echo_zhang
第2楼2008/06/03
水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法
SPE柱:Cleanert PS柱(200mg/3ml)
样品处理:
称取5g经匀浆处理的样品于100ml离心管内,分别加入含有EDTA2Na的柠檬酸缓冲液30ml、20ml,混合震荡提取,合并上清液。
加入20ml正己烷和上清液于分液漏斗中,充分混合震荡5min,合并下层。
净化步骤:
以10ml甲醇,10ml水,5ml EDTA2Na活化PS柱,加入上清液,然后以10ml水淋洗小柱,抽干,最后以10ml甲醇洗脱目标物,并收集。
浓缩及定容:
浓缩:在旋转蒸发仪上减压浓缩,温度小于40℃
定容:加入1.0ml的1.36%的磷酸二氢钾溶液,将定容液进行HPLC分析
HPLC条件
色谱柱:MP C18
流动相:A:B=77:23
A:咪唑缓冲液—称取68.08咪,10.72乙酸镁,0.37EDTA2Na 溶于800ml水中,用冰乙酸调pH到7.2,加水定容到1000ml.
B:乙腈
注:含有EDTA2Na柠檬酸缓冲提取液:
取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307ml和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193ml混合均匀,向其中加入1.86gEDTA2Na,溶解后作为样品提取液。