活到九十 学到一百 2008/12/23
生物碱测定 2.1 样品供试液的制备称取样品粉末（过80目筛）12.000 g,置于平底烧瓶中,加12 ml 10%NaOH溶液，静置15 min, 加50 ml醋酸乙酯（P>0.900）,摇匀后放在80℃水浴中，保持回流。第1次回流2 h,第2次回流1 h，第3次回流1 h。将滤液合并，减压浓缩至干，用甲醇定容至25 ml，将此溶液过滤后，用移液枪精密吸取50 μl入10 ml容量瓶，用甲醇定容至10 ml备用。 2.2 波长扫描以甲醇为空白对照,将标准对照品溶液、样品供试液和空白对照液在200～700波长范围内进行扫描。结果显示前两者在(289±2) nm处有最大吸收值,且吸收峰相同，而空白对照液在289 nm处几乎没有吸收,故本实验选择289nm为测定波长。 2.3 稳定性实验室温下取40.8 μg/ml的对照品溶液,分别在1,2,3,4,5 h后,于289 nm处测定吸光度。结果5 h内稳定，RSD=0.64%。 2.4 标准曲线 精密称取加兰他敏对照品0.025 5 g，置于25 ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,得到1 020 μg/ml对照品溶液。精密量取对照品溶液0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml入10 ml容量瓶，补甲醇至刻度。以甲醇为空白于289 nm下测定吸光度值。以取样量为横坐标,吸光度值为纵坐标,计算得回归方程Y=0.008 4X-0.022 7,r=0.999 9(n=5),加兰他敏在20.4～102 μg/ml浓度范围内与吸光度值呈良好的线性关系。 2.5 精密度实验取5份标准对照液0.5 ml,照2.4测定方法制备标准品供试液和空白对照液,在289 nm波长处测定吸光度值,RSD为0.51%,表明精密度较好。
无名 2008/12/23
猪猪写错字了，应该是总黄酮不是总黄铜！
zwfirst 2008/12/23
给篇总黄酮测定文献参考 [img]https://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=125700]可见光及紫外光分光光度法测定丁香总黄酮含量的研究[/url]
wangbaba 2008/12/23
按以上方法测定样品总黄铜的含量之前,先把液在200～700波长范围内进行扫描。结果特征吸收峰与芦丁的相同，便可以按照上法.否则就不行.[em0808][em0811]
SOMS课题组 2008/12/23
可以用紫外波长部分来测有机物质，也可以用显色剂显色在可见光部分测定，一般紫外测灵敏度比较低，测含量高的可以，低含量的则需要显色后再测定，灵敏度比较高，看你样品情况的！！
活到九十 学到一百
第2楼2008/12/23
2总黄酮含量测定
2．1 方法
2．1．1 样品溶液的制备
分别精确称取80℃恒温干燥的 样品用50%甲醇回流提取，料液比1：15,提取两次，每次30min，将两次提取液合并浓缩至一定体积，用30%甲醇定容至50ml容量瓶中。从其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中，稀释至刻度，再从100ml容量瓶中取出1.5ml溶液，放至10ml容量瓶中，定容，为待测样品液Ⅰa和Ⅱa。
2．1．2 最大吸收波长的选择
分别作样品液Ⅰa、Ⅱa及芦丁标准品的吸收曲线，均在350 nm 处有一强吸收，因此选择350 nm为测定波长。
2．1．3 标准曲线的制定
精密称取芦丁对照品10.3mg，用少量30%乙醇溶解后，转移至50ml容量瓶，用蒸馏水定容至刻度。分别精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml芦丁溶液置于100ml容量瓶中，于350 nm 波长处测定吸光值，以芦丁空白为参比，以芦丁浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线，提示在4.12～12.36mg／103ml浓度之间，吸光度值与浓度呈现良好的线性关系。
2．1．4 含量测定结果
分别吸取2．2．1中Ⅰa和Ⅱa待测样品液各适量于石英比色池中，按标准芦丁一吸光度测定法，以样液空白参比，于350nm 波长下测定吸光值，计算各提取液中总黄酮含量。
计算公式为:样品总黄酮含量(%)=0.03692(A+0.1644)/W。
注:上式为通过回归方程转化而来，式中A为测得样品液的吸光度值，W为称样量。
活到九十 学到一百
第3楼2008/12/23
生物碱测定
2.1 样品供试液的制备称取样品粉末（过80目筛）12.000 g,置于平底烧瓶中,加12 ml 10%NaOH溶液，静置15 min, 加50 ml醋酸乙酯（P>0.900）,摇匀后放在80℃水浴中，保持回流。第1次回流2 h,第2次回流1 h，第3次回流1 h。将滤液合并，减压浓缩至干，用甲醇定容至25 ml，将此溶液过滤后，用移液枪精密吸取50 μl入10 ml容量瓶，用甲醇定容至10 ml备用。
2.2 波长扫描以甲醇为空白对照,将标准对照品溶液、样品供试液和空白对照液在200～700波长范围内进行扫描。结果显示前两者在(289±2) nm处有最大吸收值,且吸收峰相同，而空白对照液在289 nm处几乎没有吸收,故本实验选择289nm为测定波长。
2.3 稳定性实验室温下取40.8 μg/ml的对照品溶液,分别在1,2,3,4,5 h后,于289 nm处测定吸光度。结果5 h内稳定，RSD=0.64%。
2.4 标准曲线 精密称取加兰他敏对照品0.025 5 g，置于25 ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,得到1 020 μg/ml对照品溶液。精密量取对照品溶液0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml入10 ml容量瓶，补甲醇至刻度。以甲醇为空白于289 nm下测定吸光度值。以取样量为横坐标,吸光度值为纵坐标,计算得回归方程Y=0.008 4X-0.022 7,r=0.999 9(n=5),加兰他敏在20.4～102 μg/ml浓度范围内与吸光度值呈良好的线性关系。
2.5 精密度实验取5份标准对照液0.5 ml,照2.4测定方法制备标准品供试液和空白对照液,在289 nm波长处测定吸光度值,RSD为0.51%,表明精密度较好。
zwfirst
第4楼2008/12/23
给篇生物碱测定文献参考
紫外分光光度法测定蛇足石杉中总生物碱含量
zwfirst
第5楼2008/12/23
给篇总黄酮测定文献参考 可见光及紫外光分光光度法测定丁香总黄酮含量的研究
仪器信息网“仪友会”招募令
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【生活中的仪器检测】有奖征文
LC-MS实验瓶颈的突破与优化
