钙镁离子含量

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  • WAK-NI镍离子测试包水质含量镍快速检测
    WAK-NI镍离子测试包水质含量镍快速检测 日本共立理化学研究所是日本最大的水质试剂盒生产厂家,比色管类型的封装试剂是最简单的水质检测工具。将试剂封装在PE比色管中,用简单的操作即可测定比分析用试验纸更低的浓度(与方源仪器产品相比),共有41种水质项目供客户选择:工程管理,排水管理,环境调查,自来水,水管,饮用水检查等.(周) WAK-NI镍离子测试包水质含量镍快速检测参数:-Mn锰0.5 1 2 5 10 20以上30秒50次/盒-NH4(C)氨(高浓度)0 0.4 0.8 1.6 4 8 16以上15分钟50次/盒- NH4氨 0.16 0.4 0.8 1.6 4/85分钟50次/盒-Ni镍0.5 1 2 5 105分钟50次/盒-Ni(D)镍(低浓度)0.3 0.5 1 2 5 102分钟50次/盒-NO2(C)亚硝酸(高浓度)16 33 66 160 330 660以上2分钟50次/盒5 10 20 50 100 200以上- NO2亚硝酸0.02 0.05 0.1 0.2 0.5 12分钟50次/盒0.005 0.01 0.02 0.05 0.1 0.2 0.5- NO3(C)硝酸(高浓度)90 225 450 900 2250 45005分钟50次/盒20 50 100 200 500 1000- NO3硝酸1 2 5 10 20 453分钟50次/盒0.2 0.5 1 2 5 10- O3臭氧0.1 0.2 0.5 1 2 51分钟50次/盒 使用方法:① 拔出管子头部的线②使孔朝上,用手牢牢捏住管子下半部,排出上部空气③保持图2的捏住管子的状态,将洞插入专用杯,松开手指,吸入被测水(检测的水是管的一半)④ 轻轻震摇5-6次,在指定的时间吸入的被测水的变色与标准色卡进行比较,查找相同或相似颜色,该处所示的数值即为所测水质的浓度值(mg/L=ppm)特长:无需PH校正,PH5~PH9之间都可以使用不用任何器具,只要将预埋线拉出 快速得出结果,大部分项目约5分钟轻巧方便,每只试管重量约1公克不会损坏,外层以聚乙烯制成应用范围:工程管理: 原物料品管、残留量检查、一般用水/循环用水/锅炉用水等管理。排水管理: 最终放流水确认、污水处理设施运转管理、设备试阵、调整验收、异常处理、异常早期发现、操作指导、取缔。用水检查: 自来水/工业用水/地下水检查、自来水塔清洗消毒确认检查、紧急火害、野外活动等等饮用水安全确认检查、牧场农蓄等饮用水检查。养殖管理: 养殖鱼业水质检查、取水口检查、观赏鱼/水族馆水质检查、活鱼搬运/运送管理。环境调查: 河川湖泊水质调查、污染分布、残留调查、污染源追从、酸雨调查、温泉水调查、海外环境调查。 教 材: 中小学环境教育、大专院校实习器材、科学实验、研究专案、食品检查。农 业: 水井栽培营养液管理、农业用水检查。其 它: 大型精密仪器分析事前确认、毒性检定、调查研究、泳池水质检查、电解水检查。 中国代理商:深圳市方源仪器有限公司
  • 磷酸盐含量测试
    QUANTOFIX 磷酸盐测试条 产品编号:91320 测试范围:0-3-10-25-50-100mg/l 包括: 1支装有100条磷酸盐测试条的铝罐 1瓶磷酸盐-1试剂 1瓶磷酸盐-2试剂 1支标有5ml刻度的测量试管 1支试管 安全提示: 磷酸盐-1含有19%的硝酸。可导致灼伤。请远离小孩。不要吸入气体。如果不慎溅入眼睛,请立即用大量的水冲洗或遵医嘱。请带上眼睛防护罩。如果感觉不舒服,请立即就医。 使用方法: 1、 用待测溶液冲洗测量试管并加入待测溶液至5ml刻度处。 2、 加入5滴磷酸盐-1试剂并仔细摇匀。 3、 将试管放入塑料制的试管架内,加入6滴磷酸盐-2试剂。 4、 取出适量的测试条,请立即盖好瓶盖。不要用手接触试纸的反应区。 5、 将测试条放入准备好的待测溶液中15秒,甩掉多余的水分。 6、 将测试条放入试管中15秒,甩掉多余的水分。 7、 60秒钟后将反应区的颜色与标准比色卡进行对比,如果存在磷酸根离子,测试纸会变成蓝绿色。 干扰: 仅适用于正磷酸盐的测试,其它形式的磷酸盐,例如:聚磷酸盐、焦磷酸盐和甲基磷酸盐,必须在测定总磷时进行加热分解。超过10mg/l的二氧化硅发生反应后,产生蓝色的颜色变化,因此会导致所测结果偏高。含量较高的硫离子会导致反应区产生褐色变化,从而导致测试结果偏低。 以下离子不会产生干扰: 1000mg/l Ag+, Al3+, Cd2+, Co2+, Cr3+, Mg2+, Mn2+, NH4+, Ni2+, Zn2+, Cl-, F-, NO3-, SO42-, 柠檬酸盐,草酸盐,酒石酸,500mg/lCa2+, 250mg/l Pb2+, 50mg/l Cu2+, 25mg/l Fe3+, 5mg/l Fe2+, 2mg/lNO2- 转换系数:1mg PO43-=0.75mgP2O5=0.33mgP 储存: 避免暴露在阳光照射和潮湿的地方。请储存在30℃以下的干燥环境。
  • 元素分析,元素含量样品分析测试服务
    英国OEA分析实验室在元素分析行业已经有超过38年的历史,拥有多台较先进的自动化分析测试仪器,如台元素分析仪、同位素质谱仪、离子色谱和自动滴定仪等,可以对各种类型的样品开展分析测试工作。我们可以接受气体、液体、固体(甚至空气敏感物质)样品的分析。 元素分析测试服务: OEA分析实验室可以提供下列元素分析测试项目:碳、氢、氮元素含量;总有机碳分析;蛋白质分析;氧元素含量;硫元素含量;氟、氯、溴、碘、磷含量;金属含量分析。

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  • 到梅特勒托利多官网去了解 Easy Na 钠含量分析仪 还可以下载报价专业的钠含量测定Easy Na钠含量分析仪如果您需要测量食品饮料等产品中的钠含量,这种全新的钠含量分析仪可以让您的分析简便快速。 它使用安全且经济实惠的化学品降低样品制备的成本,并且无需电极校准,即可实现实现专业的钠含量测定。 摄入过量盐带来的健康风险食品中盐含量会影响口味,但也会对健康产生不利影响。研究显示,钠的摄入量与高血压发病率有着明显的直接关系。世界卫生组织(WHO)公布的数据显示:在欧洲,高血压是头号健康杀手。食品生产商必须标明(甚至需要降低)食品中的盐(氯化钠)含量。 简便且准确的钠含量分析该仪器采用标准加入法,专为简化食品中钠含量测定而设计。只需加入样品和离子强度调节剂(ISA)便可开始测量,无需任何电极和/或系统校准,钠含量分析从未如此快捷简便。Easy Na钠含量分析仪,让您轻松测定满足GB 28050-2011《食品安全国家标准预包装食品营养标签通则》中要求的钠含量标示。 随时分析您的样品 — 专业,精确该仪器专业用于快速精确测定钠含量。它无需大型的投资和复杂的设施,也不需要操作人员具有很丰富的分析经验和知识,而这些恰恰是其他钠含量分析仪器所必不可少的因素。该钠含量分析仪能够直接测量食品的钠含量(Na+),而且无需电极校准,也不是通过银量滴定法测量氯离子(Cl-)含量来推算钠含量(这可能会因为存在其他的氯化物而导致钠含量的误差)。该钠含量分析仪采用专业开发的标准加入法的评估算法,使仪器能获取更精确的结果。其精确度完全可与其他大型的钠含量分析技术媲美,如离子色谱 (IC) 或原子吸收 (AAS) 技术,但后者价格昂贵。 降低投资和运营成本Easy Na钠含量分析仪可以降低您的投资成本,为您提供物超所值的分析手段。此外,使用更加经济实惠且更加安全的氯化钠标准溶液和其他试剂,替换了通常用于氯化物测定的昂贵硝酸银(AgNO3)滴定剂,令运营成本更低。通过快速的样品测量,节省操作人员的时间,提高工作效率。 EasyDirect™ 数据采集软件简化结果数据管理将Easy Na钠含量测定仪与EasyDirect™ 数据采集软件连接,实现高效的结果数据管理。结果数据的采集由计算机执行,即使没有启动 EasyDirect™ 数据采集软件,计算机也能自动记录结果数据。 同时,您还将享受到结果管理的众多扩展功能,包括 csv 文件导出结果、在网络打印机或本地打印机上打印,以及其他计算和滴定曲线复查功能等。 您的分析结果将通过 EasyDirect™ 数据采集软件进行存储、整理和轻松访问,让您放心、安心! 产品和规格 到梅特勒托利多官网去了解 Easy Na 钠含量分析仪 还可以下载报价
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  • 一、SZ-GaB钙离子分析仪产品简介SZ-Ga钙离子在线测控仪采用美国进口的钙离子选择电极法(ISE法),灵敏度高,信号响应迅速,测量准确、性能稳定、维护简单。该测控系统具有使用方便、准确度高、经济的特点。运用这一系列分析技术,确保仪器长期工作的稳定可靠性和准确性。具有中文菜单式操作、485通讯等功能。用于饮用水处理厂、罐装厂、饮用水分布网、游泳池、冷却循环水、水质处理工程等对水溶液中的钙离子含量进行连续监测和控制。二、SZ-GaB钙离子分析仪主要特点:◇大屏幕点阵液晶显示、中文菜单操作。◇多参数同时显示:钙离子值、温度、输出电流等同时显示,直观易读,并有量程超限提示。◇有恢复出厂设置功能。◇手动/自动温度补偿功能。◇通讯功能(选配):具有RS-485通讯接口(MODBUS协议部分兼容),4~20 mA电流输出对应的余钙值可以任意设定。◇光电隔离4-20mA电流输出。◇迟滞量任意设定功能,避免开关继电器频繁动作,有设置开关量关和闭功能。◇看门狗功能:确保仪表不会死机。◇掉电保护>10年。三、SZ-GaB钙离子分析仪技术指标1. 测量范围:钙离子:0-20000 mg/L(ppm),温度:0~60℃2. 分 辨 率: 0.01mg/L, 0.1℃3. 精 度:优于±3%, ±0.5℃ 4. 手动/自动温度补偿功能(0~60℃)。5. 控制接口:两组ON/OFF继电器接点,分为高点、低点报警信号光电隔离输出。第三组继电器:自动清洗控制功能模拟输出。6. 信号隔离输出:光电耦合器隔离保护4~20mA信号输出。7. 继 电 器:继电器滞后量任意设定,继电器负载 3A 220VAC/24VDC。8. 工作条件:环境温度为0~60℃,相对湿度≤90%9. 输出负载: 负载<500Ω(0-10mA),负载<750Ω(4-20mA) 10. 工作电压:220VAC±10%、50/60Hz 11. 尺 寸:96×96×156 mm12. 开孔尺寸:91×91mm13. 重 量:0.9Kg14. 防护等级:IP65
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  • ALT亚铁离子含量监控在线分析仪是一款由禾工科仪自主研发的无人值守的工业过程在线分析滴定仪,取代人工分析,可实现自动取样、上样、信号测量、滴定分析、自动清洗、自动分析、在获取分析结果后根据生产工艺控制加药泵对槽液进行精确配比加药,将槽液指标维持在生产工艺的预设范围内,还可将分析结果和加药量发送给服务器的数据库进行存储和统计,满足现代化生产过程控制的要求。ALT亚铁离子含量监控在线分析仪采用A8处理器,模块化设计, 七英寸中文人机对话全彩触摸屏,高精度滴定管、电磁切换阀、长寿命溶剂泵,高分辨率的颜色采集模块和多样的检测模块,可通过测量电极的电位变化和颜色变化的自动判断,来指示滴定的终点,根据样品性质,仪器选用不同电极和检测器进行自动颜色滴定、pH滴定、氧化还原滴定、络合滴定、非水滴定和沉淀滴定等多种滴定,适用于化工、环保、食品、制药、造纸、纺织、冶金、金属表面处理、水质处理等领域。ALT亚铁离子含量监控在线分析仪 功能示意图在线设备的开发标准:结果准确,控制精确,可靠稳定,智能可控。禾工科仪目前具备下列行业及生产控制领域的样品在线检测及现场药水添加系统开发经验:工业涂装工艺流程生产线、印染工艺生产线、PCB印刷生产流水线、冶金治炼流水线、各类化工过程槽液浓度参数控制等领域的酸值、碱值、水质硬度、钙镁等金属与氯氟等非金属离子的在线浓度监测与药水添加系统。ALT亚铁离子含量监控在线分析仪 产线应用示意图* 根据行业生产线专业定制研发,在线分析,无人值守,可完全替代人工;* 在线分析模块可进行分析自动化进程的编辑、修改和存储;包括在线自动取样,自动上样,自动分析,自动清洗,自动数据存储;计算公式可进行编辑和存储,分析完成后自动计算最终结果并发送给服务器;* 过程控制模块可监控多台在线分析仪的状态,并可根据客户需要开发配合自动化生产控制功能,本设备具有监控报警功能,可设置,液体,电源及分析结果等异常报警功能;★配置清单(基本配置):数量1、主机控制单元 1套2、高精度滴定馈液单元2套3、搅拌滴定台(通用)1个4、电位滴定(PH滴定)模块1套5、双铂针测量电极1支6、精密辅助泵(含控制系统)2个7、通讯模块(RS232,TCP/IP,MODBUS)1套8、滴定控制软件(在线滴定,自动计算,自动输出)1套9、整机安装及机箱与包装1套10、新机安装培训服务及12个月有限保修服务1台
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  • 硫酸亚铁中如何分别测试钙镁离子的含量?

    请大家帮我一下忙哦!我们中控有硫酸亚铁液体,需要分别测定其中钙镁离子的含量?我尝试着用水中钙镁离子的测定方法做了,但是不准确,我不知道应当怎么做,请哪位高手有这方面的资料帮助我一下!非常感谢啊!焦红艳

  • 【实验】无机实验之石灰石中钙、镁含量的测定

    石灰石中钙、镁含量的测定目的原理实验目的1. 练习酸溶法的溶样方法;2. 掌握络合滴定法测定石灰石或白云石中钙、镁含量的方法和原理;3. 了解沉淀分离法在本测定中的应用;4. 练习沉淀分离中的一些基本操作技术,如沉淀、过滤、洗涤等。实验原理石灰石、白云石的主要成分为CaCO3和MgCO3,此外,还常常含有其他碳酸盐、石英、FeS2、粘土、硅酸盐和磷酸盐等。石灰石、白云石中钙、镁含量测定的原理如下:1.试样的溶解:一般的石灰石、白云石,用盐酸就能使其溶解,其中钙、镁等以Ca2+、Mg2+等离子形式转入溶液中。有些试样经盐酸处理后仍不能全部溶解,则需以碳酸钠熔融,或用高氯酸处理,也可将试样先在950-1050℃的高温下灼烧成氧化物,这样就易被酸分解(在灼烧中粘土和其他难于被酸分解的硅酸盐会变为可被酸分解的硅酸钙和硅酸镁等)。2.干扰的除去:白云石、石灰石试样中常含有铁、铝等干扰元素,但其量不多,可在pH值为5.5-6.5的条件下使之沉淀为氢氧化物而除去。在这样的条件下,由于沉淀少,因此吸咐现象极微,不致影响分析结果。3.钙、镁含量的测定:将白云石、石灰石溶解并除去干扰元素后,调节溶液酸度至pH≥12,以钙指示剂指示终点,用EDTA标准溶液滴定,即得到钙量。再取一份试液,调节其酸度至pH≈10,以铬黑T(或K-B指示剂)作指示剂,用EDTA标准溶液滴定,此时得到钙、镁的总量。由此二量相减即得镁量,其原理与EDTA溶液之标定相同,此处从略。仪器药品0.02mol/dm3EDTA标准溶液、1+1HCl溶液、1+1氨水、NH3-NH4Cl缓冲液(pH≈10)、10%NaOH溶液、钙指示剂、铬黑T指示剂、K-B指示剂、0.2%甲基红指示剂、镁溶液、1+1三乙醇胺溶液。过程步骤一、试液的制备准确称取石灰石或白云石试样0.5~0.7g,放入250ml烧杯中,徐徐加入8-10ml 1+1HCl溶液,盖上表面皿,用小火加热至近沸,待作用停止,再用1+1HCl溶液检查试样溶解是否完全?(怎样判断?)如已完全溶解,移开表面皿,并用水吹洗表面皿。加水50ml,加入1-2滴甲基红指示剂,用1+1的氨水中和至溶液刚刚呈现黄色。(为什么?) (在教学时数允许时,除去Fe3+、Al3+等干扰离子可采用分离的方法,这样可以对沉淀、分离、洗涤等操作再进行一次训练。时数不足时,可以采用加掩蔽剂的方法,即在石灰石、白云石试样经酸溶解完全后,用容量瓶稀释至250ml。然后在测定钙量和钙、镁合量时吸出25ml溶液中加1+1三乙醇胺溶液3ml,其他步骤不变。)煮沸1~2min,趁热过滤于250ml容量瓶中,用热水洗涤7~8次。冷却滤液,加水稀释至刻度,摇匀,待用。二、钙量的滴定先进行一次初步滴定,(进行初步滴定的目的是为了便于在临近终点时才加入NaOH溶液,这样可以减少Mg(OH)2对Ca2+离子的吸附作用,以防止终点的提前到达。)吸取25ml试液,以25ml水稀释,加4ml 10%NaOH溶液,摇匀,使溶液pH达12-14左右,再加约0.01g钙指示剂(用试剂勺小头取一勺即可),用EDTA标准溶液滴定至溶液呈蓝色(在快到终点时,必须充分振摇),记录所用EDTA溶液的体积。然后作正式滴定:吸取25ml试液,以25ml水稀释,加入比初步滴定时所用约少1ml的EDTA溶液,再加入4ml10%NaOH溶液,然后再加入0.01g钙指示剂,继续以EDTA滴定至终点,记下滴定所用去的体积V1。三、钙、镁总量的滴定吸取试液25ml,以25ml水稀释,加入5ml NH3-NH4Cl缓冲溶液,使溶液酸度保持在pH = 10左右,摇匀,再加入0.01g铬黑T指示剂 (或K-B指示剂),以EDTA标准溶液滴定至终点,记下滴定所用去的体积V2。分析思考 1.络合滴定法测定石灰石或白云石中钙、镁含量的原理是什么?这时钙、镁共存,相互有无妨碍?为什么?2.怎样分解石灰石或白云石试样?用酸溶解时,应注意什么?怎样知道试样溶解已经完全?3.用1+1氨水中和溶液至刚刚使甲基红指示剂呈现黄色时溶液的pH值为多少?4.本法测定钙、镁含量时,试样中存在的少量铁、铝等物质有干扰吗?用什么方法可以除去铁、铝的干扰?

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  • 青海省标准化协会发布 《工业盐中钙、镁、铁、钾、铝、钡、锶、锰、铅和镍含量的测定电感耦合等离子体原子发射光谱法》等3项团体标准
    由海西州盐化工产品质量检验检测中心、青海省盐湖工业股份有限公司、青海省柴达木综合地质矿产勘查院、海西州质量技术检验检测中心、青海理工大学(筹)、茫崖市食品药品和质量技术检验检测中心等单位起草的《工业盐中钙、镁、铁、钾、铝、钡、锶、锰、铅和镍含量的测定电感耦合等离子体原子发射光谱法》《工业氯化钙中钠、镁、钾含量的测定电感耦合等离子体原子发射光谱法》《硫酸钾镁肥中钙、镁、钠含量的测定电感耦合等离子体原子发射光谱法》3项团体标准,经征求意见、多次修改,已通过专家评审。根据《青海省标准化协会团体标准管理办法》相关规定,予以批准发布。标准发布日期为2023年12月26日,实施日期为2023年12月26日。团体标准号为: T/QAS 103-2023《工业盐中钙、镁、铁、钾、铝、钡、锶、锰、铅和镍含量的测定电感耦合等离子体原子发射光谱法》;T/QAS 104-2023《工业氯化钙中钠、镁、钾含量的测定电感耦合等离子体原子发射光谱法》;T/QAS 105-2023《硫酸钾镁肥中钙、镁、钠含量的测定电感耦合等离子体原子发射光谱法》 青海省标准化协会2023年12月27日工业氯化钙中钠镁钾含量的测定.pdf硫酸钾镁肥中钙镁含量的测定.p工业盐中钙、镁、铁、钾、铝、钡、锶、锰、铅、和镍含量的测定.pdf团体标准的公告1.jpg团体标准的公告.jpg
  • 青海省标准化协会公开征求《工业氯化钙中钠镁 钾含量的测定电感耦合等离子体原子发射光谱法》等3项团体标准意见
    各相关单位及专家:按照青海省标准化协会团体标准工作程序,标准起草单位已完成《工业氯化钙中钠镁钾含量的测定电感耦合等离子体原子发射光谱法》《工业盐中钙、镁、铁、钾、铝、钡、锶、锰、铅和镍含量的测定电感耦合等离子体原子发射光谱法》《工业盐中钙、镁、铁、钾、铝、钡、锶、锰、铅和镍含量的测定电感耦合等离子体原子发射光谱法》3 项团体标准征求意见稿,根据《青海标准化协会团体标准管理办法》的要求,现在网上公开征求意见,欢迎提出宝贵意见。征求意见截止时间为2023年11月15日,请您在截止日期之前将您的意见反馈至青海标准化协会。协会联系方式协会秘书处:刘伟朝:18297212652、韩建华:13909712796协会邮箱:qhsbzhxh@163.com意见征求涵15.pdf工业氯化钙中钠镁钾含量的测定-文本.pdf附件2:意见反馈表.doc硫酸钾镁肥中钙镁钠含量的测定-文本.pdf工业盐中10种金属离子含量的测定 -文本.pdf
  • BLT小课堂|水母发光蛋白检测法在细胞钙离子含量测定中的应用
    Ca2+作为普遍的第二信使在细胞信号转导过程中起着非常重要的作用,是单个细胞生存和死亡的信号。它参与了神经传导、血液凝固、肌肉收缩、心脏收缩、大脑功能、酶功能以及内分泌腺的激素分泌等各种生理机能。而人们对Ca2+在信号转导中作用的认识,则很大程度上取决于Ca2+测定技术。目前常用的Ca2+检测方法主要有:Ca2+选择性微电极测定法、同位素示踪法、核磁共振法和水母发光蛋白检测法等。01Ca2+选择性微电极测定法:Ca2+选择性微电极一种电化学敏感器。利用内充液和组织或细胞之间产生电位差,理想情况下,该电位差是Ca2+对数的线性函数,遵循Nernst方程。优点:直接、敏感地测定组织或细胞内的Ca2+,不需使用指示剂,不影响结合钙和游离钙的平衡。缺点:反应速度慢而无法测定Ca2+的快速变化,而且穿刺损伤细胞可引起渗漏,且不适用于太小的细胞。02同位素示踪法:用放射性核素45Ca2+对Ca2+进行示踪,可测量出通过细胞膜转运到细胞内Ca2+增加的速度及浓度的大小,揭示Ca2+泵的作用,目前主要用于测定跨膜Ca2+的流动。优点:测量方法简单易行,比普通化学分析法的灵敏度高。确定放射性示踪剂在组织器官内的定量分布,可以达到细胞、亚细胞乃至分子水平。缺点:静态效果差,需要特定的同位素测定仪,并且要注意示踪剂的同位素效应和放射效应问题。03核磁共振法:是一种新的、非光学技术的Ca2+检测方法。由于正常生物体内氟含量很少,为了得到足够的响应,在检测时需要使用含氟指示剂。该指示剂经过化学修饰后进入细胞,进而被水解成游离状态,然后与Ca2+结合,根据获得的波谱图计算出Ca2+的浓度。优点:具有非破坏性和无损伤性,能够在接近生物样本生理状态下连续动态地进行检测,准确反应Ca2+浓度。缺点:需要核磁共振仪,成本较高。04荧光探针法:目前常用的Ca2+荧光探针有Fluo-3、Fluo-4、Fluo-8等。这类探针本身无法进入细胞,但它的亲脂性衍生物却可以透过细胞膜进入细胞。一旦进入细胞,这类亲脂性衍生物的亲脂性封闭基团在细胞非特异性酯酶的作用下被分裂除去,在细胞内便会形成一种带负电荷的荧光染料。与胞内Ca2+结合时,其荧光强度显著增加。优点:指示剂易导入细胞,空间分辨率高,反应速度快,而且可同时检测多重离子。缺点:需要有荧光显微镜或激光共聚焦显微镜,成本较高。05水母发光蛋白检测法:最近十几年来,水母发光蛋白(Aequorin)很受人们的关注。水母发光蛋白由189个氨基酸组成,具有3个Ca2+结合的EFhand结构,所以水母发光蛋白可作为检测Ca2+的新型探针。优点:Ca2+/水母蛋白复合物能检测~0.1μm到>100μm范围内的钙离子浓度,且复合物不会从细胞内泄露出来,可检测几小时至数十天内Ca2+浓度的变化。比荧光探针法的背景低,样本本身不会发生自荧光。腔肠素的性质腔肠素(Coelenterazine)作为海洋动物体内贮存光能的分子,它广泛存在于海洋生物体内,比如海肾、海蜇、水螅等。腔肠素是天然荧光素中最普遍的,它可作为很多荧光素酶的底物。目前研究得最透彻的以腔肠素为底物的荧光素酶来源于海肾(Renilla),即海肾荧光素酶(Renilla reniformis,简称Rluc)。腔肠素的工作原理腔肠荧光素是一个分子量约400 Da 的疏水基团,它可以自由穿越细胞膜。在一个以荧光素/荧光素酶为基础的系统中,腔肠素作为以水母发光蛋白为代表的海洋发光蛋白的辅助因子,与水母发光蛋白进行稳定的结合,引起脱辅基水母发光蛋白和腔肠荧光素之间的共价键破裂,腔肠荧光素(Coelenterazine)被氧化脱羧,形成腔肠酰胺(Coelenteramide),释放出CO2,同时发出波长为469nm的蓝色生物荧光,该荧光可用博鹭腾高灵敏度管式/板式发光检测仪进行测定。图1.腔肠素/水母发光蛋白检测Ca2+机制水母发光蛋白一旦和Ca2+反应即丧失发光功能,因此当一部分水母发光蛋白与Ca2+反应时,被消耗水母发光蛋白的发光强度能反映出Ca2+浓度变化,而且被消耗的水母发光蛋白的发光强度与Ca2+浓度之间存在线形关系。如同萤火虫荧光素酶,海肾荧光素酶的活性也不需要翻译后修饰,一旦翻译完成即可行使遗传报告基因的功能。但是与萤火虫荧光素酶又有差异,即腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更利于生物荧光的研究。技术小结由于Ca2+在生命活动的各种生理生化反应、疾病的发生和发展中都扮演着极其重要的角色,而游离的Ca2+浓度变化又与细胞的功能、信号转导乃至细胞的凋亡有密不可分的联系,因此,研究如何检测细胞内游离Ca2+浓度显得尤为重要。Ca2+选择性微电极测定法不需要使用指示剂,但是穿刺过程会损伤细胞,进而引起渗漏。同位素示踪法简单,但是静态效果差,还需要注意同位素效应和放射效应问题。核磁共振法和荧光探针法都需要特定的仪器,成本较高。水母发光蛋白检测法不需要激发光源,因而消除了细胞自发荧光的干扰,背景荧光远低于使用钙离子指示剂的荧光。另外腔肠素具有疏水性,易于通过细胞膜,适于全细胞的研究。 腔肠素/水母发光蛋白的生物荧光反应对Ca2+浓度的变化非常敏感,但是这种发光相对较弱,因此需要使用高灵敏度的发光检测仪进行检测。
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