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【求助】进样后电流一直下降

  • cc61284421
    2009/10/28
  • 私聊

毛细管电泳(CE)

  • 为什么只要我一进样,电流就会往下降?

    所有的峰都并在一起,完全分不开

    等峰出完后,电流就又恢复成一条直线了

    我试了好几种缓冲液,结果都是一样的

    如果不进样,用缓冲液跑空针的话,电流是正常的一条直线

    我要分离的物质主要是生物碱,木脂素等成分

    用乙酸乙酯提取后,再用甲醇溶的,

    进样前都已经超声,过滤

    请问出现这种情况,是我的样品制备方面的问题吗?

    有知道的朋友请下忙,谢谢了!!
  • 该帖子已被版主-sunpengwjh加2积分,加2经验;加分理由:鼓励提问!
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  • cpudaxiao

    第1楼2009/10/28

    应该是样品析出的原因,beckman可以延长ramptime时间,或干脆配好样品后先静置20min在进样。

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  • sunpengwjh

    第2楼2009/10/28

    溶解样品的溶液和你所用的缓冲溶液北京不一样,也就是因为这样所以出完峰,你进样的那部分溶液走过了检测口,后来在走都是一致的溶液,电流就不会在变了!

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  • cc61284421

    第3楼2009/10/28

    谢谢两位的热心指点!
    cpudaxiao
    样品配好后我静置过的
    我想请问一下 延长ramptime时间的作用 是什么呢?
    我在论坛上找过,但没找到
    sunpengwjh
    我的缓冲体系用的是水相
    可能是甲醇的缘故使电流变差吧,那么该如何改进呢?
    超声的时候用50%甲醇?在缓冲液中加入一定量的添加剂,比如乙腈?
    还是不用甲醇提取,换用别的有机溶剂?

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  • sunpengwjh

    第4楼2009/10/28

    提取用什么都可以,关键要提取的效果好,提取之后再配置样品的时候取很少量溶解在缓冲溶液里边即可!这样能够保证进样后和缓冲溶液背景差的不是很多!先这样试试吧!看看可不可以!

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  • cc61284421

    第5楼2009/10/28

    昨天我把样品用水稀释了一倍,得到的是看上去很浑浊的东西,然后过滤进样试了一下,电流下降的情况确实有点好转,只是出峰情况依然没有改善

    sunpengwjh(sunpengwjh) 发表:提取用什么都可以,关键要提取的效果好,提取之后再配置样品的时候取很少量溶解在缓冲溶液里边即可!这样能够保证进样后和缓冲溶液背景差的不是很多!先这样试试吧!看看可不可以!

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  • sunpengwjh

    第6楼2009/10/29

    能把峰的谱图贴出来看看么?是不是组分太多了?

    cc61284421(cc61284421) 发表:昨天我把样品用水稀释了一倍,得到的是看上去很浑浊的东西,然后过滤进样试了一下,电流下降的情况确实有点好转,只是出峰情况依然没有改善

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  • cc61284421

    第7楼2009/10/30

    今天把样品直接用甲醇超声提取后

    稀释了大概5倍,然后进样

    电流的问题确实大为改善了

    不过峰却只有寥寥几个,要不就峰很小,晕啊

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  • i_am_ling

    第8楼2009/10/30

    提取的含量本来就低,然后在稀释,峰当然要小了,你提取之后可以先简单的做个浓缩,这样浓度不就大了么?然后在稀释,进样可能会好一些!

    cc61284421(cc61284421) 发表:今天把样品直接用甲醇超声提取后

    稀释了大概5倍,然后进样

    电流的问题确实大为改善了

    不过峰却只有寥寥几个,要不就峰很小,晕啊

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  • xcdfrg

    第9楼2009/11/03

    确实应该考虑一下缓冲溶液和样品溶液之间的关系!

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  • spying

    第10楼2009/11/04

    好帖子,一直搞不懂,原来是这个原因!

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