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【讨论】反相C18柱子可以用弱酸作为流动相吗?

液相色谱(LC)

  • 看到一个方法,用的是alltima 反相C18柱子,但是流动相是用完全的弱酸,没有有机试剂,这样可以吗?对柱子有损害吗?

    另如果这是根新柱子,以后就用弱酸作为流动相,刚开始使用时用什么溶剂冲洗好呢?
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  • doraemon

    第1楼2008/11/15

    弱酸?弱到什么程度,pH值是多少?一般C18柱pH范围是2-8;
    再就是C18柱基本上是以硅胶为基质,流动相含水太高会严重影响色谱柱寿命;
    使用C18柱时可先使用20%甲醇水溶液冲洗30-60min,再换上样品流动相至基线平稳,做完样品再使用20%甲醇水溶液冲洗60min,最后用乙腈冲洗30min保存色谱柱。

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  • tanggangfeng

    第2楼2008/11/15

    还真没有看到能直接用完全的弱酸来做 流动相,建议用在前看下说明书,一般键合的c18只有2-9。听说waters有一款无机,有机杂合的柱子能承受1-12。还有完全用完全的弱酸是啥级别的,液相对溶剂要求比较高的

    smantha 发表:看到一个方法,用的是alltima 反相C18柱子,但是流动相是用完全的弱酸,没有有机试剂,这样可以吗?对柱子有损害吗?

    另如果这是根新柱子,以后就用弱酸作为流动相,刚开始使用时用什么溶剂冲洗好呢?

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  • smantha

    第3楼2008/11/16

    方法中使用的是磷酸溶液,具体配制成多少百分比的就忘了,但是应该是分析纯的吧,因为方法中是将85%的浓磷酸稀释的。磷酸会有色谱纯的吗?

    另如果是这样,柱子第一次使用之前可以用甲醇冲洗吗?

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  • tanggangfeng

    第4楼2008/11/16

    新柱子一般都用甲醇冲下比较好 。如果用85%的浓磷酸稀释,只能用滤膜过滤下,不知道有没有色谱纯的,问下试剂销售商,看看他们是否知道。

    smantha 发表:方法中使用的是磷酸溶液,具体配制成多少百分比的就忘了,但是应该是分析纯的吧,因为方法中是将85%的浓磷酸稀释的。磷酸会有色谱纯的吗?

    另如果是这样,柱子第一次使用之前可以用甲醇冲洗吗?

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  • hongys1019

    第5楼2008/11/16

    收益不少,我也正需要的知识 。

    doraemon 发表:弱酸?弱到什么程度,pH值是多少?一般C18柱pH范围是2-8;
    再就是C18柱基本上是以硅胶为基质,流动相含水太高会严重影响色谱柱寿命;
    使用C18柱时可先使用20%甲醇水溶液冲洗30-60min,再换上样品流动相至基线平稳,做完样品再使用20%甲醇水溶液冲洗60min,最后用乙腈冲洗30min保存色谱柱。

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  • 〓猪哥哥〓

    第6楼2008/11/17

    这种很少流动相不用有机溶剂,一般需要特制的柱子,一般的C18柱子,可不要这样做。买的时候需要问清楚。
    一般用纯酸水,需要用有机相过渡。
    先用纯甲醇,再换95的酸水过渡。
    磷酸还没有看到色谱级的

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  • 知足常乐!

    第7楼2008/11/17

    只要是柱子承受的PH范围,弱酸溶液可以作为流动相的
    新柱子应该用甲醇冲一定的时间,然后再用水冲洗,最后才能用流动相走基线

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  • smantha

    第8楼2008/11/17

    看了说明书,是用他们的流动相52/48的乙腈/水保存的,如果我要过渡到磷酸稀释液,应该怎么过渡呢?下面这样可以吗?
    52/48的乙腈/水冲洗30分钟后用95/5酸水/乙腈,再过渡到酸水。

    03yx2 发表:这种很少流动相不用有机溶剂,一般需要特制的柱子,一般的C18柱子,可不要这样做。买的时候需要问清楚。
    一般用纯酸水,需要用有机相过渡。
    先用纯甲醇,再换95的酸水过渡。
    磷酸还没有看到色谱级的

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  • 东风恶

    第9楼2008/11/17

    首先看说明书啊,还有问一下该公司的工程师。这样比较保险啊,这年头钱难赚啊!

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  • sarge

    第10楼2008/11/18

    这样的分析我见过~~不要局限一点了~我以前分析硫酸氯吡格雷,当时就有个厂家发来分析方法,和我们的不一样,她们直接在水里加硫酸调PH值,验证后是比我们普图好看。不过出于保护柱子角度考虑我还是把这方法放一边了。

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