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【原创】缓冲盐使用不当对色谱柱有什么影响?

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  • 缓冲盐使用不当对色谱柱有什么影响?

    在色谱分析过程中常常需要使用缓冲盐来调节流动相的pH值,缓冲盐的不当使用对色谱柱可能造
    成柱压升高、柱效下降以及使化合物的保留时间发生变化等影响:
    1)柱压升高;
    原因:缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出,堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙,阻碍流动相传质,引起柱压升高。
    2)相同化合物的保留时间发生变化;
    原因:如果没有冲洗干净就进行进样,色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化。
    3)柱效下降;
    原因:i)有些缓冲盐会渗入到键合相的深处,损害硅胶基体,导致色谱柱键合相流失,柱床变松,柱效下降;ii)凝结在键合相表面,使C18碳链难以舒展,对物质的保留能力下降,导致柱效下降。因此用过缓冲盐后需要对色谱柱进行冲洗,流动相中缓冲盐浓度较大时应特别引起注意。
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  • 小卢

    第1楼2009/10/13

    冲洗色谱柱是我们大多使用的是水,但是水会冲坏色谱柱内的碳结构,有什么好的方法吗?尤其是缓冲盐很多时?

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  • 1234chen

    第2楼2009/12/04

    zxhchf 在另外一个贴子里写了方法。
    缓冲盐析出的补救方法:
    1)方案1:用甲醇/水=20/80以1.0ml/min流速35℃条件下反向冲洗色谱柱120min;
    2)方案2:用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向冲洗色谱柱过夜。
    反向冲这么久,会不会冲坏了?

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  • zxhcnf

    第3楼2009/12/04

    不会的,Welch公司的色谱柱两端的筛板孔径是相同的,正着用反着用,正着冲反着冲都是可以的,不会对柱床造成什么影响

    1234chen(1234chen) 发表:zxhchf 在另外一个贴子里写了方法。
    缓冲盐析出的补救方法:
    1)方案1:用甲醇/水=20/80以1.0ml/min流速35℃条件下反向冲洗色谱柱120min;
    2)方案2:用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向冲洗色谱柱过夜。
    反向冲这么久,会不会冲坏了?

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  • 雪妖

    第4楼2009/12/04

    最好不要反冲,
    我一般这样做的,肯定不会有问题:
    一天检测完了以后,留至少40分钟冲洗色谱柱
    不管流动相的比例是多少,冲色谱柱时都用10%的甲醇水溶液,1ml/min冲30min以上,肯定不会有问题,有时间就再用40%甲醇水溶液冲30min。没有时间保持过夜或三五天是没有问题的

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  • fulinx

    第5楼2009/12/05

    忘了冲柱子就废了!

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  • zxhcnf

    第6楼2009/12/05

    用水冲洗色谱柱不超过60min通常不会有什么太大的问题,但长时间冲洗容易导致“相塌陷”,“相塌陷”是指保留时间越来越短,最后一点保留都没有,样品进去后在死体积的位置就出来了;“相塌陷”通常用纯甲醇或纯乙腈冲洗60min后可以恢复。在您的流动相中如果含有缓冲盐时,您可以看一下这个帖子,但愿能对您有点有益的帮助。http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20091019/2165174/

    小卢(luxw) 发表:冲洗色谱柱是我们大多使用的是水,但是水会冲坏色谱柱内的碳结构,有什么好的方法吗?尤其是缓冲盐很多时?

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  • 雪妖

    第7楼2009/12/05

    最好还是不要用纯水冲柱子

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  • 毛毛儿

    第8楼2010/04/06

    应助工程师

    用了缓冲盐的柱子就是得多留些时间冲洗柱子,哪怕检测任务再严重,也不能忽视,不过完全纯水冲柱子应该是不可取的,可以从高浓度的水慢慢过渡到纯有机相!

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  • wanglinglan

    第9楼2010/09/29

    严重者,报废

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    第10楼2010/10/11

    用不含缓冲盐的流动相就可以了~
    没必要用水,呵呵~

    小卢(luxw) 发表:冲洗色谱柱是我们大多使用的是水,但是水会冲坏色谱柱内的碳结构,有什么好的方法吗?尤其是缓冲盐很多时?

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