【求助】内标标准曲线法

配制标准时所加内标和样品所加一样时是不会影响K植的，因为K值只是标准曲线算出的，和样品无关。样品里加的内标必须要和标准里加的一样，否则不能代入标准曲线计算。

内标法的优点有一个就是进样量等外部操作条件的要求不高，影响较小。

我也想了解

内标法
操作：
将已知量的内标样加入标准样品，制成混合标样，并配制一系列的已知浓度的工作标样。混合标样中标样与内标样的摩尔比不变。
注入色谱柱，以（标样峰面积/内标样峰面积）为响应值。
根据响应值与工作标样浓度之间存在的线性关系，即W=f×A，制成标准曲线。
将已知量的内标样加入未知样品，注入色谱柱，得到欲测组分的响应值。
根据已知的系数f，即可求出欲测组分的浓度。

内标法的特点：
操作过程中样品和内标是混合在一起注入色谱柱的，因此只要混合溶液中被测组分与内标的量的比值恒定，上样体积的变化不会影响影响定量结果。
内标法抵消了上样体积，乃至流动相、检测器的影响，因此比外标法精确。

很好。。。很全面。。。学习

液相色谱定量分析的基本原理
定量分析是在定性分析的基础上，需要纯物质作为标准样品。
液相色谱的定量是相对的定量方法，即：由已知的标准样品推算出被测样品的量。

液相色谱法定量的依据：
被测组分的量(W)与响应值(A)（峰高或峰面积）成正比,W=f×A。
定量校正因子(f)：是定量计算公式的比例常数，其物理意义时单位响应值（峰面积）所代表的被测组分的量。
由已知标准样品的量和其响应值可以求得定量校正因子。
测定未知组分的响应值，通过定量校正因子即可求得该组分的量。

定量分析常用术语：
样品（sample）含有带测物，供色谱分析的溶液。分为标样和未知样。
标样（standard）浓度已知的纯品。
未知样（unknow）浓度待测的混合物。
样品量（sample weight）待测样品的原始称样量。
稀释度（dilution）未知样的稀释倍数。
组分（componance）欲做定量分析的色谱峰，即含量未知的被测物。
组分的量（amount）被测物质的含量（或浓度）。
积分（integerity）由计算机对色谱峰进行的峰面积测量的计算过程。
校正曲线（calibration curve）组分含量对响应值的线性曲线，由已知量的标准物建立，用于测定待测物的未知含量。

常用的定量方法
标准曲线法，分为外标法和内标法。
外标法在液相色谱中用的最多。
内标法准确但是麻烦，在标准方法中用的最多。


外标法
用被测化合物的纯品作为标准样品，配制成一系列的已知浓度的标样。
注入色谱柱的到其响应值（峰面积）。
在一定范围内，标样的浓度与响应值之间存在较好的线性关系，即W=f×A，制成标准曲线。
在完全相同的实验条件下，注入未知样品，得到欲测组分的响应值。
根据已知的系数f，即可求出欲测组分的浓度。



外标法的优点：
操作、计算简单，是一种常用的定量方法。
无需各组分都被检出、洗脱。
需要标样。
标样及未知样品的测定条件要一致。
进样体积要准确。

外标法缺点：
实验条件要求高，如检测器的灵敏度，流速、流动相组成的不能发生变化；每次进样体积要有好的重复性。

内标法
操作：
将已知量的内标样加入标准样品，制成混合标样，并配制一系列的已知浓度的工作标样。混合标样中标样与内标样的摩尔比不变。
注入色谱柱，以（标样峰面积/内标样峰面积）为响应值。
根据响应值与工作标样浓度之间存在的线性关系，即W=f×A，制成标准曲线。
将已知量的内标样加入未知样品，注入色谱柱，得到欲测组分的响应值。
根据已知的系数f，即可求出欲测组分的浓度。
。

内标法的特点：
操作过程中样品和内标是混合在一起注入色谱柱的，因此只要混合溶液中被测组分与内标的量的比值恒定，上样体积的变化不会影响影响定量结果。
内标法抵消了上样体积，乃至流动相、检测器的影响，因此比外标法精确。

学习啦……谢谢各位楼主……

我觉得会跟进样量有关,内标物质是和分析物质性质相似,但不可能绝对的相等,内标曲线法没有包括内标物质的浓度的响应曲线校正,所以要求加入等量的内标物质.所以当进样量不同时对定量的准确性产生影响的应该是内标物质的响应和待测物质的响应差异.如果在某种条件下内标物质的浓度响应斜率和待测物质的浓度响应斜率差很大时,结果会导致同一溶液不同进样量的偏差.

也想知道啊