全自动机械臂固相萃取仪

1 前言 呕吐毒素主体成分为DON（脱氧雪腐镰刀菌烯醇），属于单端孢霉烯族化合物，在自然界中广泛存在，在食品中常见的真菌毒素。呕吐毒素具有很高的细胞毒素及免疫抑制性质，对人类的健康构成很大的威胁。世界各国对食品和饲料中的呕吐毒素都有严格的限量标准。2 实验部分2.1 实验原理 《GBT 23503-2009 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法》2.2 试剂与仪器设备 除非另有规定，仅使用分析纯试剂、蒸馏水。 2.2.1 试剂 甲醇(CH3OH)：色谱纯；乙腈：色谱纯；脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准品：纯度 ≧ 98 %；脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准储备液：准确称取一定量的脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准品，用甲醇溶解，配成0.1 mg/ml的标准储备液，在-20 ℃保存，可使用3个月；脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准工作液：根据使用需要，准确吸取一定量的脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准储备液，用流动相稀释，分别配成相当于0.1 μg/ml、0.2 μg/ml、0.5 μg/ml、1.0 μg/ml、2.0 μg/ml、5.0 μg/ml的标准溶液，4 ℃保存，可以使用7天；脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和柱；玻璃纤维滤纸：直径11 cm，孔径1.5 μm。 2.2.2 仪器和设备 SPE 400 全自动机械臂固相萃取仪（济南海能）；HN200多功能氮吹仪（济南海能）；LC7000高效液相色谱仪(济南海能)；天平；均质机；离心机量筒或移液管；微量移液器100ul-1000ul；10ml/20ml注射器；空气压力泵。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/08/201608291517_607290_3060158_3.jpg2.3实验前处理 2.3.1 试样制备与提取称取25 g (精确到0.01g)面粉试样于100 mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，转移至均质杯中，高速搅拌2 min。定量滤纸过滤后以玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清，收集滤液于干净的容器中。2.3.2 活化 将免疫亲和柱置于SPE 400色谱柱位置，仪器自动准确移取超纯水3毫升注入色谱柱，流速1滴/s，弃去全部流出液。 2.3.3 上样与淋洗 仪器准确移取滤液2.0 ml，根据设置参数，使溶液以约1滴/s的流速通过免疫亲和柱，直至空气进入亲和柱中

在分析化学中，尤其是复杂基质样品的分析，如食品安全，环境，生物医药等，样品前处理是一个非常重要的步骤。样品前处理的好坏不仅直接影响分析结果的灵敏度和重现性，而且还影响分析仪器的使用寿命和维护成本。再加上，若是能有一款自动化的前处理净化仪器设备，将能减轻检测实验室检验员的工作业务量，为此很多分析科学家认识到样品前处理的重要性，不断地研究，改进样品前处理的技术和方法，以提高它的准确性，有效性，快捷性。 现将人工净化处理和全自动机械化净化处理对比如下： 一、人工净化处理 1. 人工前处理流程 如图1http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015052313244920_01_2275853_3.png 图1.人工前处理大概流程图 2.存在的问题及危害 a) 对人员要求高，多个样品进行，稍不留意就会发生添加顺序混乱的情况，从而导致所有样品作废，必须重新萃取。 b) 重现性无法保证。同样的负压条件，但每根固相萃取柱差异导致每根SPE 的流速都不同。 c) 实验室操作人员的安全性。手动操作需要人为添加溶剂，必须有人看管，长时间暴露于弥漫着有机溶剂的实验室中，对实验室操作人员的健康带来巨大的危害。 二、全自动固相萃取净化仪器 1. 全自动固相萃取仪 ：全自动固相萃取仪专门针对小体积样品中有机物残留，如农药残留、兽药残留、食品添加剂、药物等分析而设计的前处理设备。全自动进行萃取柱的活化、上样、淋洗、吹干、洗脱，使固相萃取变得更安全、更轻松。全自动固相萃取净化仪器见下图2。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015052313290498_01_2275853_3.png 图2. 全自动固相萃取净化仪 2.针对全自动固相萃取仪的应用优势分析 a).多通道同时活化、上样、洗脱与收集。效率高一致性好，提高实验速度和平行性，见图3；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015052313310591_01_2275853_3.png 图3 多通道同时净化图 b). 采用高精度注射泵，正压上样，保证稳定的流速，大大提高了分析结果的精密度，见图4；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015052313323762_01_2275853_3.png 图4. 高精度注射泵 c). 采用独特的倒置上样模式，保证样品的全转移；采用样品管喷淋清洗技术，耗用有机溶剂量更少，样品管壁清洗得更干净，降低了交叉污染的几率，见图5；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015052313335254_01_2275853_3.png 图 5. 倒置上样图 d). 可选择串柱模式，比如：将C18反相柱和SCX强离子交换柱叠加使用，见图6；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015052313352268_01_2275853_3.png 图6. 串柱图 e). 内置加热浓缩功能，大大提高样品前处理效率，见图7；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505231336_547165_2275853_3.png 图7. 加热浓缩分解图 通过详细专业比较，小伙伴们，怎么选择不用再重复讲了吧！ 试想一下，如此方便、快捷，安全、环保，省事、稳定，而且准确，复现性好等性能优良的设备，谁不想拥有一台呢？