室内细菌检测

2020年庚子鼠年，一场突如其来的疫情席卷武汉，蔓延全国，经过日夜奋战和不懈努力，科学和医务工作者以最快的时间找到了疫情元凶——新型冠状病毒。 我们赖以生存的环境空气中存在着大量我们用肉眼观察不到的微小生命体，它们尺寸极小，基本在微米或纳米级别，这些空气微生物种类多样，包括细菌、真菌、病毒以及支原体等微生物，例如真菌孢子粒径1-30μm，细菌为0.25-8μm，病毒则在0.3μm以下。空气中除了一些自然的微生物外，还有许多致病微生物，其中细菌有160多种，真菌600多种，另外还有几百多种病毒。正常情况下，人类可以靠强大的免疫系统隔绝大部分致病微生物的入侵，与它们达成长期的平衡。然而由于人类不良行为而引入一些极度危险的病毒，它们依附于环境空气的气溶胶系统对人体器官造成侵害，人类免疫系统则需要很长时间才能清除和战胜它。在这种情况下，人类需要搞清某些特定空间中是否存在某些致病微生物，或者搞清楚这些致病微生物的含量是多少，是否能够引起感染等等诸多问题。因此空气微生物含量的检测在当今的社会尤其是医疗卫生行业尤为重视，空气微生物含量指标是gmp食品药品生产管理规范中洁净空间、医院消毒卫生标准中洁净环境以及公共场所的重要评价标准之一。涉及的相关标准包括《gmp药品食品生产质量管理规范》、gb15982-2012《医院消毒卫生标准》、gb9663-1996《旅店业卫生标准》、gb9673-1996《公共交通工具卫生标准》、gb15982-2012《医院消毒卫生标准》、gb/t 18883-2002《室内空气质量标准》等。△洁净区微生物监测动态标准△各类环境空气、物体表面菌落总数卫生标准△各类公共场所卫生标准目前，gmp药品食品生产质量管理规范规定的采样方法包括三类，分别是定量空气浮游菌采样法、沉降菌法、表面取样法，分别对应浮游菌、沉降菌、表面微生物三大指标。定量空气浮游菌采样法浮游菌沉降菌法沉降菌表面取样法表面微生物医疗卫生场所以及各类公众场所则大多采用空气浮游菌采样和沉降菌采样两种方法进行评价。沉降法的原理是利用含有微生物的尘粒或液滴因重力自然下降至暴露的培养基表面进行采集；表面取样法则是通过擦拭或接触物体表面的方式采集表面微生物；定量空气浮游菌采样法的原理是通过采样仪器抽取含有微生物的一定量空气，将采集气流以一定的速度撞击到培养基表面实现采样。其中浮游菌和沉降菌的测试方法和规则对应的标准分别为gb/t 16293-2010《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》和gb/t 16294-2010《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》。gb/t16293采用的原理为撞击法机理。gb/t 16294采用的原理为自然沉降原理。浮游菌采样的一般步骤是首先在测试前对采样仪器能与样气接触的表面以及培养皿表面进行严格消毒，其次消毒完成后在不放入培养皿的前提下进行时间不小于5min的消毒剂蒸发过程，第三步设计采样流量和时间，采样口置于采样点进行采样。沉降菌采样的一般步骤则比较简单，在采样过程中只用到培养皿。其一般过程包括第一、测试前培养皿表面的严格消毒；第二、将培养皿按照采样布点放置，而最后一步便是暴露采样，其中规定了静态测试时暴露时间大于30min，动态测试时暴露时间不大于4h。采样完毕后，两者的操作步骤相同，均在培养箱中恒温培养一定时间，最后进行菌落计数。而测试规则中规定了测试条件、测试状态、测试时间以及采样布点等的具体要求。测试条件要求在测试前应对洁净室（区）进行预先测试，以便提供测试悬浮粒子的环境条件，其中规定了在无特殊要求时，环境的温度在18-26℃，相对湿度在45-65%为宜。测试状态中则可进行静态和动态两种状态的测试。空态或静态测试时，单向流洁净室净化系统运行不少于10min后开始。非单向流，不少于30min后开始。静态b测试时，要求单向流系统中生产操作人员撤离并经过10min自净后开始。非单向流20min后开始。动态测试时应记录生产开始的时间以及测试时间。关于采样点数目和布点位置请参考gb/t16292-2010《医药工业悬浮粒子测试方法》，采样点位置的一般规定为工作区测点位置离地离地0.8m-1.5m左右，略高于工作面。送风口测点位置离开送风面30cm左右。浮游菌采样规定了最小采样量，而沉降菌采样则规定了最少培养皿数。△浮游菌和沉降菌最小采样量和最少培养皿数目前青岛众瑞智能仪器有限公司具有多款空气微生物采样和分析对标产品。众瑞相关产品

医生正在分离病菌标本 许医生表示，超级细菌并不可怕，滥用抗生素才是最可怕的 　　“超级细菌并不可怕，滥用抗生素才是最可怕的。”吉林大学白求恩第一医院检验科主治医师许建成说，2005年卫生部成立了全国细菌耐药监测网，目前吉林省吉林大学白求恩第一医院、吉林大学白求恩第二医院、吉林大学中日联谊医院、吉林省人民医院4家医院是这个监测网的成员单位，今年9月末开始启动监测超级细菌。 　　9月末吉林省已启动监测 　　吉林大学白求恩第一医院检验科主治医师许建成说，2005年，卫生部成立了全国细菌耐药监测网，目的就在于掌握我国抗菌药物应用于细菌耐药状况，制定相应管理措施，为临床抗菌药物选择提供技术支持。 　　“吉林省4家医院属于成员单位，9月29日我代表院里到北京参加‘全国多重耐药菌感染控制研讨会’，主要研讨的就是超级细菌问题。”许建成说，卫生部对超级细菌非常重视，已经对监测网内各成员单位下达了书面的监测和诊治指南，“9月末开始，吉林省4家医院开始启动监测超级细菌。” 　　传播通过手、物品接触 　　在北京开会期间，卫生部对参会人员进行了超级细菌的监测培训，许建成回到长春后，对本院工作人员进行培训。 　　“对于超级细菌的检测，吉林省也高度重视，9月30日，吉林省卫生厅召开了电视电话会议，专门部署了这项工作。”许建成说，超级细菌从今年6月开始引起国内外广泛关注，这种细菌的传播方式尚无研究报道，但根据患者感染状况以及细菌本身特点，可能主要通过密切接触，如污染的手和物品等方式感染。 　　超级细菌的临床特点，与其他多重药菌感染相似，许建成说，有一些患者属于易感人群：疾病危重、入住重症监护室、长期使用抗菌药物、插管、机械通气等。主要感染类型包括泌尿系统感染、伤口感染、医院获得性肺炎、血液感染、导管相关感染等。 　　监测篇 　　微生物室7人进行日常监测 　　对于超级细菌的出现，很多市民都充满了畏惧和好奇，医院对这种细菌如何监测呢? 　　27日，许建成将记者带到了该院的监测室。“对超级细菌的监测，只是细菌耐药监测中的细菌种类之一，我们日常监测的细菌种类非常多。”许建成说，医院每日都会采集住院患者分离出来的细菌，然后对各类细菌进行监测。对于超级细菌的监测，他表示目前由该院微生物室7名医务人员完成。 　　三步完成监测诊断工作 　　许建成说，超级细菌实验室诊断包括筛查、表型确认和基因确认三个步骤。 　　第一步：在细菌药物敏感性测定中，以美洛培南或亚胺培南纸片法(K-B法)或最低抑菌浓度(MIC)测定法对肠杆菌科细菌产酶情况进行初步筛查，如果抑菌圈直径达不到标准，即进入表型确认。 　　第二步：双纸片协同实验，当判定产金属酶时，即进入基因确证。 　　第三步：最终被锁定的细菌将送到中心实验室进一步确认，据了解，这种实验室是由国家统一设定的，不在我省。 　　在实验室记者看到，超级细菌的监测工作，跟所有的耐药细菌监测同属一个流程，没有特殊的仪器和设备。 　　治疗篇 　　两种药物对其有一定作用 　　从9月末监测开始，直到27日吉林省没有监测到超级细菌，对于这种细菌，很多市民都称它为“无药可救的病毒”，许建成说，“其实超级细菌并不可怕，最可怕的是滥用抗生素。”这种病毒之所以让人望而却步，是因为它具有极高的耐药性，目前，有两种抗菌药物对其有一定作用，一个是替加环素，另一个是多粘菌素。但是，随着这种细菌的自身发展，这两种药物未来也可能对其失效。 　　“细菌和抗生素就好比矛和盾，在不断的‘斗争’中，各自发展着。细菌这种东西遇强则强，随着抗生素的大量滥用，细菌自身正在不断壮大，最后可能导致无药可医。” 　　诊所打抗生素 药店买消炎药 　　在长春都很容易 　　长春市内抗生素的使用情况如何呢?27日，记者随机走访了多家诊所和药店，只要患者有需要，诊所就会给注射抗生素，药店抗生素消炎类药也可以随意购买。 　　27日上午10时许，长春市二道区某诊所，“我嗓子疼，流鼻涕，还有点发烧。”记者对诊所大夫说。“这次感冒挺严重，你打个针吧，打点消炎药两三天就能好。”大夫说道。“吃点药不行吗?我挺害怕打针的。”记者试探地说。“打针来的快，你能少遭罪，否则感冒不爱好。发烧严重了，还可能烧出肺炎呢!”看到大夫这么说，记者也不好再说什么。便以回家取医保卡为由，先行离开。 　　记者又来到一家诊所，医生问哪不舒服，记者又把感冒症状说了一次，此家诊所大夫也建议记者打点滴。“我们这的点滴比大医院的口服药都便宜，打点针好的快，光吃药如果不见好，再打针还得遭两次罪。”随后记者又走访了2家诊所，得到的结果都是劝记者打抗生素。 　　打针容易，那么买抗生素药品呢?抗生素药品也就是百姓俗称的消炎药。 　　27日中午，记者走访了重庆路附近的部分药店，发现抗生素消炎类药可以随意购买。 　　对比篇 　　90%的患者感冒后会选择消炎药 　　许建成说，国家通过监测发现，目前中国抗生素滥用情况十分严重。“抗生素其实就是老百姓说的‘消炎药’，就拿感冒来讲，90%的患者在有感冒症状后，都会选择使用‘消炎药’。” 　　在美国孩子高烧40℃也没打上消炎针 　　对于抗生素药品的使用，美国则要求得十分严格，许建成说他和家人曾在美国生活过一年，他感冒时想要买点消炎药非常困难。 　　有一次他几个月大的儿子高烧近40℃不退，他和妻子带孩子来到医院，希望能打一些消炎药，但是医院表示孩子并不是细菌性感染所以不能给注射，最终孩子也没有打上消炎药，两天后孩子自己就退烧了。 　　许建成说，一般来讲，感冒分病毒性和细菌性两种，美国规定如果是细菌性感染可以用抗生素，如果是病毒性的则不能使用抗生素。为此，在美国看病都必须先做化验。 　　外延篇 　　医院用抗生素正趋于规范 　　对于抗生素的使用，许建成说，医院和医生也存在着很大的责任。“以前医院存在以药养医的问题，为了经济利益，一些医院和医生拼命给患者开好药、开贵药，最终导致抗生素大量滥用。”国家在监测到这种情况后，近年来已经采取各种措施进行制止。许建成提到，以他们医院为例，目前医院对医生开药进行了限制，实行分级制。“医生开药前必须严格遵循化验单，根据感染情况开抗生素，普通医生只能开一般性质的抗生素，如果要开更好、更贵的药，必须向上一级申请。”因此，抗生素在医院内的使用正在被进一步规范。 　　牛肉和牛奶中也可能含抗生素 　　抗生素的滥用最终导致的结果，可能就是“无药可用”，许建成认为，中国一定要进一步加强对抗生素类药品的监管力度，监管部门也应该承担起应有的责任。 　　但是目前一些百姓也提出一些质疑，“我从来都不吃药，为什么到医院检查耐药性很高呢?”许建成说，这种耐药性可能是从食品上来的，为了得到更大的经济效益，一些饲养企业在牲畜、家禽生长阶段喂食了大量抗生素，当这些牲畜和家禽被百姓食用后，百姓身体内就会获得这些抗生素，随即产生很高的抗药性。“以牛为例，饲养者都会在其饲料中加一些复方新诺明，这样牛就不易生病，但是牛肉和牛奶中会含有抗生素。”还有就是鱼类，饲养者在其还是鱼苗时，就播撒大量抗生素，防止其减产死亡，可想而知当我们将这些鱼端上餐桌时，有多少抗生素被吃到肚子里。

青岛市立医院东院重症监护室为防止超级细菌，医护人员严格执行洗手等操作 　　10月26日，中国疾病预防控制中心通报国内发现3例超级细菌(NDM-1耐药基因细菌)病例，记者从青岛市有关部门获悉，截至目前岛城还没有送检样本，也暂时未发现“超级细菌”。据了解，青岛各大医院具备发现“超级细菌”的条件，但还不能发现NDM-1细菌，发现疑似病例后将逐级上报。10月27日，卫生局还下发了通知，要求各医院严格控制抗生素类药物的使用，并建立起监测网严防“超级细菌”。 　　■青岛情况 　　目前还没有送检样本 　　“岛城目前没有发现 NDM-1超级细菌。”10月27日，市疾控中心相关负责人介绍说，目前他们没有收到送检样本，暂时没有发现“超级细菌”。 　　据了解，如果临床发现患者明显是细菌感染，使用抗生素后没有效果，特别是碳青霉烯类治疗无效时，就要考虑感染“超级细菌”的可能性，需及时采集临床样本进行细菌检测。“碳青霉烯类抗生素是抗菌谱最广、抗菌活性最强的非典型β-内酰胺抗生素。”市立医院医学检验部主任宋卫青介绍，如果出现对该类抗生素的抗药性，则很有可能是超级细菌，需要立即上报。 　　“目前青岛各大医院能发现超级细菌，但不能发现NDM-1细菌，发现疑似病例应立即上报。”青医附院副院长孙运波介绍，发现送检不会耽误患者的治疗。市卫生局相关负责人表示，下一步将把岛城重点医院列入监测范围，发现疑似病例后要逐级上报。 　　■严密布控 　　建市级细菌耐药监测网 　　市卫生局根据省卫生厅的相关通知要求，本市将加强对细菌耐药的检测，组建市级细菌耐药监测网，加强对免疫力低下或危重患者的检测和监测。 　　据介绍，加强抗菌药物合理应用，是降低细菌耐药的有效措施之一。同时，卫生行政部门要加大对医疗机构的监督检查力度，将抗菌药物合理应用情况作为对医疗机构和医务人员考核的重要指标，加强抗菌药物合理使用管理。 　　记者从通知上了解到，“泛耐药肠杆菌科细菌”可以使免疫力低下或者危重患者在一定条件下发生感染性疾病，加强对这些患者的检测和监测是及早应对的有效措施。对免疫力低下或危重患者，特别是有相关流行病学史患者，医疗机构要注意做好致病微生物检测和细菌耐药监测，及时采集标本，做到早发现 、早诊断、早治疗。卫生行政部门将加强辖区细菌耐药监测工作，组建市级细菌耐药监测网。此外，加强医院感染预防与控制也是很重要的。 　　■专家释疑 　　超级细菌不会在普通人中传播 　　“市民根本不用恐慌，超级细菌不会在普通人中传播。”401医院重症监护室李主任介绍，超级细菌是条件致病菌，只有在患者身体免疫力低的时候才有可能感染，不会在普通人中传播，也不会造成大规模暴发，市民可以放心。记者咨询了市立医院等其他几家医院的专家，均认为超级细菌不会在普通人中传播，提醒市民不必恐慌。 　　李主任表示，细菌耐药性并不是新的问题，临床上也发现过其他泛耐药细菌，即对多种抗生素耐药的细菌，条件好的医院也都能应付得了。市立医院东院重症监护室主任曲彦介绍，越来越多的市民盲目使用抗生素，导致耐药性细菌出现的病例增多。 　　“如果市民注意个人卫生习惯，如勤洗手等就能避免感染超级细菌。”曲彦介绍，洗手是最有效避免细菌传播的方法，在重症监护室内，为防止病人间细菌传播，护理人员每次操作都要先洗手。 　　儿童医院医务科主任孙广荣向记者介绍说，细菌感染导致的感冒有增加的趋势，在使用抗生素时一定要规范，孩子血项不高的话，两三天内可以不用，有病毒的抗病毒治疗就行了。到了后期孩子咳黄痰，高烧不退时可以考虑使用抗生素。孩子生病后家长最好先带孩子到医院检查，在医生的指导下正确用药。青医附院副院长孙运波表示，成人也不能对抗生素产生依赖，抗生素永远是辅助治疗手段。 　　新生儿为啥感染超级细菌 　　“新生儿怎么还会感染超级细菌呢?”记者在采访时，一名家长看到国内俩婴儿感染有些吃惊。儿童医院医务科主任孙广荣向记者介绍说，如果母亲体内有了超级细菌，细菌就可以传给孩子，而是否发病主要是看肌体的免疫功能，由于新生儿免疫力低下，所以就很容易被感染，而母亲之所以没有被感染是因为其抵抗力比较强，不会表现出来。 　　官方推荐六类药物 　　记者从市卫生局获悉，为了防控耐药细菌，卫生部在全国建立耐药细菌监控网络，要求各地发现“超级细菌”要在12小时内报告。 　　此外，卫生部还推荐了替加环素、多粘菌素、碳青霉烯类、氨基糖苷类和氟喹诺酮类、磷霉素这6类药物。具体推荐的治疗方案包括：对于轻 、中度感染，敏感药物单用即可，如氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磷霉素等，也可以联合用药，无效患者可以选用替加环素、多粘菌素 对于重度感染，根据药物敏感性测定结果，选择敏感或相对敏感抗菌药物联合用药。