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【求助】荧光分析过程中的干扰问题?

  • lslfangjian
    2009/09/21
  • 私聊

分子荧光光谱

  • 1、入射光单色后,为什么透射光会对荧光的检测产生干扰,而需要将检测器、光源和样品池呈90度布置?
    2、荧光检测过程中的杂散光有哪些?
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  • fragr

    第1楼2009/09/21

    回答:1 不是透射光,是散射光;90度布置会最大可能的减少散射光的干扰;
    2.杂散光,来自光栅的不完美、光学元件的不完美、光学元件的表面污染。

    lslfangjian 发表:1、入射光单色后,为什么透射光会对荧光的检测产生干扰,而需要将检测器、光源和样品池呈90度布置?
    2、荧光检测过程中的杂散光有哪些?

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  • lslfangjian

    第2楼2009/09/23

    请问散射光的来源?

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  • fragr

    第3楼2009/09/26

    散射光是激发入射光的瑞利散射造成的,可以有一阶和二阶散射,二阶散射也叫倍频峰。

    lslfangjian 发表:请问散射光的来源?

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  • lslfangjian

    第4楼2009/10/06

    那就是说散射光和荧光一样,都是向各个方向发射的,
    90度角布置对减小散射光的干扰是没有帮助的,减小散射光的干扰是通过第二单色器完成的。
    那90度角布置又是为了什么?

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  • fragr

    第5楼2009/10/07

    看了楼主遇到了难以解决的问题了。自己用一个循环把自己套在里面了。

    说明:散射光来自入射光,所以是有方向的。但是样品表面非镜面,所以有无规的散射。
    90度布置就是为了减少入射光散射的干扰。一阶和二阶散射是有发射单色器和滤光片协同完成的。

    当然还有杂散光的问题。需要楼主看书了。

    lslfangjian 发表:那就是说散射光和荧光一样,都是向各个方向发射的,
    90度角布置对减小散射光的干扰是没有帮助的,减小散射光的干扰是通过第二单色器完成的。
    那90度角布置又是为了什么?

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  • lslfangjian

    第6楼2009/10/07

    今天看了一个关于散射光的资料,
    散射光是向各个方向发射的,只是在与入射光垂直的方向,散射光的强度最小,我想这应该是采用90度布置减小散射光对荧光检测干扰的原因了。
    但是还有一个问题不明白:散射分为有频移的散射和没有频移的散射,对于没有频移的散射光,其波长与透射光的波长一样,而与荧光的波长不同,
    而且荧光检测器中使用了两个单色器,是不是可以说,即使,不采用90度布置,透射光和没有频移的散射光对荧光的检测是没有干扰的?
    而采用90度布置只是为了减小那些与待测荧光波长相同的有频移散射光对荧光检测的干扰?

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  • fragr

    第7楼2009/10/12

    90°布置是减少入射光中的杂散光对荧光的干扰。

    lslfangjian 发表:今天看了一个关于散射光的资料,
    散射光是向各个方向发射的,只是在与入射光垂直的方向,散射光的强度最小,我想这应该是采用90度布置减小散射光对荧光检测干扰的原因了。
    但是还有一个问题不明白:散射分为有频移的散射和没有频移的散射,对于没有频移的散射光,其波长与透射光的波长一样,而与荧光的波长不同,
    而且荧光检测器中使用了两个单色器,是不是可以说,即使,不采用90度布置,透射光和没有频移的散射光对荧光的检测是没有干扰的?
    而采用90度布置只是为了减小那些与待测荧光波长相同的有频移散射光对荧光检测的干扰?

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  • lslfangjian

    第8楼2009/10/12

    您说的杂散光的频率与入射光的的频率相同,还是与待检测荧光的频率相同?

    fragr 发表:90°布置是减少入射光中的杂散光对荧光的干扰。

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  • pipill

    第9楼2010/06/03

    90度布置为什么能减少入射光中的杂散光对荧光的干扰呢

    fragr(fragr) 发表:90°布置是减少入射光中的杂散光对荧光的干扰。

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