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【求助】求助!请问下测出的吸光度值是负值是什么意思???

  • suifengmengying
    2011/06/17
  • 私聊

紫外可见分光光度计(UV)

  • 用Lowry法测蛋白质含量,做标准曲线的时候,每个标准浓度下测出的吸光度值都是负数,请问各位高手这是怎么回事啊??怎么解决这种现象呢??万分感谢...
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  • tutm

    第1楼2011/06/17

    “做标准曲线的时候,每个标准浓度下测出的吸光度值都是负数”?

    你的溶液用肉眼看,是不是随浓度提高颜色变深?

    如果不是,可能是你的显色处理或试剂有问题;
    如果是,那可能是你的仪器操作有问题,检测波长是多少?

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  • suifengmengying

    第2楼2011/06/17

    溶液颜色的确是随着浓度增大而变深的,那应该是操作的问题了,请问下操作一般在哪些地方出问题了呢

    tutm(tutm) 发表:“做标准曲线的时候,每个标准浓度下测出的吸光度值都是负数”?

    你的溶液用肉眼看,是不是随浓度提高颜色变深?

    如果不是,可能是你的显色处理或试剂有问题;
    如果是,那可能是你的仪器操作有问题,检测波长是多少?

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  • tutm

    第3楼2011/06/17

    不知你用的是双光束仪器还是单光束的,如果是前者会不会是样品和参比放反了。

    最好描述一下你是怎么做的。

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  • 夕阳

    第4楼2011/06/18

    应助达人

    (1)仪器作了基线校正或调零了吗?
    (2)仪器使用的参比溶液与标准溶液的本底是同一种物质吗?

    suifengmengying(suifengmengying) 发表:用Lowry法测蛋白质含量,做标准曲线的时候,每个标准浓度下测出的吸光度值都是负数,请问各位高手这是怎么回事啊??怎么解决这种现象呢??万分感谢...

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  • suifengmengying

    第5楼2011/06/19

    刚开始已经校零的了,我使用的是TU-1990双光束紫外分光光度计,样品池只能放两个比色皿,靠近外边这个比色皿装的是参比溶液,而靠近里边那个是装样品的,不知道放反没有啊

    tutm(tutm) 发表:不知你用的是双光束仪器还是单光束的,如果是前者会不会是样品和参比放反了。

    最好描述一下你是怎么做的。

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  • tutm

    第6楼2011/06/20

    呵呵,就是放反了呀!
    靠你自己的外边这个应该放样品,远离你的里边那个放参比。

    suifengmengying(suifengmengying) 发表:刚开始已经校零的了,我使用的是TU-1990双光束紫外分光光度计,样品池只能放两个比色皿,靠近外边这个比色皿装的是参比溶液,而靠近里边那个是装样品的,不知道放反没有啊

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  • 夕阳

    第7楼2011/06/20

    应助达人

    呵呵,就是放反了呀!
    靠你自己的外边这个应该放样品,远离你的里边那个放参比。[/quote]

    utm 老师的判断是对的。

    一般而言,双光束的仪器,靠近前面的是放置样品溶液的,靠近后面的是放置参比溶液的。

    tutm(tutm) 发表:刚开始已经校零的了,我使用的是TU-1990双光束紫外分光光度计,样品池只能放两个比色皿,靠近外边这个比色皿装的是参比溶液,而靠近里边那个是装样品的,不知道放反没有啊

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  • 夕阳

    第8楼2011/06/20

    应助达人



    太有先见之明了,不愧是老手!经验太丰富啦!

    tutm(tutm) 发表:不知你用的是双光束仪器还是单光束的,如果是前者会不会是样品和参比放反了。

    最好描述一下你是怎么做的。

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  • tutm

    第9楼2011/06/20

    呵呵,猜的。因为这位版友测得的全部是负值,而颜色深浅又是正常,通常这是不太可能的,最多浓度低的1-2个会有可能负的;因此估计他放错位置了。

    夕阳(anping) 发表:

    太有先见之明了,不愧是老手!经验太丰富啦!

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  • suifengmengying

    第10楼2011/06/21

    嘿嘿,,真是感激不尽啊!!

    tutm(tutm) 发表:呵呵,猜的。因为这位版友测得的全部是负值,而颜色深浅又是正常,通常这是不太可能的,最多浓度低的1-2个会有可能负的;因此估计他放错位置了。

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