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【求助】液质联用定量植物鞘脂

液质联用(LCMS)

  • 想做植物鞘脂定量。有一篇发在RCM上的文章,利用LC/MS/MS分离定量了168种鞘脂(sphingolipid)。但是文献上有好几个地方看不明白。

    1、如果想定量一种确定的鞘脂一定要有标样吗?昨天去请教老师的时候她告诉我一定要有纯的标样,但是文献中似乎不是这样做的,它仅仅只选了一个内标(植物里不存在的),然后就做出了各种鞘脂(包括内标本身)的标准曲线。168种啊,光买标准品也买不起啊,何况很多根本就没有。

    2、根据管理老师的说法我需要准备纯的样品来建立MRM方法学,文献上是这样说的:use purified sphingolipids frome plant for MRM......但是文章本身并没有说怎么得到purified sphingolipids,我认为是文章的作者自己制备的,管理的老师认为是买的。但是文章里只有制备粗提物(上样检测用)的方法。请大家说说自己的看法。

    3、文章里制备样品时全部用的玻璃制品(因为是脂类),研磨时则利用匀浆器加玻璃匀浆锤实现的,此步可否直接使用液氮+研钵来实现(那个匀浆器和匀浆锤太贵了而且就为这一个实验)。

    4、制备的最后一个过程文献里这样写:...dried under nitrogen,此步怎么实现?旋转蒸发可以代替吗?

    谢谢大家了!
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  • dickwang2008

    第1楼2009/12/29

    相应的回答见红字部分。如有问题,欢迎继续讨论。

    lzhwin(lzhwin) 发表:想做植物鞘脂定量。有一篇发在RCM上的文章,利用LC/MS/MS分离定量了168种鞘脂(sphingolipid)。但是文献上有好几个地方看不明白。

    1、如果想定量一种确定的鞘脂一定要有标样吗?昨天去请教老师的时候她告诉我一定要有纯的标样,但是文献中似乎不是这样做的,它仅仅只选了一个内标(植物里不存在的),然后就做出了各种鞘脂(包括内标本身)的标准曲线。168种啊,光买标准品也买不起啊,何况很多根本就没有。

    内标可以只有一个,但是如果你要定量所有的鞘脂,就需要所有响应的标准品。

    2、根据管理老师的说法我需要准备纯的样品来建立MRM方法学,文献上是这样说的:use purified sphingolipids frome plant for MRM......但是文章本身并没有说怎么得到purified sphingolipids,我认为是文章的作者自己制备的,管理的老师认为是买的。但是文章里之后制备粗提物(上样检测)的方法。请大家说说自己的看法。
    自己制备也可以,但有一点,你必须保证制备的纯度,或者说你要知道制备样品里面含有多少。只有这样才能用于定量。

    3、文章里制备样品时全部用的玻璃制品(因为是脂类),研磨时则利用匀浆器加玻璃匀浆锤实现的,此步可否直接使用液氮+研钵来实现(那个匀浆器和匀浆锤太贵了而且就为这一个实验)。


    4、制备的最后一个过程文献里这样写:...dried under nitrogen,此步怎么实现?
    这一步就是利用氮吹仪吹干。

    谢谢大家了!

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  • lzhwin

    第2楼2009/12/29

    这个系统是应用于研究性论文,而不是质量检测,我知道药典或者农药残留这样的系统是如版主所说需要提供纯的样品来定量。但是这篇文章好像确实没有这样做,个人理解似乎仅仅是用内标做了标准曲线,然后其他组分就根据内标做梯度稀释也画出了标准曲线。第三幅图片里乘以因子的描述是我最不懂的地方。

    除了用氮吹仪还有没有别的解决方法?







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  • dickwang2008

    第3楼2009/12/29

    楼主的图片无法显示,请重新上传。

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  • 我叫张新新

    第4楼2014/03/20

    如果物质比较稳定的话,可以在水浴锅上面加热,温度不要调节太高,慢慢挥发

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