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【求助】请问荧光素钠这种荧光物质也可以用液质方法测定吗?是否有测过的?

液质联用(LCMS)

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  • 我实验中要测荧光素钠的浓度,本来是想用荧光检测器的HPLC测,但在仪器排期上遇到困难,现在可以有机会用液质,不知道这种物质是否可以用液质方法检测,有没有测过的,可以提供一下方法。如果可以测的话,是不是用液质的方法测在发表文章时会比HPLC更好一些?谢谢。

pharmacy_detect 2009/04/29

荧光素钠可以用HPLC-DAD/ESI-MS来测定。荧光素具有香豆素类化合物基本母核,在UV 280nm有较强的特征吸收,可以设为UV检测波长。 提供一个参考色谱条件: column:C18 UV: 280 nm Mobile phase consisted of (A)water-acetonitrile-acetic acid (89:9:2) and (B) water-acetonitrile(20:80). The separation was performed using a linear gradient from 0% to 30% B in 30 min. The structural information was obtained using a Finnigan LCQ ion trap mass spectrometer (Thermoquest, San Jose, CA) equipped with an API chamber and an ESI source. The ionization mode was negative mode; 参考文献:Development and Validation of an Improved Oxygen Radical Absorbance Capacity Assay Using Fluorescein as the Fluorescent Probe http://www.brunswicklabs.com/artman/uploads/jafc-boxin.pdf The potential of nasal application for delivery to the central brain—a microdialysis study of fluorescein in rats http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6T25-4B8BXPN-3&_user=10&_rdoc=1&_fmt=&_orig=search&_sort=d&view=c&_acct=C000050221&_version=1&_urlVersion=0&_userid=10&md5=154ecfe73b1d03475b3c61995700b263

zhufangwei 2009/04/21

[quote]原文由 [B]ada825[/B] 发表: 我实验中要测荧光素钠的浓度,本来是想用荧光检测器的HPLC测,但在仪器排期上遇到困难,现在可以有机会用液质,不知道这种物质是否可以用液质方法检测,有没有测过的,可以提供一下方法。如果可以测的话,是不是用液质的方法测在发表文章时会比HPLC更好一些?谢谢。[/quote] 看结构应该是可以用液质来做的,有必要才用液质做,没必要就没必要,如果单纯是研究的话,如果是做分析方法研究的话,液质应该比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]文章好发些。 [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/04/200904212014_145833_1644182_3.jpg[/img]

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  • geae

    第1楼2009/04/16

    本人对仪器分析也不是很了解,但接触了一段时间也积累了一些经验。我测过其他的荧光物质,用HPLC和LCMS都可以,并且液相条件相似,如果你的液质也同时联有荧光检测器,我想那是更好不过了,这样不仅知道了目的物的荧光强度,也知道了确切峰的物质分子量,若没有可能只能得到离子强度的图谱。我只用过岛津高端生物质谱 LC-IT-TOF ,其他不了解,出入之处还往谅解。

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  • zhaoxin6545

    第2楼2009/04/17

    我觉得没什么问题,选好波长就行了!最好试一试!

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  • kfsmf

    第3楼2009/04/19

    从原理上说,用液质方法检测完全可以,而且更好。所以发表文章更容易些。

    ada825 发表:我实验中要测荧光素钠的浓度,本来是想用荧光检测器的HPLC测,但在仪器排期上遇到困难,现在可以有机会用液质,不知道这种物质是否可以用液质方法检测,有没有测过的,可以提供一下方法。如果可以测的话,是不是用液质的方法测在发表文章时会比HPLC更好一些?谢谢。

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  • 初晶古恒

    第4楼2009/04/21

    测荧光素钠,你用LCMS可以测定,但是必须加荧光测试。不能单用LCMS测定荧光素钠,因为MS检测器检测不了荧光。

    ada825 发表:我实验中要测荧光素钠的浓度,本来是想用荧光检测器的HPLC测,但在仪器排期上遇到困难,现在可以有机会用液质,不知道这种物质是否可以用液质方法检测,有没有测过的,可以提供一下方法。如果可以测的话,是不是用液质的方法测在发表文章时会比HPLC更好一些?谢谢。

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  • zhufangwei

    第5楼2009/04/21

    看结构应该是可以用液质来做的,有必要才用液质做,没必要就没必要,如果单纯是研究的话,如果是做分析方法研究的话,液质应该比液相文章好发些。


    ada825 发表:我实验中要测荧光素钠的浓度,本来是想用荧光检测器的HPLC测,但在仪器排期上遇到困难,现在可以有机会用液质,不知道这种物质是否可以用液质方法检测,有没有测过的,可以提供一下方法。如果可以测的话,是不是用液质的方法测在发表文章时会比HPLC更好一些?谢谢。

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  • 初晶古恒

    第6楼2009/04/22

    [quote]原文由 zhufangwei 发表:[quote]

    加荧光是涉及到方法学验证中的专属性问题。如果荧光素钠有其他的无荧光强度的同分异构体,或者分子量与荧光素钠相同的物质,那么质谱是证明不了对应保留时间所出来的物质就是纯的且具有荧光的荧光素钠。

    有时候生物药学分析上,在分辨能力不够专属的情况下,常用效价来评价药品有效成分的含量,而不是化学法测定其主成分的含量。虽然由于色谱加质谱的分辨率很高,出现这个可能性比较小,但是理论上一定要排除。这和三聚氰胺检测事件是一样的道理。

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  • pharmacy_detect

    第7楼2009/04/29

    荧光素钠可以用HPLC-DAD/ESI-MS来测定。荧光素具有香豆素类化合物基本母核,在UV 280nm有较强的特征吸收,可以设为UV检测波长。
    提供一个参考色谱条件:
    column:C18
    UV: 280 nm
    Mobile phase consisted of (A)water-acetonitrile-acetic acid (89:9:2) and (B) water-acetonitrile(20:80). The separation was performed using a linear gradient from 0% to 30% B in 30 min. The structural
    information was obtained using a Finnigan LCQ ion trap mass
    spectrometer (Thermoquest, San Jose, CA) equipped with an
    API chamber and an ESI source. The ionization mode was
    negative mode;

    参考文献:Development and Validation of an Improved Oxygen Radical Absorbance Capacity Assay Using Fluorescein as the Fluorescent Probe
    http://www.brunswicklabs.com/artman/uploads/jafc-boxin.pdf

    The potential of nasal application for delivery to the central brain—a microdialysis study of fluorescein in rats

    http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6T25-4B8BXPN-3&_user=10&_rdoc=1&_fmt=&_orig=search&_sort=d&view=c&_acct=C000050221&_version=1&_urlVersion=0&_userid=10&md5=154ecfe73b1d03475b3c61995700b263

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