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今天有个学生测试两个膜蛋白之间有无相互作用。目前测试分子相互作用方法技术有很多,但是很多都是很复杂和麻烦了,分子相互作用也是很热门的技术。但是有些时候可以比较简单的,采用动态光散射测试生物大分子粒径。这个很好理解,目前我们这台仪器是动态光散射,根据布朗运动,利用分子运动快慢判断其粒径大小。分子越小,布朗运动越快,分子越大,运动越慢。首先分别测试出A和B两个膜蛋白的粒径,然后将两者混合,再测试粒径。如果粒径是A+B的话说明这两个有相互作用。缺点:1:动态光散射只是能够简单定性判断一下,A和B有没有相互作用,不能够精确计算其相互作用的解离常数,可提供的数据参数少。2:不适合做小分子。其能够识别范围都是1nm以上的,小化合物分子无法测试3:对样品纯度和准确性要求较高,无法测试复杂混合样品优点:简单快速!!!与目前其他测试技术相比的明显优势,且基本没有额外的消耗成本。纯粹简单的光学原理,测试非常快,30min~60min就可以完全测试结束,而且技术简单易理解。
大家好,我想在这和大家一起探讨一个问题: 首先,我们见到了很多有关用CE方法求两者(如小分子和大分子)相互作用结合常数的文献,无论是大分子进样还是小分子进样,都可用一种电渗流标记物(中性内标)与分析物的表观电泳淌度进行数据计算,最后求得结合常数。在这里大分子的有效电泳淌度是通过其表观电泳淌度和内标物的电泳淌度求出的。 那我想问一下,要是分析物是多种大分子的混合物,小分子在一定程度上都和它们相互作用,那么在这同一个体系中,大分子混合物进样,体系中也加入一种内标物。那么还能否在这一个体系中求出多种大分子分析物的表观电泳淌度呢? 对于多组分体系,我们经常见的是用CZE方法对其进行分离,我没见过上述描述的这种情况。在这方面文献看得不是很多,希望有看过懂得这方面的“老师”指教,我在这先谢各位了。
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