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【第二届网络原创大赛参赛作品】实验过程中遇到的几个问题和大家分享！

sunpengwjh

2009/11/17

毛细管电泳（CE）

实验过程中遇到的几个问题和大家分享
1、毛细管电泳柱子堵了。如果柱子本身没有质量问题，在我们实验过程中发现没有电流或者说堵了，应该用水冲洗毛细管，并观察是否有水流出，若无水流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂；毛细管没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。如果通过上述的方法还不能解决此问题，说明很有可能是柱子质量的问题。
前一段时间在论坛解决一个这样的问题就是这样的情况，柱子一直不通，经过很多排查，最后定为柱子质量问题！
2、进样后仪器运行很长时间不出峰。进样后运行了很长时间不出峰，如图1所示，在刚开始做新样品，或是刚开始接触电泳的很容易碰到这样的情况，实际上这是因为缓冲溶液的pH所致。样品在不同的pH缓冲溶液里边所带的电荷是不一样的，当样品在选用的缓冲溶液里边带负电荷，就很难被检测到，因为这个时候样品的运行速度是电渗流的速度减去电泳的速度，而当样品带正电荷的时候，样品的保留时间等于电渗流的速度加上电泳的速度，这样就很容易被检测到。我最初做的手性药物拆分，经过寻找pH，运行30分钟，成功的检测到了该物质。

图1 电泳谱图

图2电泳谱图

3、进样后出现平台峰如图3所示。这也是我们在试验中经常遇到的问题，这个问题很好解决，只是对出学者来说，还考虑不到这一点。是由于缓冲溶液和溶解样品所用的溶液不是同一种类，或不是同一pH，就很容易出现这种现象，解决的方法就是配置好的缓冲溶液来溶解样品！

图3电泳平台谱图
4、毛细管电泳仪电极易折断。首先我们要检查电极是不是垂直，如果不垂直，进样的时候或是更换缓冲溶液瓶子的时候，电极插下来就很容易弄断。解决的方法就是将电极认为的拉直。还有就是缓冲溶液的小瓶，这个事大家经常忽略的问题，如果小瓶很久没有更换，瓶盖老化，这也很有可能造成电极的断裂，所以小瓶用一段时间就要检查一下瓶盖是不是老化了，如果老化要及时更换。这个问题在论坛上也会经常看到，电极是铂金的，价格很高，我们在使用的过程中一定要注意。
以上是在电泳实验过程中常会遇到的问题，想到这些先整理这些，希望对大家多少有点帮助！也是抛砖引玉，期待版友的大作早日问世！

精
该帖子已被管理者-〓疯子哥〓设置为精华，下面是奖励记录：加15积分,加5声望

分
该帖子已被版主-独钓寒江雪加15积分，加2经验;加分理由:11月原创作品加分

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titi

第1楼2009/11/17

有心的楼主啊~
自己实践过程中遇到的问题认真解决了~分享出来是对版友最宝贵的资料啊~~

0

i_am_ling

第2楼2009/11/17

很不错的资料，谢谢楼主和大家分享！

0

gansinibaobei

第4楼2009/11/19

谢谢楼主，学习了。

0

小雨哥

第5楼2009/11/20

真的是很不错的资料啊！谢谢楼主了！

0

viernes

第6楼2009/11/20

恩楼主说的很好都是很实用的几点

0

baishizhiqiu

第7楼2009/12/02

不错，很实用的！
大家应该分享自己的经验，给新手都一点指教。
谢谢楼主！

0

baishizhiqiu

第8楼2009/12/02

不是“都”，是“多”。
不好意思！

0

lhc2007

第9楼2009/12/02

总结得好,实践出真知,学习了.

0

zj2635

第10楼2009/12/04

谢谢楼主的经验分享！

0

Onway

第11楼2010/03/15

要是有仪器图片就好了，
图片对大家大家感性认识很好，尤其没见过这类仪器的

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