仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

【求助】土壤蛋白酶 茚三酮比色法

  • lixiaohui012
    2008/08/27
  • 私聊

土壤固体废弃物监测

  • 最近在做土壤蛋白酶,可是做了几次提出来的待测液体在比色的时候总是茶色,不知道是为什么? 我是按照关松萌的土壤酶及其研究法上的茚三酮比色法做的,不知道问题到底出在哪里,希望大家能给我指点迷津,方便的话可以给我发邮件,我的邮箱是 xiaoyu589@163.com 谢谢啦!
  • 该帖子已被版主-简单加2积分,加2经验;加分理由:鼓励新手!!
    +关注 私聊
  • 简单

    第1楼2008/08/27

    提取液有颜色很正常,身边人都出现了这种情况!采用活性炭吸附颜色!
    再不影响实验的前提下,也可稀释提取液,减少该颜色的影响!
    注:不代表专家意见!

0
    +关注 私聊
  • lixiaohui012

    第2楼2008/08/27

    我做的提取液有颜色,用水浴加热后还是茶色。问题到底出在哪里啊?请各位帮忙啊!

0
    +关注 私聊
  • liu999999

    第3楼2008/08/28

    其中所含的有机质颜色,这对实验构成了麻烦。
    可能没有太好的办法,只好降低吸液量了。

    lixiaohui012 发表:我做的提取液有颜色,用水浴加热后还是茶色。问题到底出在哪里啊?请各位帮忙啊!

0
    +关注 私聊
  • lixiaohui012

    第4楼2008/08/28

    多谢各位的帮忙。我已经减少吸液量了,但是水浴后仍是茶色啊。水浴后按照常理不应该是蓝色么?再次请教一下,你们用的是什么方法测定土壤蛋白酶的?我用的茚三酮比色法,一直没有做出结果。多谢多谢。

0
    +关注 私聊
  • liu999999

    第5楼2008/08/28

    你用的茚三酮已经失效了,重新换一瓶吧。

    lixiaohui012 发表:多谢各位的帮忙。我已经减少吸液量了,但是水浴后仍是茶色啊。水浴后按照常理不应该是蓝色么?再次请教一下,你们用的是什么方法测定土壤蛋白酶的?我用的茚三酮比色法,一直没有做出结果。多谢多谢。

0
    +关注 私聊
  • lixiaohui012

    第6楼2008/08/28

    多谢帮忙。但是应该不可能是茚三酮的问题,因为我标线做出来了啊。多谢

0
    +关注 私聊
  • liu999999

    第7楼2008/08/28

    那可能是蛋白酶含量太低了。

    lixiaohui012 发表:多谢帮忙。但是应该不可能是茚三酮的问题,因为我标线做出来了啊。多谢

0
    +关注 私聊
  • lixiaohui012

    第8楼2008/08/28

    是这样的原因么?我的土样的氮含量比较高,我还以为蛋白酶的含量会高呢。多谢你的解答。

0
    +关注 私聊
  • lixiaohui012

    第9楼2008/08/28

    我说一下我操作的步骤,各位大侠们帮我找找问题到底出在哪里?
    称取风干土4g,加1ml的甲苯15min后,再加入20ml的1%干酪素(干酪素是用PH
    7.4的0.2M的磷酸盐缓冲液配制)在培养箱中30度下培养24h,培养结束后,再加入2ml 0.1N的硫酸和20%的硫酸钠溶液,再离心(6000转每分钟)15min,取上清液2ml,置于50ml的容量瓶中,加1ml茚三酮(2%的茚三酮,用丙酮配制),在沸水浴上水浴10min,将获的着色溶液用蒸馏水稀释至刻度。
    我的问题现在就是水浴以后,溶液变为茶色,不知道是什么原因。茚三酮应该没有问题,因为标线可以做出来,麻烦各位帮我想想,到底问题出在哪里,你们都是怎么做的啊?

0
    +关注 私聊
  • 简单

    第10楼2008/08/28

    氨基酸在碱性溶液中能与茚三酮作用生成蓝紫色化合物,
    可以考虑可能影响实验的步骤,
    或者蛋白酶的含量太低了!增加土样量再测一测!!

    lixiaohui012 发表:我说一下我操作的步骤,各位大侠们帮我找找问题到底出在哪里?
    称取风干土4g,加1ml的甲苯15min后,再加入20ml的1%干酪素(干酪素是用PH
    7.4的0.2M的磷酸盐缓冲液配制)在培养箱中30度下培养24h,培养结束后,再加入2ml 0.1N的硫酸和20%的硫酸钠溶液,再离心(6000转每分钟)15min,取上清液2ml,置于50ml的容量瓶中,加1ml茚三酮(2%的茚三酮,用丙酮配制),在沸水浴上水浴10min,将获的着色溶液用蒸馏水稀释至刻度。
    我的问题现在就是水浴以后,溶液变为茶色,不知道是什么原因。茚三酮应该没有问题,因为标线可以做出来,麻烦各位帮我想想,到底问题出在哪里,你们都是怎么做的啊?

0
查看更多
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...