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【求助】分光光度计测试生物样品时有什么特殊要求吗?

紫外可见分光光度计(UV)

  • 问题描述的具体情况如下:

    一。

    分光光度计:上海光学仪器五厂 721W。

    技术指标:

    波长准确度:正负2nm
    光谱带宽:6nm
    吸光度范围:-0.301~3.000

    透射比准确度:正负0.1%T
    杂光:小于1%(360nm)


    测试:医院化验用,客户主要是测试血清中的葡萄糖含量等化验用。

    二。

    存在问题:光度值不准确。

    客户给的标样,要求测试结果为:

    用蒸馏水调零,波长610nm,标样的吸光度值为0.514。

    我的测量结果是0.795。


    仪器的最初问题:两台721W不能调零和调百。更换了检测开关后,可以了。但是客户反映测量的值不准确了,但两台721W的测试结果比较相近。




    三。仪器的结构:

    在背面有个钨灯电压调节电位器。仪器是自动调零和调百的。
    仪器的电路上没有任何其他可以调节的电位器。

    仪器的电路结构大概是:

    光电池----前置放大器-----信号放大级------电压频率转换电路----处理器




    我的问题是:
    假如说是光路不洁净,0.795和0.514相差也太大了。

    我最初想是不是仪器通过内部程序可以校正光度准确度呢,不过问了厂家后,厂家也没说有。



    不知道大家有什么好想法没?
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  • tutm

    第1楼2009/03/26

    是不是波长有偏离?就用这个仪器检验一下标准液的最大吸收波长是不是610nm。

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  • 祥子

    第2楼2009/03/26

    谢谢tutm老师的帮助。我也想了,偏差有5nm,不过我转动波长手轮,正转和反转5nm,都到不了0.514。我转了大概70nm多,都到不了。

    tutm 发表:是不是波长有偏离?就用这个仪器检验一下标准液的最大吸收波长是不是610nm。

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  • jelly98

    第3楼2009/03/27

    看580黄光,慢拉托架T值可以线性变化,校暗电流,如果是模拟对数,可以考虑电路。上述正常还是怀疑样品,血制品有粘度,时效等。读数差太多,光路可能性不大。

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  • Spain

    第4楼2009/03/27

    先不要管他的标准品,拿一个你的标准滤光片试一下就大概可以判断是否仪器问题了。
    他的样品透过率大概在30%,不正好有块这个标准片吗?
    这个有答案了再去看他的标准品。有些客户所谓的标准品可能是有问题的。

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  • 祥子

    第5楼2009/03/27

    非常感谢,慢拉托架看T线性,不错,学习了。

    jelly98 发表:看580黄光,慢拉托架T值可以线性变化,校暗电流,如果是模拟对数,可以考虑电路。上述正常还是怀疑样品,血制品有粘度,时效等。读数差太多,光路可能性不大。

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  • 祥子

    第6楼2009/03/27

    谢谢spain.

    俺这里目前还没有标准滤光片,不然我也就理直气壮了。

    您那里有没二手的,嘿嘿,卖给我。

    下午打算拿到一个防疫站帮着看看。

    再不行,就送鉴定一下了。

    spain 发表:先不要管他的标准品,拿一个你的标准滤光片试一下就大概可以判断是否仪器问题了。
    他的样品透过率大概在30%,不正好有块这个标准片吗?
    这个有答案了再去看他的标准品。有些客户所谓的标准品可能是有问题的。

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  • Spain

    第7楼2009/03/27

    老大,修仪器标准品都没有,呵呵,那怎么算是修好了啊?
    建议你去买套波长准确度和透过率准确度验证的滤光片,到计量院去标定一下(我帮你测一下也可以,不过没证书的,呵呵,我手头也没有这套标准品,要用的时候都是找公司借出来),维修结果也就没啥争议了,其他指标有争议的时候也不多,所以标准品不带也可以。
    透过率没有标准品的话,让客户配重铬酸钾溶液来测,也不会出现像这个例子中这么大的误差(他说的标准值30%T,实测20%T不到)。
    现在很可能是他样品的问题,两台仪器坏成一样的概率很小的。这也许是你发帖的原因了,你主要是想看看是不是方法问题、样品问题。不好意思我没有测过这类样品。

    nemoium 发表:俺这里目前还没有标准滤光片,不然我也就理直气壮了。

    您那里有没二手的,嘿嘿,卖给我。

    下午打算拿到一个防疫站帮着看看。

    再不行,就送鉴定一下了。

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  • 祥子

    第8楼2009/03/27

    是啊,说的很对,没标准品怎么可以?!

    我这里只有镨铷滤光片。我现在的确缺好多检定工具。

    今天下午找了一个防疫站,测的结果和他们的仪器是大致相符的。所以还是客户的标样的问题了。

    如果防疫站也是相差太多,那只有看一下电路的工作频率是否稳定了。如果频率也是稳定的,我只有怀疑仪器的程序有问题了。

    不过就像您说的,两台仪器都是同样的误差,有点不大可能。

    spain 发表:老大,修仪器标准品都没有,呵呵,那怎么算是修好了啊?
    建议你去买套波长准确度和透过率准确度验证的滤光片,到计量院去标定一下(我帮你测一下也可以,不过没证书的,呵呵,我手头也没有这套标准品,要用的时候都是找公司借出来),维修结果也就没啥争议了,其他指标有争议的时候也不多,所以标准品不带也可以。
    透过率没有标准品的话,让客户配重铬酸钾溶液来测,也不会出现像这个例子中这么大的误差(他说的标准值30%T,实测20%T不到)。
    现在很可能是他样品的问题,两台仪器坏成一样的概率很小的。这也许是你发帖的原因了,你主要是想看看是不是方法问题、样品问题。不好意思我没有测过这类样品。

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  • auto1235

    第9楼2009/03/27

    技术指标:
    波长准确度:正负2nm
    光谱带宽:6nm
    吸光度范围:-0.301~3.000

    透射比准确度:正负0.1%T
    杂光:小于1%(360nm)

    如果杂散光有1%, 吸光度可以测到3A?
    这厂家的指标是不是胡写的?

    你测的吸收值偏高很多,如果波长准,样品正常,说明检测器的线性非常差。
    你平时测浓度的标准曲线线性好吗?

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  • Spain

    第10楼2009/03/27

    auto1235 发表:透射比准确度:正负0.1%T
    杂光:小于1%(360nm)

    如果杂散光有1%, 吸光度可以测到3A?
    这厂家的指标是不是胡写的?

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