【求助】请教这个物质用什么液相条件走呢？急死了

爱莫能助，只能帮您顶一下……

先要做一个紫外扫描看看有确定波长,再看看他的溶解性,

没有全波长紫外扫描的家伙！
另外我试过的也不少了
我怀疑是流动相的问题
就是不知道从哪里下手

这个样品易溶解于乙酸乙酯
跟甲醇溶解性不好

最好用分光光度计扫描一下图谱，如果没有可利用UV检测器的波长扫描功能，看一下最大吸收，然后再摸条件；当然了，有了DAD检测器一切都简单了。

没有分光光度计 你去网上找找看看他的吸收波长，波长不确定你怎么调流动相也没有用阿

建议楼主做以下动作：
1、寻找合适的流动相和溶剂
看你这个物质的结构和你现在的实验情况，这个物质应该是亲油大过亲水，不知道你用的流动相中水的比例是多少，建议增加有机相的比例或者用纯有机溶剂做流动相；至于溶剂，最好是用流动相，实在不行，也要找一个能与流动相互溶的溶剂，免得样品在流动相里面析出，堵塞柱子
2、确定最大吸收波长
确定最大吸收波长，一般是用全波段紫外连续扫描，若楼主没有全波段连续扫描，看有没有紫外分光光度计，若有，可取样品溶于上一步确定的溶剂中，于分光光度计上测定吸光度，波长从最小波长一直调整到最大波长，每1nm测一个吸光度数据，这样也相当于一次全波段扫描了，取吸光度最大的那个波长作为测量波长，只是这样做太麻烦了一些，不过也不失为一种方法；如若楼主连紫外分光也没有，那就只有在HPLC上一个波长一个波长的试了，这样做比上一个方法更麻烦，若果真这样，那还不如送样出去扫连续的紫外
3、改变样品浓度
有可能是你的样品浓度太稀了，可在样品溶解度范围内适当加大样品浓度，看看是否有改善
4、加点三乙胺试试
这本是改善碱性物质拖尾峰的办法，对你这种情况可能不适用，但我担心可能是峰浓度太小，被拖尾拖掉了，这一条只作参考

谢谢hrcren的热心相助！我用甲醇/水的比例为80：20，乙腈/水的比例为80：20.也可能是我进样的浓度太低，也可能是波长就没有选对，所以什么像样的峰行都没有。我再找找相似的物质吧！希望能找到！

70%乙腈水在254nm应该有吸收的.如要样品的溶解度不好,用DMF溶解,在360nm做一下就可以看得到,你这个产品又不复杂!

amigo365 发表:

大家好！
我最近实验遇到一个这样的物质，用甲醇/水的流动相走，没有正常的峰出现；用乙腈/水也是这样；波长试过254，285，300，330，360；都是这样。不知道该加缓冲盐，还是怎么弄，我开发方法没有什么经验！请大家指教！