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【讨论】有关分光基线的问题

紫外可见分光光度计(UV)

  • 悬赏金额:100积分状态:已解决
  • 前几天在做分光的时候,做了一个连续扫描,扫了几张图,一张空气的,一张蒸馏水的,一张水样的(见下图),我想知道,那些方形的锯齿状波形是怎样产生的?
    首先声明,这是没有扣除空白,直接扫描的,扣除空白后再扫就是基本上是直线了。
    咨询过工程师,按照工程师的说法,我的操作是错误的,做分光任何样品都要扣除基线空白的,就算是这样,我也想知道为什么会产生这样的方形波形。
    在我的印象中,基线、噪音波动等等跑成200-400nm之间的那种形状我还可以接受,但跑成400nm以后的那种方形波我还是头一次看见,这波动也太大了吧,我总觉得总有什么地方不对头,我同一样品和不同样品均扫过不止一次,重复性相当好,都是这样的图形。
    请资深的高手予以解答,这种波形是不是正常的,如果是,是什么原因造成的,如果不是,是什么部件出了问题。如蒙赐教,不甚感激
    用的分光光度计是普析通用的“新世纪”


    补充一些说明和图片:
    我们有两台这一型号的分光,型号完全相同,连采购时间都是一起采购的。暂时分别命名为1#机和2#机。我在4月23号和4月24号分别做了十几张连续扫描图,现分别摘取部分图片如下:

    (一)、1#机 23号的图片

    PS:前面四张是基线校正前的,后面三张是基线校正后的。
    PS PS:3楼的nemoium,在新世纪的软件界面上,有一个“基线”按钮,就是第一张图上我画了个蓝圈的那个钮,按一下就会扣除基线
    PS PS PS:弱弱的问一下,PS在这里是什么意思,不要告诉我是PHOTOSHOP哦

    1、水样


    2、水样稀释


    3、蒸馏水


    4、重叠图


    5、基线校正曲线


    6、基线校正后水样


    7、重叠图


    (二)、1#机 24号的图片(前面三张是我第一次发贴时贴出来的三张图片)

    1、空气


    2、蒸馏水


    3、样品水样


    4、重叠图


    (三)、2#机 24号的图片
    应12楼auto1235的要求,做同一型号的另一台机子的对比试验,其实一开始我也怀疑是不是机子出了问题,就做了另一台机子的扫描,现在把做的图片传给大家看看:
    PS:前六张是基线校正前的,后四张是基线校正后的。

    1、空气


    2、蒸馏水


    3、水样


    4、水样稀释3倍


    5、水样稀释10倍


    6、重叠图


    7、基线校正曲线


    8、基线校正后蒸馏水


    9、基线校正后水样(稀释3倍)


    10、重叠图


    PS:最后一张图实际包含前面七张,为避免凌乱,只标识了最后三张。

    再PS:我认为像上面2#机 24号的第八张图作为基线还可以接受,大家别看放得那么大,其实信号值不大,峰值才只有0.005Abs。而那个锯齿状的作为基线?本人认为难以接受,还有1#机 23号的基线也难以接受,虽然形状还算正常,但波动太大,峰值几乎达到2.0Abs,太大了,个人认为不太正常。

祥子 2009/05/22

[quote]原文由 [B]jelly98[/B] 发表: 这机器紫外能量较低,基线可见区的方波是切换放大倍数造成的。[/quote] 看上去挺有道理的,要是能作个实验就好了。

tony81 2009/05/09

[quote]原文由 [B]auto1235[/B] 发表: 新仪器一般不可能是灯有问题, 这台仪器比较有意思,可惜我没见过它的内部结构。 首先假定它是双光束双光电池或二极管阵列之类检测器的话: 1。 我希望能看到你扫描得到的样品光的能量图E1 和参比光的能量图E2, 如果这台仪器有这个功能的话。 2。 仪器的校正前的基线实际为E1和E2的比值透过率,然后再转化成A值的。 3。 如果能量图上也有这种有规律的锯齿状,我们再来看1#E1,1#E2,2#E1,2#E2四个能量图的特点,估计可以判断出是在检测器还是光路上的问题。 4。1#和2#机的锯齿状形状不一样,隐隐已经感觉这是仪器先天带来的问题。 继续探讨。另这台机器卖价在2W还是3W左右?[/quote] 肯定是2光电池的结构 由于他的内部绝大部分是塑料的 如果遇到野蛮运输 估计够呛 这个型号的紫外的好像零售价在1w8左右 优点和缺点都集中在 塑料框架 波长电机细分驱动

auto1235 2009/05/16

[quote]原文由 [B]hrcren[/B] 发表: 400nm以下的氘灯是开了的,只是刚启动时老是提示“氘灯能量低”,自检通不过,要把分光仪器开关好几次后,才能自检通过,不知道是不是这个原因 两张图都还在,有空的时候试着做一下计算,谢谢auto1235了[/quote] 400以下能量低,就难怪200附近波动大了, 你想象0/0 是多少?

nkgzs 2009/05/15

[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/05/200905151002_150257_1788469_3.jpg[/img] 我随便找了一张以前做的,你看看。 另再问楼主一下,图3是做了蒸馏水基线,重新扫描蒸馏水出的图,对吧?

jelly98 2009/05/22

穿心氘灯指氘灯发光处有一前后通孔,钨灯放在氘灯背后,钨灯的光通过氘灯上的通孔发射出来。

  • 该帖子已被版主-〓疯子哥〓加10积分,加2经验;加分理由:提问详细
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  • slake99

    第1楼2009/05/01

    仪器电压是否有问题,查查

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  • tutm

    第2楼2009/05/01

    这个图是有点奇怪,应该显示的是噪音情况。但是重复性又这样好,信号强度如此高,又不像是噪音,可能各家厂商信号处理方式不同。

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  • 祥子

    第3楼2009/05/01

    问下,你的仪器的220V是通过交流稳压器了吗?

    感觉也很可能是电源电压的问题。

    看看钨灯的发光是否稳定呢?别是在一闪一闪的

    弱弱的问一下,基线空白的扣除是怎么做呢?能详细说下吗?

    扣空白就直了,感觉挺关键的一点。

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  • tutm

    第4楼2009/05/01

    如果是电源问题,重复性不会这么好的,我看不像。

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  • 夕阳

    第5楼2009/05/01

    应助达人

    我个人看法与电压(外电网及仪器内部)无关。
    如果将三条基线叠加在一起会发现,所有的噪声均会重叠在一起,最大的原因是光路上的。这是一个固定的噪声。所以做完基线校正后,噪声消失了(实际上是仪器的数据处理部将其抵消了)。
    但至于不做基线校正时,基线噪声是否应该高于正负0.1Abs,只有大家用自己的仪器试试看了。

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  • 祥子

    第6楼2009/05/01

    查了下,
    普析的新世纪是双光束仪器。

    我是这么想的。

    双光束仪器是可以抵消掉光源波动的影响

    所以,扣空白后,基线直了。

    如果不扣空白,那就是测一个光束的能量变化,所以,基线成这样了。

    至于anping老师说的光学元件的问题,400nm后波段都是这样,而且是可以近似看成是周期性的,如果是污迹,或者光学元件缺陷,那周期性的可能性较小。而且,如果是光学元件,那200~400nm很可能也有。

    因为是400nm后的,所以有可能是钨灯或者钨灯的供电问题。

    电源噪声,的确不规则的居多。但假如周围有大型机电设备不断的起停,造成电源电源的周期性波动,也有可能。

    就像anping老师说的,0.1Abs的吸光度变化,要有多大噪声才能引起呢?


    双光束,对所有同时在两束中出现的噪声都应该能扣除掉。比如电源、检测电路上的噪声。




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  • wangjunyu

    第7楼2009/05/01

    应助工程师

    钨灯的因素大一些

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  • 东风恶

    第8楼2009/05/01

    个人是灯的能量不行了,主要参考的是我的液相基线也是类似的情况,最后换了灯就没有出现了。

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  • 玅雪清扬

    第9楼2009/05/04

    是啊 这个情况应该不对

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  • MonSun

    第10楼2009/05/04

    您的三张图相当于不同情况下仪器及外界环境的噪声图了;改变扫描过程的数据点间400以后的锯齿形应该会有变化。

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