熟地黄中毛蕊花糖苷含量检测方案(液相色谱仪)

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文档编号： LC-K2025-01-200502 熟地黄中毛蕊花糖苷含量的测定高效液相色谱法 一、摘要 本文使用悟空 K2025高效液相色仪仪测定熟地黄中毛蕊花糖苷的含量。连续进样7针，其峰面积的重复性完全满足2020年版《中国药典》的要求。 二、背景 熟地黄为生地黄的炮制加工品，收录于2020年版《中国药典》中，其补血滋阴，益精填髓。用于血虚萎黄，心悸怔忡，月经不调，崩漏下血，肝肾阴虚，腰腰酸软，骨蒸潮热，盗汗遗精，内热消渴，眩晕，耳鸣，须发早白。其中在2020年版《中国药典》规定，可利用高效液相色谱法测定熟地黄中毛蕊花糖苷的含量以控制药物质量。 三、实验过程 1范围 适用于熟地黄中毛蕊花糖苷含量的测定 2原理 毛蕊花糖苷易溶于乙腈-0.1%醋酸溶液(16：84)的流动相中，在334nm处有紫外吸收，使用高效液相色谱法进行检测，外标法定量。 3试剂与材料 3.1水：符合GB/T6682的一级水； 3.2甲醇：色谱纯； 3.3醋酸：优级纯； 3.4 0.22um 微孔尼龙滤膜。 3.50.1%醋酸水溶液：吸取1mL醋酸用一级水定容至1L， 过 0.22um滤膜。 4仪器与设备 4.1高效液相色谱仪：K2025P2 二元高压输液泵、K2025 AS 自动进样器、K2025 CO 柱温箱、K2025 UVD 紫外-可见光检测器； 4.2分析天平：精确到0.0001g； 5测定步骤 5.1对照品溶液的制备 取毛蕊花糖苷对照品适量，精密称定，加流动相制成每 1ml含10ug的溶液，即得。 5.2样品前处理 取本品最粗粉约2g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入甲醇100ml， 称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50ml， 减压回收溶剂近干，残渣用流动相溶解，转移至10ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 5.2测定 5.2.1色谱条件： a)色谱柱： C184.6×250mm， 5um或者相当的色谱柱； b)流动相：乙腈-0.1%醋酸溶液(16：84) c)柱温：30℃； d) 进样量：20uL； e)流速：11mL/min： f) 波长：334nm； 5.2.2空白试验 取流动相作为空白，上机进行检测。 6结果计算 熟地黄中毛蕊花糖苷的测定浓度c， 按公式(A.1)计算： Ai---对照品峰面积； A---供试品的峰面积(去除空白中的出峰)。 Ci---对照品的浓度 7色谱图及重复性结果 图1 对照品色谱图 图2 进样7针对照品色谱图的叠加图 表1进样7针对照品重复性计算结果 对照品 第1针 第2针 第3针 第4针 第5针 第6针 第7针 平均值 SD RSD% 保留时间 23.26 23.237 23.187 23.222 23.158 23.158 23.228 23.207 0.040 0.172 峰面积 238.739 237.994 239.513 239.211 240.648 237.989 237.643 238.820 1.060 0.444 图3 供试品色谱图 图4进样7针供试品色谱图的叠加图 表2进样7针供试品重复性计算结果 供试品 第1针 第2针 第3针 第4针 第5针 第6针 第7针 平均值 SD RSD% 保留时间 23.347 23.300 23.267 23.302 23.227 23.125 23.155 23.246 0.082 0.351 峰面积 614.168 615.778 612.781 615.768 614.859 612.476 615.137 614.424 1.348 0.219 8结论 对洗脱条件进行重复性测试，进样7针对照品保留时间的 RSD 为0.172%；进样7针对照品峰面积的RSD 为 0.444%，满足药典要求小于2.0%。进样7针供供品，保留时间 RSD为0.351%；进样7针供试品峰面积的 RSD 为 0.219%，满足药典要求小于2.0%。 一、摘要一、摘要本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定熟地黄中毛蕊花糖苷的含量。连续进样7针，其峰面积的重复性完全满足2020年版《中国药典》的要求。二、背景熟地黄为生地黄的炮制加工品，收录于2020年版《中国药典》中，其补血滋阴，益精填髓。用于血虚萎黄，心悸怔忡，月经不调，崩漏下血，肝肾阴虚，腰膝酸软，骨蒸潮热，盗汗遗精，内热消渴，眩晕，耳鸣，须发早白。其中在2020年版《中国药典》规定，可利用高效液相色谱法测定熟地黄中毛蕊花糖苷的含量以控制药物质量。