药品还原型谷胱甘肽中杂质检测方案(毛细管电泳仪)

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上海通微分析技术有限公司Unimicro (Shanghai) Technologies Co.， Ltd.Application NoteAN0425-ZY0029 欧洲药典：毛细管电泳-紫外检测法分离检测谷胱甘肽中的杂质 1.背景介绍 谷胱甘肽由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸缩合而成，几乎存在于体内的每一个细胞中，是机体内的重要活性物质，是人和动物体内参与氧化还原代谢的一种重要的三肽。作为生物体内的非蛋白巯基化合物，谷胱甘肽主要有还原型谷谷甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)两种，在机体中大量存在并起主要作用的是 GSH。它具有清除自由基、解毒、抗病毒、抗肿瘤、保护肝脏、促进铁质吸收及维持红细胞的完整性、维持 DNA 的生物合成、细胞的正常生长及细胞免疫等多种生理功能。由于 GSH 本身的解毒和抗氧化能力，使得谷胱甘肽具有重要的保肝护肝作用，临床上应用 GSH 作为保肝的重要药物成分，适用于脂肪肝、中毒和病毒性肝炎等辅助治疗。通过发酵工程生产的还原型谷胱甘肽中主要存在L-半胱氨酸-L-甘氨酸二肽 (L-Cys-L-Gly， 杂质A)、L-半胱氨酸(L-Cys， 杂质 B)、GSSG(杂质C)、L-y-谷氨酸-L-半胱氨酸二肽(y-Glu-L-Cys， 杂质D)和未知结构杂质(杂质E)。本实验以《European Pharmacopoeia9.0》中标准方法为参考，采用毛细管区带电泳-紫外检测法，以苯丙氨酸(Phe)为内标物对还原型谷胱甘肽中的杂质进行了分离检测。 2.样品制备 参考《European Pharmacopoeia 9.0》 3.测试条件 仪器 CE-1000毛管管电泳仪 毛细管 熔融石英毛细管(内径75um)， 50cm (总长70 cm) 分离电压 20kV 4.测试结果 RS(c) 图1标准电泳图 5. 结论 本实验以欧洲药典为参考，使用 CE-1000 毛细管电泳仪，采用毛细管区带电泳-紫外检测法实现了谷胱氨肽中五种杂质的分离检测。该方法效果良好，符合欧洲药典中对系统适用性的规定。 6.配置列表 仪器配置 CE-1000 毛细管电泳仪(包括主体模块、柱温箱和高压电源) Unimicro ChromStation 色谱工作站 www.unimicrotech.com.cn TEL： E-mail：info@unimicrotech.com.cn 谷胱甘肽由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸缩合而成，几乎存在于体内的每一个细胞中，是机体内的重要活性物质，是人和动物体内参与氧化还原代谢的一种重要的三肽。作为生物体内的非蛋白巯基化合物，谷胱甘肽主要有还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）两种，在机体中大量存在并起主要作用的是GSH。它具有清除自由基、解毒、抗病毒、抗肿瘤、保护肝脏、促进铁质吸收及维持红细胞的完整性、维持DNA的生物合成、细胞的正常生长及细胞免疫等多种生理功能。由于GSH本身的解毒和抗氧化能力，使得谷胱甘肽具有重要的保肝护肝作用，临床上应用GSH作为保肝的重要药物成分，适用于脂肪肝、中毒和病毒性肝炎等辅助治疗。通过发酵工程生产的还原型谷胱甘肽中主要存在L-半胱氨酸-L-甘氨酸二肽（L-Cys-L-Gly，杂质A）、L-半胱氨酸（L-Cys，杂质B）、GSSG（杂质C）、L-γ-谷氨酸-L-半胱氨酸二肽（γ-Glu-L-Cys，杂质D）和未知结构杂质（杂质E）。