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【每周一问】比色皿宽度及浓度大家谈

紫外可见分光光度计(UV)

  • 分光广度法在化学分析中运用是很成熟很稳定的方法,多数仲裁方法都采用。好像按照理论,是朗波定理:在低浓度情况下,吸光度和容易浓度成正比;我想请教大家:
    1:在浓度高到什么程度及吸光度高到多少,比方1.5之后,这个关系就不成立啦,不是线性啦呢?也是说浓度大概在多少这个方法比较合适?
    2:很多测定中,比方铝基中猛含量,测定比色的时候要求采用3cm的比色皿,意思是不是它在525nm强度太大,害怕用1cm的造成这个关系不成立啦呢?当然,要求采用0.5cm大家都知道是浓度低,强度弱。我就是不明白用3cm和2cm的是什么道理。还有,一般的722是怎么实现改变比色皿宽度的插槽的
    不知道我表达明白没有,期盼高手指点
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  • SOMS课题组

    第1楼2008/08/25

    1:吸光度到1.5的反应在实际检测中很少有的,基本上反应体系到接近1附近,在标准曲线图上已经走平坦线了!!而比尔定律范围对于方法来说,要看不同的显色剂的,灵敏度,摩尔吸光系数等因素,一般这个范围可以通过制取标准曲线,下端看时候走平,或者上端是否走平来判断这个范围的!!
    2:你说的3厘米的比色皿,加长是为了提高原有的吸光度,比如1厘米的吸光度是0.033的,如果用3厘米的,同样溶液,吸光度则可以增加到0.1的吸光度,通常对于光度计来说仪器本身的误差0.1-0.8之间的数据飘逸和稳定性都是最好的!!有很多方法,是增加比色皿厚度,来降低检出浓度,但比色皿厚度越厚则对仪器要求越高,光透后接收灵敏度则要求更高!!不管是722还是所有的紫外可见光分光光度计,比色槽都可以换的,但不是换了就能正常工作的,要看仪器本身允许不允许,如果比色槽加的厚,而感光灵敏度不够的,加厚了也是白加!!

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  • dandinghe62

    第2楼2008/08/25

    回答:1只考虑吸光度值就可以了,要求吸光度值在0.2-0.8范围内精度高,浓度可以不考虑,浓度高了将溶液稀释至吸光度值在0.2-0.8之间即可,只是稀释倍数高了误差大点.
    2不是.用3cm的比色皿测量精度要比1cm的高,与线性关系无关.如果使用1cm的比色皿,打标准曲线时,标准溶液吸取量要比3cm的比色皿标准溶液吸取量大,这主要也是与吸光度值有关.不知道我表达明白没有,希望对你有帮助。

    oliver404 发表:分光广度法在化学分析中运用是很成熟很稳定的方法,多数仲裁方法都采用。好像按照理论,是朗波定理:在低浓度情况下,吸光度和容易浓度成正比;我想请教大家:
    1:在浓度高到什么程度及吸光度高到多少,比方1.5之后,这个关系就不成立啦,不是线性啦呢?也是说浓度大概在多少这个方法比较合适?
    2:很多测定中,比方铝基中猛含量,测定比色的时候要求采用3cm的比色皿,意思是不是它在525nm强度太大,害怕用1cm的造成这个关系不成立啦呢?当然,要求采用0.5cm大家都知道是浓度低,强度弱。我就是不明白用3cm和2cm的是什么道理。还有,一般的722是怎么实现改变比色皿宽度的插槽的
    不知道我表达明白没有,期盼高手指点

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  • 精灵鼠

    第3楼2008/08/26

    受教了,获益很大.我也一直受这个问题困扰,今天终于明白了.谢谢!

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  • IDONTKNOW

    第4楼2008/08/26

    其实根据朗伯比耳定律,吸光度与比色池宽度及浓度成正比,浓度过高,比色池选窄一点,浓度低,比色皿选宽一些,OK

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  • oliver404

    第5楼2008/08/27

    非常感谢,多谢指点

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  • 云中漫步

    第6楼2008/08/28

    《分析化学》教材中有“表6-7 不同T值时浓度测量的相对标准偏差”

    以及计算、推导出的结论:

    当透光率为15~65%(吸光度0.2~0.8)时,浓度测量的相对标准偏差都不太大。

    这就是吸光度分析中比较适宜的吸光度范围。

    ---------------------------------------

    我觉得教材上的内容比较陈旧,也许是按照“721分光光度计”那个年代来研究的......

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  • SOMS课题组

    第7楼2008/08/28

    现在的范围可以增加到0.1-1.0之间,标准偏差比较小,就是现在的721,好的机器也能做到这个范围!!

    chemweb 发表:《分析化学》教材中有“表6-7 不同T值时浓度测量的相对标准偏差”

    以及计算、推导出的结论:

    当透光率为15~65%(吸光度0.2~0.8)时,浓度测量的相对标准偏差都不太大。

    这就是吸光度分析中比较适宜的吸光度范围。

    ---------------------------------------

    我觉得教材上的内容比较陈旧,也许是按照“721分光光度计”那个年代来研究的......

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  • 月影寒潭

    第8楼2008/08/28

    一般的仪器都是数值居中时准确率高,就算好的721标时范围是0.1-1.0,为提高准确度也不会选择2边的数值。

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  • 云中漫步

    第9楼2008/08/28

    可是现在用的仪器A范围:0.0000 - 4.0000 (小数点后面4位)

    只有1cm的比色皿

    o(∩_∩)o...原来的理论是不是该修改啦?

    newshadow 发表:一般的仪器都是数值居中时准确率高,就算好的721标时范围是0.1-1.0,为提高准确度也不会选择2边的数值。

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  • 美食城

    第10楼2008/08/29

    1:在浓度高到什么程度及吸光度高到多少,比方1.5之后,这个关系就不成立啦,不是线性啦呢?也是说浓度大概在多少这个方法比较合适?
    答:一般的情况下测量的吸光度在0.2~0.8范围内比较准确,超过这个范围误差就大,这是需要换用光路短的比色皿,然后在乘以相应的倍数。
    2:很多测定中,比方铝基中猛含量,测定比色的时候要求采用3cm的比色皿,意思是不是它在525nm强度太大,害怕用1cm的造成这个关系不成立啦呢?
    答:通常情况下使用1cm的比色皿,当显色物质浓度小的时候吸光度低压0.2时就要换用2cm或3cm的比色皿。

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