液等)的相关信息,便于我们分析未知蛋白的组分、序列,体内表达水平、生物学功能、与其他分子的相互调控关系、药物筛选、药物靶位的选择等。蛋白质芯片技术的出现,为我们提供了一种比传统的凝胶电泳、Western blot和Elisa更为方便和快速研究蛋白质的方法。该方法具有高通量,微型化和快速平行分析等优点,不仅对基础分子生物学的研究产生重要影响,也在临床诊断、疗效分析、药物筛选及新药研发等领域有着广泛应用。特点①蛋白芯片具有高特异性、重复性、准确性。这是由抗原抗体之间、蛋白与配体之间的特异性结合决定的。②蛋白芯片具有高通量和操作自动化的特点,在一次实验中可对上千种目标蛋白同时进行检测,效率极高。③可发现低丰度、小分子量蛋白质,并能测定疏水蛋白质,特别是膜蛋白质。④蛋白芯片具有高灵敏性,只需0.5-5μL样品,或2000个细胞即可检测。蛋白芯片技术在分子生物学及生物化学基础研究中的应用01 在蛋白质水平上检测基因的表达由于基因转录产物mRNA数量并不能准确反映基因的翻译产物蛋白质的质与量,因此在蛋白质水平上检测基因的表达对于了解基因的功能非常重要。蛋白质芯片技术产生前,蛋白质双向电泳技术是蛋白质组规模上进行蛋白质表达研究的唯一方法,但这种技术操作繁琐而且难以快速检测样品中成百上千种蛋白质的表达变化。蛋白质芯片的特异性、灵敏性和高通量等特点,在检测基因表达终产物蛋白质谱的构成及变化中发挥着不可替代的作用。02 高通量筛选抗原/抗体相互作用目前蛋白质芯片检测利用最广泛的生物分子相互作用是抗原抗体的特异性识别和结合,单克隆抗体是蛋白质芯片检测中使用最广泛的生物分子。运用蛋白质芯片可以研究不同抗原/抗体的特异性作用,而且对于检测样品中极微量的抗原/抗体分子作用非常有利。03 蛋白质/蛋白质相互作用分析酵母双杂交系统是近年来基因组规模上研究蛋白质相互作用的主要方法,但存在体内操作、假阳性、假阴性和外源蛋白质折叠、修饰等局限。蛋白质芯片技术不依靠任何生物有机体而在体外直接检测目标蛋白质,实验条件可随意控制,同时实验步骤自动化程度高,一次分析的蛋白质数量巨大,因而成为目前除酵母双杂交系统外进行大规模研究蛋白质相互作用的主要方法。04 酶/底物作用分析耶鲁大学的Snyder小组用蛋白芯片对酵母基因组编码的119种蛋白激酶的底物专一性进行了研究。实验中将蛋白激酶表达为谷胱甘肽转移酶(GST)融合蛋白,针对17种不同的底物,平行测定了119种GST2蛋白激酶融合蛋白的底物专一性,发现了许多新的酶活性,大量蛋白激酶可以对酪氨酸进行磷酸化,而这些激酶在催化区域附近有共同的氨基酸残基。也证明了蛋白质芯片可作为高通量筛选酶-底物作用的良好平台。蛋白芯片的检测目前蛋白芯片的检测主要有两种方式。一种是以质谱技术为基础的直接检测法,采用表面增强激光解析离子化-飞行时间质谱技术,用激光解析电离的方法将保留在芯片上的蛋白质解离出来。具体过程为:芯片经室温干燥后,加能量吸附因子如芥子酸,使其与蛋白质结合成混合晶体,以促进蛋白质在飞行时间质谱检测中的解析和离子化,利用激光脉冲辐射使芯池中的分析物解析成荷电粒子,根据不同质荷比离子在仪器场中的飞行时间长短不一,通过飞行时间质谱来精确地测定出蛋白质的质量,并由此绘制出一张质谱来,以分析蛋白质的分子量和相对含量。另一种为蛋白质标记法,样品中的蛋白质预先用荧光染料或同位素等标记,结合到芯片上的蛋白质就会发出特定的信号,用CCD照相技术及荧光扫描系统等对激发的荧光信号进行检测。与飞行时间质谱相比,该方法定量更加准确,操作也更加简便。与DNA芯片一样,蛋白质芯片同样蕴含着丰富的信息量,必须利用专门的计算机软件进行图像分析、结果定量和解释。其中应用最广的是荧光染料标记法,原理较为简单、使用安全、灵敏度高,且有很好的分辨率。可直接用广州博鹭腾 GelView 6000Plus进行拍摄。图1.GelView 6000Plus智能图像工作站GelView 6000Plus 配备600万像素科学级制冷CCD相机,制冷温度为环境温度下 55℃,极低的暗电流,很大程度降低背景干扰。而且独有的红外感应开关,自动控制样品台的开启与关闭,同时也减少了实验时对仪器的污染。
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