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【分享】基础知识--培养基

太白金星

2009/08/07

培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。

　　按所用原料不同，可分为两类：应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的，称为天然培养基；应用化学药品配成并标明成分的，称为合成培养基或综合培养基。化学试剂中的培养基，大多为合成培养基。由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在2~6。C的冰箱内。

　　常见培养基有：

　　1、细菌培养基

　　配方一牛肉膏琼脂培养基

　　牛肉膏0.3克，蛋白胨1.0克，氯化钠 0.5克，琼脂1.5克，

　　水 100毫升

　　在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2～7.6,分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌30分钟。

　　配方二马铃薯培养基

　　取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。

　　配方三根瘤菌培养基

　　葡萄糖 10克磷酸氢二钾 0.5克

　　碳酸钙 3克硫酸镁 0.2克

　　酵母粉 0.4克琼脂 20克

　　水 1000毫升 1%结晶紫溶液 1毫升

　　先把琼脂加水煮沸溶解，然后分别加入其他组分，搅拌使溶解后，分装，灭菌，备用。

　　2、放线菌培养基

　　配方一淀粉琼脂培养基（高氏培养基）

　　可溶性淀粉 2克硝酸钾 0.1克

　　磷酸氢二钾 0.05克氯化钠 0.05克

　　硫酸镁 0.05克硫酸亚铁 0.001克

　　琼脂 2克水 100毫升

　　先把淀粉放在烧杯里，用5毫升水调成糊状后，倒入95毫升水，搅匀后加入其他药品，使它溶解。在烧杯外做好记号，加热到煮沸时加入琼脂，不停搅拌，待琼脂完全溶解后，补足失水。调整pH值到7.2～7.4，分装后灭菌，备用。

　　配方二面粉琼脂培养基

　　面粉 60克琼脂 20克

　　水 1000毫升

　　把面粉用水调成糊状，加水到500毫升，放在文火上煮30分钟。另取500毫升水，放入琼脂，加热煮沸到溶解后，把两液调匀，补充水分，调整pH值到7.4，分装，灭菌，备用。

　　3、真菌培养基

　　配方一萨市（Sabouraud’s）培养基

　　蛋白胨 10克琼脂 20克

　　麦芽糖 40克水 1000毫升

　　先把蛋白胨、琼脂加水后，加热，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40克麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，然后分装，灭菌，备用。

　　本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。

　　配方二马铃薯糖琼脂培养基

　　把马铃薯洗净去皮，取200克切成小块，加水1000毫升，煮沸半小时后，补足水分。在滤液中加入10克琼脂，煮沸溶解后加糖20克（用于培养霉菌的加入蔗糖，用于培养酵母菌的加入葡萄糖），补足水分，分装，灭菌，备用。

　　把这培养基的pH值调到7.2～7.4，配方中的糖，如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。

　　配方三黄豆芽汁培养基

　　黄豆芽 100克琼脂 15克

　　葡萄糖 20克水 1000毫升

　　洗净黄豆芽，加水煮沸30分钟。用纱布过滤，滤液中加入琼脂，加热溶解后放入糖，搅拌使它溶解，补足水分到1000毫升，分装，灭菌，备用。

　　把这培养基的pH值调到7.2～7.4，可用来培养细菌和放线菌。

　　配方四豌豆琼脂培养基

　　豌豆 80粒琼脂 5克

　　水 200毫升

　　取80粒干豌豆加水，煮沸1小时，用纱布过滤后，在滤液中加入琼脂，煮沸到溶解，分装，灭菌，备用。

　　4、食用菌菌种培养基

　　配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基

　　20%马铃薯煮汁 1000毫升

　　蔗糖 20克琼脂 18克

　　把马铃薯洗净去皮后，切成小块。称取马铃薯小块200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后，过滤。在滤汁中补足水分到1000毫升，即成20%马铃薯煮汁。在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖，煮沸，使它溶解后，补足水分，分装，灭菌，备用。使用该培养基对pH值要求不严格，可以不测定。

　　配方二综合马铃薯培养基

　　20%马铃薯煮汁 1000 毫升

　　磷酸二氢钾 3克硫酸镁 1.5克

　　葡萄糖 20克维生素 10毫克

　　琼脂 18克

　　先配制20%马铃薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各种组分，加热溶解后补足水分，调整pH值到6。分装，灭菌，备用。该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。

　　5.烟草的培养基

　　在植物组织培养时,通过调节IAA和CTK的比值能影响愈伤组织分化出根或芽.CTK/IAA高时,愈伤组织分化芽

　　CTK/IAA低时,分化根;CTK/IAA比例适中维持愈伤组织不分化

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